Bakteriální kontaminace vzduchu

Zákrok - Večer před elektivním zákrokem bude sterilní chirurgické zboží připraveno v klidu pouze ve 2 osobách na OR (zákrok). Poté bude sterilní zboží chráněno sterilními kryty a doba operace bude přibližně 12 hodin (intervence). Kontrolou je připravit sterilní zboží ráno ve více osobách na OR (cca 4-5 osob). Poté bude sterilní zboží chráněno sterilními kryty (čas čekání na operaci bude přibližně jedna hodina). Pro přidělení bude vytvořen počítačově generovaný randomizační seznam a nezávislá sekretářka uspořádá vytištěné poznámky ukazující skupinové přiřazení do objednaných, zapečetěných, neprůhledných obálek.

Pro měření času do operace budou tabulky uspořádány s krevními agarovými plotnami pro měření bakteriální kontaminace vzduchu. Budou zde dva stoly, jeden chráněný sterilními kryty a jeden ponechán bez ochranných krytů (v intervenční i kontrolní skupině).

Výsledky a materiály – Primárním výsledkem je bakteriální růst izolovaný aerobními a anaerobními krevními agarovými plotnami (hematinové agarové médium 4,3 % w/v [Colombia Blood Agar Base] doplněné 6 % w/v čokoládovou defibrinovanou koňskou krví) a FAA plotny (LAB 90 Fastidious Anaerobe Agar 4,6 % w/v doplněný 5 % w/v defibrinované koňské krve). Sekundárním výstupem jsou infekce v místě chirurgického zákroku s porovnáním typu bakterií.

Sběr dat - K zachycení bakteriální kontaminace vzduchu bude použito celkem 1260 misek s krevním agarem. Pro zachycení rozdílů v bakteriální kontaminaci vzduchu během různých podmínek přípravy sterilního zboží bude na začátku přípravy na stůl položeno šest agarových misek (tři hematinové a tři FAA). Po dokončení přípravy se agarové plotny shromáždí uzavřením víka agarových ploten. Pro měření časově závislé bakteriální kontaminace vzduchu před operací nové agarové plotny (tři hematinové a tři FAA), které budou umístěny na stoly pro intervenční i kontrolní skupinu a zakryty sterilními rouškami. Pro měření účinnosti sterilního pokrytí z bakteriální kontaminace vzduchu budou agarové plotny ponechány nezakryté až do chirurgického zákroku v intervenční i kontrolní skupině. Při přípravě pacienta na operaci budou kryty odstraněny a všechny dlahy budou odebrány uzavřením víček.

Mikrobiologie - Destičky budou analyzovány na Oddělení laboratorní medicíny, Klinická mikrobiologie, Fakultní nemocnice Örebro, podle specifického protokolu studie. Hematinové destičky budou inkubovány při 36 °C za aerobních podmínek, zatímco FAA destičky budou inkubovány za anaerobních podmínek (10 % H2, 10 % CO2, 80 % N2) při 37 °C. Po 24 a 48 hodinách aerobní inkubace a pěti dnech anaerobní inkubace bude bakteriální růst kvantitativně stanoven počítáním jednotek tvořících kolonie na misku. Izoláty budou identifikovány rutinními diagnostickými postupy a stanoveny na úrovni druhu pomocí matrice asistované laserové desorpce/ionizace hmotnostní spektrometrie s časem letu (Microflex LT a Biotyper 3.1, Bruker Daltonik, Brémy, Německo).

Standardní testování citlivosti na antibiotika na stafylokoky bude provedeno diskovým difúzním testem na cefoxitin (30 mg), kyselinu fusidovou (10 mg), erythromycin (15 mg), klindamycin (2 mg), trimethoprim/sulfamethoxazol (25 mg), gentamicin ( 10 mg), norfloxacin (10 mg), ciprofloxacin (5 mg) a rifampin (5 mg) (všechny antibiotické disky od Oxoid, Basingstoke, UK) s 0,5 McFarland bakteriální suspenzí v 0,85 % NaCl na Mueller-Hinton II agaru 3,8 % w/v destiček (BD Diagnostic Systems, Sparks, MD, USA). Po 16-20 hodinách inkubace při 35 °C budou změřeny průměry zón a každý izolát bude vyhodnocen podle hraničních bodů Evropského výboru pro testování antimikrobiální citlivosti (http://www.eucast.org). Izoláty rezistentní na alespoň tři z testovaných skupin antibiotik budou považovány za multirezistentní.

Citlivost Cutibacterium acnes k benzylpenicilinu a klindamycinu bude zkoumána pomocí gradientového testu. Minimální inhibiční koncentrace budou stanoveny pomocí Etest (bioMe´rieux, Marcy l'Etoile, Francie) na FAA plotnách (LAB M) s 0,5 McFarland suspenzí bakterií v NaCl a inkubací při 36°C v anaerobní atmosféře po dobu 24 hodin. Pro metronidazol bude použit disk (Oxoid). Bakteriální genomové sekvenování může být analyzováno, aby se pochopilo, zda bakterie pochází od osob na operačním sále nebo v nemocničním prostředí.

Veškeré údaje týkající se pooperačních infekcí budou získávány z místního registru Carath, Klinika kardiotorakální a cévní chirurgie. Ke sběru dat týkajících se charakteristik pacienta, NEBO nastavení (např. teplota, vlhkost vzduchu, počet osob, počet otevření dveří) a chirurgické údaje (např. typ operace, čas na operaci).