Contaminazione batterica dell'aria

Intervento - La sera prima di un intervento chirurgico elettivo il materiale chirurgico sterile verrà preparato in circostanze tranquille con solo 2 persone in sala operatoria (intervento). Successivamente, i beni sterili saranno protetti con coperture sterili e il tempo in attesa dell'intervento chirurgico sarà di circa 12 ore (intervento). Il controllo consiste nel preparare il materiale sterile al mattino con più persone in sala operatoria (circa 4-5 persone). Successivamente, i prodotti sterili saranno protetti con coperture sterili (il tempo in attesa dell'intervento sarà di circa un'ora). Per l'assegnazione verrà prodotta una lista di randomizzazione generata dal computer e una segretaria indipendente sistemerà le note stampate che mostrano l'assegnazione di gruppo in buste ordinate, sigillate e non trasparenti.

Per misurare il tempo in attesa di interventi chirurgici saranno predisposti tavoli con piastre di agar sangue per misurare la contaminazione batterica dell'aria. Ci saranno due tavoli, uno protetto con coperture sterili e uno lasciato senza coperture protettive (sia nel gruppo di intervento che in quello di controllo).

Risultati e materiali - L'esito primario è la crescita batterica isolata da piastre di agar sangue aerobi e anaerobi (terreno di agar ematina 4,3% p/v [Colombia Blood Agar Base] integrato con 6% p/v di sangue di cavallo defibrinato cioccolatoso) e piastre FAA (LAB 90 Fastidious Anaerobe Agar 4,6% p/v integrato con 5% p/v di sangue di cavallo defibrinato). L'esito secondario sono le infezioni del sito chirurgico con confronto del tipo di batteri.

Raccolta dati - Verranno utilizzate un totale di 1260 piastre di agar sangue per catturare la contaminazione batterica dell'aria. Per catturare le differenze nella contaminazione batterica dell'aria durante le diverse condizioni di preparazione dei prodotti sterili, sei piastre di agar (tre ematina e tre FAA) verranno poste su un tavolo all'inizio della preparazione. Quando la preparazione è completa le piastre di agar saranno raccolte, chiudendo il coperchio delle piastre di agar. Per misurare la contaminazione batterica dell'aria dipendente dal tempo in attesa dell'intervento chirurgico, nuove piastre di agar (tre ematina e tre FAA) che saranno posizionate su tavoli sia per il gruppo di intervento che per quello di controllo e coperte con teli sterili. Per misurare l'efficacia della copertura sterile dalla contaminazione batterica dell'aria, le piastre di agar saranno lasciate scoperte in attesa dell'intervento chirurgico sia nel gruppo di intervento che in quello di controllo. Quando si prepara il paziente per l'intervento chirurgico, le coperture verranno rimosse e tutte le piastre verranno raccolte chiudendo i coperchi.

Microbiologia - Le piastre saranno analizzate presso il Dipartimento di Medicina di Laboratorio, Microbiologia Clinica, Ospedale Universitario di Örebro, secondo uno specifico protocollo di studio. Le piastre di ematina saranno incubate a 36°C in condizioni aerobiche mentre le piastre FAA saranno incubate in condizioni anaerobiche (10% H2, 10% CO2, 80% N2) a 37°C. Dopo 24 e 48 h di incubazione aerobica e cinque giorni di incubazione anaerobica, la crescita batterica sarà determinata quantitativamente contando le unità formanti colonia per piastra. Gli isolati saranno identificati mediante procedure diagnostiche di routine e determinati a livello di specie mediante spettrometria di massa a tempo di volo di desorbimento/ionizzazione laser assistita da matrice (Microflex LT e Biotyper 3.1, Bruker Daltonik, Brema, Germania).

I test standard di sensibilità agli antibiotici per gli stafilococchi saranno eseguiti mediante il disc diffusion test per cefoxitina (30 mg), acido fusidico (10 mg), eritromicina (15 mg), clindamicina (2 mg), trimetoprim/sulfametossazolo (25 mg), gentamicina ( 10 mg), norfloxacina (10 mg), ciprofloxacina (5 mg) e rifampicina (5 mg) (tutti i dischi antibiotici di Oxoid, Basingstoke, Regno Unito) con una sospensione batterica 0,5 McFarland in NaCl 0,85% su agar Mueller-Hinton II 3,8 Piastre % p/v (BD Diagnostic Systems, Sparks, MD, USA). Dopo 16-20 h di incubazione a 35°C, verranno misurati i diametri delle zone e ogni isolato sarà valutato secondo i breakpoint del Comitato Europeo per i Test di Suscettibilità Antimicrobica (http://www.eucast.org). Gli isolati resistenti ad almeno tre dei gruppi di antibiotici testati saranno considerati resistenti a più farmaci.

La suscettibilità di Cutibacterium acnes alla benzilpenicillina e alla clindamicina sarà studiata mediante un gradient test. Le concentrazioni minime inibitorie saranno determinate mediante Etest (bioMe´rieux, Marcy l'Etoile, Francia) su piastre FAA (LAB M) con 0.5 McFarland sospensioni di batteri in NaCl e incubazione a 36°C in atmosfera anaerobica per 24 h. Per il metronidazolo verrà utilizzato un disco (Oxoid). Il sequenziamento genomico batterico può essere analizzato per capire se i batteri derivano dalle persone all'interno della sala operatoria o dall'ambiente ospedaliero.

Tutti i dati riguardanti le infezioni postoperatorie saranno recuperati da un registro locale Carath, Dipartimento di Chirurgia Cardiotoracica e Vascolare. Verrà utilizzato un case report form (CRF) per raccogliere dati riguardanti le caratteristiche del paziente, le impostazioni della sala operatoria (ad es. temperatura, umidità dell'aria, numero di persone, numero di porte aperte) e dati chirurgici (ad es. tipo di intervento, tempo per l'intervento).