Bakterielle Luftverschmutzung

Intervention - Am Abend vor einem elektiven Eingriff wird das sterile OP-Gut in Ruhe mit nur 2 Personen im OP vorbereitet (Intervention). Danach werden die sterilen Güter mit sterilen Abdeckungen geschützt und die Operationszeit beträgt ca. 12 Stunden (Eingriff). Die Kontrolle ist, das Sterilgut morgens mit mehr Personen im OP vorzubereiten (ca. 4-5 Personen). Danach wird das Sterilgut mit sterilen Abdeckungen geschützt (Zeit bis zur Operation ca. 1 Stunde). Für die Zuteilung wird eine computergenerierte Randomisierungsliste erstellt und eine selbstständige Sekretärin ordnet die ausgedruckten Zettel mit der Gruppenzuordnung in geordneten, verschlossenen, undurchsichtigen Umschlägen.

Zur Messung der anstehenden OP-Zeit werden Tische mit Blutagarplatten zur Messung der bakteriellen Luftkontamination aufgestellt. Es wird zwei Tische geben, einen mit sterilen Abdeckungen und einen ohne Schutzabdeckungen (sowohl in der Interventions- als auch in der Kontrollgruppe).

Ergebnisse und Materialien - Primäres Ergebnis ist das Bakterienwachstum, isoliert durch aerobe und anaerobe Blutagarplatten (Hämatinagarmedium 4,3 % w/v [Colombia Blood Agar Base], ergänzt mit 6 % w/v schokoliertem defibriniertem Pferdeblut) und FAA-Platten (LAB 90 Anspruchsvoller anaerober Agar 4,6 % w/v, ergänzt mit 5 % w/v defibriniertem Pferdeblut). Sekundäres Ergebnis sind postoperative Wundinfektionen mit Vergleich des Bakterientyps.

Datensammlung - Insgesamt 1260 Blutagarplatten werden verwendet, um bakterielle Luftkontamination zu erfassen. Um Unterschiede in der bakteriellen Luftkontamination bei unterschiedlichen Aufbereitungsbedingungen des Sterilguts zu erfassen, werden zu Beginn der Aufbereitung sechs Agarplatten (drei Hämatin und drei FAA) auf einen Tisch gestellt. Wenn die Vorbereitung abgeschlossen ist, werden die Agarplatten gesammelt, indem der Deckel der Agarplatten geschlossen wird. Zur Messung der zeitabhängigen bakteriellen Luftkontamination vor der Operation werden neue Agarplatten (drei Hämatin und drei FAA) für Interventions- und Kontrollgruppe auf Tische gestellt und mit sterilen Tüchern abgedeckt. Um die Wirksamkeit der sterilen Abdeckung durch bakterielle Luftkontamination zu messen, werden Agarplatten sowohl in der Interventions- als auch in der Kontrollgruppe bis zur Operation unbedeckt gelassen. Bei der Vorbereitung des Patienten für die Operation werden die Abdeckungen entfernt und alle Platten werden durch Schließen der Deckel gesammelt.

Mikrobiologie – Die Platten werden in der Abteilung für Labormedizin, Klinische Mikrobiologie, Örebro University Hospital, gemäß einem spezifischen Studienprotokoll analysiert. Die Hämatinplatten werden bei 36 °C unter aeroben Bedingungen inkubiert, während die FAA-Platten unter anaeroben Bedingungen (10 % H2, 10 % CO2, 80 % N2) bei 37 °C inkubiert werden. Nach 24 und 48 h aerober Inkubation und fünf Tagen anaerober Inkubation wird das Bakterienwachstum quantitativ bestimmt, indem koloniebildende Einheiten pro Platte gezählt werden. Die Isolate werden durch routinemäßige diagnostische Verfahren identifiziert und mittels Matrix-unterstützter Laser-Desorptions-/Ionisations-Flugzeit-Massenspektrometrie (Microflex LT und Biotyper 3.1, Bruker Daltonik, Bremen, Deutschland) auf Speziesniveau bestimmt.

Standard-Antibiotika-Empfindlichkeitstests für Staphylokokken werden mit dem Blättchendiffusionstest für Cefoxitin (30 mg), Fusidinsäure (10 mg), Erythromycin (15 mg), Clindamycin (2 mg), Trimethoprim/Sulfamethoxazol (25 mg), Gentamicin ( 10 mg), Norfloxacin (10 mg), Ciprofloxacin (5 mg) und Rifampin (5 mg) (alle Antibiotikablättchen von Oxoid, Basingstoke, UK) mit einer 0,5-McFarland-Bakteriensuspension in 0,85 % NaCl auf Mueller-Hinton II-Agar 3,8 % w/v Platten (BD Diagnostic Systems, Sparks, MD, USA). Nach 16–20 h Inkubation bei 35 °C werden die Zonendurchmesser gemessen und jedes Isolat wird gemäß den Breakpoints des European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (http://www.eucast.org) bewertet. Isolate, die gegen mindestens drei der getesteten Antibiotikagruppen resistent sind, gelten als multiresistent.

Die Empfindlichkeit von Cutibacterium acnes gegenüber Benzylpenicillin und Clindamycin wird mit einem Gradiententest untersucht. Die minimalen Hemmkonzentrationen werden durch Etest (bioMérieux, Marcy l'Etoile, Frankreich) auf FAA-Platten (LAB M) mit 0,5 McFarland-Bakteriensuspensionen in NaCl und 24-stündiger Inkubation bei 36 °C in einer anaeroben Atmosphäre bestimmt. Für Metronidazol wird eine Scheibe (Oxoid) verwendet. Die bakterielle Genomsequenzierung kann analysiert werden, um zu verstehen, ob die Bakterien von den Personen im OP oder der Krankenhausumgebung stammen.

Alle Daten zu postoperativen Infektionen werden aus einem lokalen Register Carath, Abteilung für Herz-, Thorax- und Gefäßchirurgie, abgerufen. Ein Fallberichtsformular (CRF) wird verwendet, um Daten zu Patientenmerkmalen, OP-Einstellungen (z. Temperatur, Luftfeuchtigkeit, Anzahl Personen, Anzahl Türöffnungen) und OP-Daten (z.B. Art der Operation, Zeitpunkt der Operation).