Бактериальное загрязнение воздуха

Вмешательство - Вечером перед плановой операцией стерильные хирургические инструменты будут подготовлены в спокойной обстановке только с 2 людьми в операционной (вмешательство). После этого стерильные товары будут защищены стерильными чехлами, а время ожидания операции составит примерно 12 часов (вмешательство). Контроль заключается в подготовке стерильных материалов утром при большем количестве людей в операционной (примерно 4-5 человек). После этого стерильные товары будут защищены стерильными чехлами (время ожидания операции составит примерно один час). Для распределения будет создан сгенерированный компьютером рандомизированный список, и независимый секретарь будет укладывать распечатанные заметки, показывающие групповое задание, в упорядоченные, запечатанные, непрозрачные конверты.

Для измерения времени до операции столы будут снабжены пластинами с кровяным агаром для измерения бактериального загрязнения воздуха. Будет два стола, один защищен стерильными крышками, а другой останется без защитных крышек (как в группе вмешательства, так и в контрольной группе).

Результаты и материалы. Первичным результатом является бактериальный рост, выделенный в чашках с кровяным агаром с аэробами и анаэробами (среда с агаром с гематином 4,3% мас./об. [основа колумбийского кровяного агара] с добавлением 6% мас./об. шоколадизированной дефибринированной лошадиной крови) и чашках FAA (LAB 90). Прихотливый анаэробный агар 4,6% (вес/объем) с добавлением 5% (вес/объем) дефибринированной лошадиной крови). Вторичным результатом является инфекция области хирургического вмешательства со сравнением типа бактерий.

Сбор данных. Всего будет использовано 1260 чашек с кровяным агаром для сбора данных о бактериальном загрязнении воздуха. Чтобы выявить различия в бактериальном загрязнении воздуха при различных условиях приготовления стерильных товаров, в начале приготовления на стол будут поставлены шесть чашек с агаром (три с гематином и три с АЖК). Когда подготовка будет завершена, чашки с агаром будут собраны путем закрытия крышек чашек с агаром. Для измерения зависящего от времени бактериального загрязнения воздуха перед операцией новые чашки с агаром (три гематина и три FAA), которые будут установлены на столах как для экспериментальной, так и для контрольной группы, и покрыты стерильными салфетками. Чтобы измерить эффективность стерильного покрытия от бактериального загрязнения воздуха, чашки с агаром будут оставлены открытыми до операции как в группе вмешательства, так и в контрольной группе. При подготовке пациента к операции крышки снимут и все пластины соберут, закрыв крышки.

Микробиология. Планшеты будут проанализированы в отделении лабораторной медицины, клинической микробиологии университетской больницы Эребру в соответствии со специальным протоколом исследования. Планшеты с гематином инкубируют при 36°C в аэробных условиях, тогда как планшеты с FAA инкубируют в анаэробных условиях (10% H2, 10% CO2, 80% N2) при 37°C. После 24 и 48 часов аэробной инкубации и пяти дней анаэробной инкубации рост бактерий определяют количественно путем подсчета колониеобразующих единиц на чашку. Изоляты будут идентифицированы с помощью обычных диагностических процедур и определены на уровне вида с помощью времяпролетной масс-спектрометрии с лазерной десорбцией/ионизацией на матрице (Microflex LT и Biotyper 3.1, Bruker Daltonik, Бремен, Германия).

Стандартный тест на чувствительность к антибиотикам для стафилококков будет проводиться диско-диффузионным тестом на цефокситин (30 мг), фузидовую кислоту (10 мг), эритромицин (15 мг), клиндамицин (2 мг), триметоприм/сульфаметоксазол (25 мг), гентамицин ( 10 мг), норфлоксацин (10 мг), ципрофлоксацин (5 мг) и рифампин (5 мг) (все диски с антибиотиками от Oxoid, Бейзингсток, Великобритания) с 0,5 бактериальной суспензией МакФарланда в 0,85% NaCl на агаре Мюллера-Хинтона II 3,8 % мас./об. планшетов (BD Diagnostic Systems, Sparks, MD, USA). После 16-20 часов инкубации при 35°C диаметры зон будут измерены, и каждый изолят будет оценен в соответствии с контрольными точками Европейского комитета по тестированию чувствительности к противомикробным препаратам (http://www.eucast.org). Изоляты, устойчивые по крайней мере к трем протестированным группам антибиотиков, будут считаться полирезистентными.

Чувствительность Cutibacterium acnes к бензилпенициллину и клиндамицину будет исследована с использованием градиентного теста. Минимальные ингибирующие концентрации будут определяться с помощью Etest (bioMe´rieux, Marcy l'Etoile, Франция) на чашках FAA (LAB M) с 0,5 суспензией бактерий McFarland в NaCl и инкубацией при 36°C в анаэробной атмосфере в течение 24 часов. Для метронидазола будет использоваться диск (Oxoid). Бактериальное геномное секвенирование может быть проанализировано, чтобы понять, происходят ли бактерии от людей в операционной или в больничной среде.

Все данные о послеоперационных инфекциях будут получены из местного регистра Carath, отделения кардиоторакальной и сосудистой хирургии. Форма отчета о болезни (CRF) будет использоваться для сбора данных, касающихся характеристик пациента, параметров операционной (например, температура, влажность воздуха, количество людей, количество открываний дверей) и хирургические данные (например, тип операции, время операции).