Bakteriell luftforurensning

Intervensjon - På kvelden før en elektiv operasjon vil de sterile kirurgiske varene tilberedes under rolige omstendigheter med kun 2 personer i operasjonsstuen (intervensjon). Deretter vil de sterile varene være beskyttet med sterile deksler og tiden i påvente av operasjon vil være ca. 12 timer (intervensjon). Kontrollen er å klargjøre de sterile varene om morgenen med flere personer i operasjonsstuen (ca. 4-5 personer). Deretter vil de sterile varene beskyttes med sterile deksler (tid på kirurgi vil være ca. en time). For tildeling vil det bli laget en datamaskingenerert randomiseringsliste og en uavhengig sekretær vil ordne de trykte notatene som viser gruppeoppgaven i ordnede, forseglede, ugjennomsiktige konvolutter.

For å måle den ventende operasjonstiden vil tabeller bli arrangert med blodagarplater for å måle bakteriell luftforurensning. Det vil være to bord, ett beskyttet med sterile trekk og ett uten beskyttelsestrekk (i både intervensjons- og kontrollgruppe).

Utfall og materialer - Primært resultat er bakterievekst isolert av aerobe og anaerobe blodagarplater (hematinagarmedium 4,3 % w/v [Colombia Blood Agar Base] supplert med 6 % w/v sjokolade-defibrinert hesteblod) og FAA-plater (LAB 90) Kresen Anaerob Agar 4,6 % w/v supplert med 5 % w/v defibrinert hesteblod). Sekundært utfall er infeksjoner på operasjonsstedet med sammenligning av bakterietype.

Datainnsamling - Totalt 1260 blodagarplater skal brukes for å fange opp bakteriell luftforurensning. For å fange opp forskjeller i bakteriell luftforurensning under ulike klargjøringsforhold for de sterile varene, vil seks agarplater (tre hematin og tre FAA) settes på bordet når tilberedningen starter. Når forberedelsen er fullført, samles agarplatene opp ved å lukke lokket på agarplatene. For å måle den tidsavhengige bakterielle luftforurensningen i påvente av operasjon, nye agarplater (tre hematin og tre FAA) som vil bli satt på tabeller for både intervensjons- og kontrollgruppe og dekket med sterile gardiner. For å måle effektiviteten av steril dekning fra bakteriell luftforurensning vil agarplater bli stående utildekket i påvente av operasjon i både intervensjons- og kontrollgruppen. Når pasienten klargjøres for operasjon, vil dekslene fjernes og alle platene samles opp ved å lukke lokkene.

Mikrobiologi - Platene vil bli analysert ved Institutt for laboratoriemedisin, klinisk mikrobiologi, Örebro universitetssykehus, i henhold til en spesifikk studieprotokoll. Heematinplatene vil bli inkubert ved 36°C under aerobe forhold, mens FAA-platene vil bli inkubert under anaerobe forhold (10 % H2, 10 % CO2, 80 % N2) ved 37°C. Etter 24 og 48 timer med aerob inkubasjon og fem dager med anaerob inkubasjon, vil bakterievekst bestemmes kvantitativt ved å telle kolonidannende enheter per plate. Isolatene vil bli identifisert ved rutinemessige diagnostiske prosedyrer og bestemt til artsnivå via matrise-assistert laserdesorpsjon/ionisering time-of-flight massespektrometri (Microflex LT og Biotyper 3.1, Bruker Daltonik, Bremen, Tyskland).

Standard antibiotikafølsomhetstesting for stafylokokker vil bli utført ved diskdiffusjonstesten for cefoxitin (30 mg), fusidinsyre (10 mg), erytromycin (15 mg), klindamycin (2 mg), trimetoprim/sulfametoksazol (25 mg), gentamicin ( 10 mg), norfloksacin (10 mg), ciprofloksacin (5 mg) og rifampin (5 mg) (alle antibiotikaskiver fra Oxoid, Basingstoke, Storbritannia) med en 0,5 McFarland bakteriesuspensjon i 0,85 % NaCl på Mueller-Hinton II agar 3,8 % w/v plater (BD Diagnostic Systems, Sparks, MD, USA). Etter 16-20 timers inkubasjon ved 35°C vil sonediametrene bli målt og hvert isolat vil bli evaluert i henhold til European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing breakpoints (http://www.eucast.org). Isolater som er resistente mot minst tre av de testede antibiotikagruppene vil bli ansett som multiresistente.

Følsomheten til Cutibacterium acnes for benzylpenicillin og clindamycin vil bli undersøkt ved hjelp av en gradienttest. Minimum hemmende konsentrasjoner vil bli bestemt av Etest (bioMe´rieux, Marcy l'Etoile, Frankrike) på FAA-plater (LAB M) med 0,5 McFarland-suspensjoner av bakterier i NaCl og inkubering ved 36°C i en anaerob atmosfære i 24 timer. For metronidazol vil en skive (Oxoid) brukes. Bakteriell genomisk sekvensering kan analyseres for å forstå om bakteriene stammer fra personene i operasjonsstuen eller sykehusmiljøet.

Alle data vedrørende postoperative infeksjoner vil bli hentet fra et lokalt register Carath, Hjerte- og karkirurgisk avdeling. Et case report form (CRF) vil bli brukt til å samle inn data angående pasientkarakteristikker, ELLER-innstillinger (f.eks. temperatur, luftfuktighet, antall personer, antall døråpninger) og kirurgiske data (f.eks. type operasjon, tid for operasjon).