Contamination bactérienne de l'air

Intervention - La veille d'une chirurgie élective, le matériel chirurgical stérile sera préparé dans le calme avec seulement 2 personnes au bloc opératoire (intervention). Par la suite, le matériel stérile sera protégé par des housses stériles et le temps d'attente opératoire sera d'environ 12 heures (intervention). Le contrôle consiste à préparer le matériel stérile le matin avec plus de personnes au bloc opératoire (environ 4-5 personnes). Par la suite, le matériel stérile sera protégé par des housses stériles (le temps d'attente opératoire sera d'environ une heure). Pour l'attribution, une liste de randomisation générée par ordinateur sera produite et un secrétaire indépendant organisera les notes imprimées indiquant l'affectation du groupe dans des enveloppes ordonnées, scellées et non transparentes.

Pour mesurer le temps d'attente, des tables de chirurgie seront disposées avec des plaques de gélose au sang pour mesurer la contamination bactérienne de l'air. Il y aura deux tables, une protégée par des housses stériles et une laissée sans housses de protection (dans le groupe d'intervention et le groupe témoin).

Résultats et matériaux - Le résultat principal est la croissance bactérienne isolée par des plaques de gélose au sang aérobies et anaérobies (milieu de gélose à l'hématine 4,3 % p/v [Colombia Blood Agar Base] additionné de 6 % p/v de sang de cheval défibriné chocolaté) et des plaques FAA (LAB 90 Gélose anaérobie fastidieuse à 4,6 % p/v additionnée de 5 % p/v de sang de cheval défibriné). Le résultat secondaire est les infections du site opératoire avec comparaison du type de bactérie.

Collecte de données - Un total de 1260 plaques de gélose au sang seront utilisées pour capturer la contamination bactérienne de l'air. Pour capturer les différences de contamination bactérienne de l'air lors de différentes conditions de préparation des produits stériles, six plaques de gélose (trois hématines et trois FAA) seront placées sur une table au début de la préparation. Une fois la préparation terminée, les plaques de gélose seront récupérées en fermant le couvercle des plaques de gélose. Pour mesurer la contamination bactérienne de l'air en fonction du temps en attendant la chirurgie, de nouvelles plaques de gélose (trois hématines et trois FAA) qui seront placées sur des tables pour le groupe d'intervention et de contrôle et recouvertes de champs stériles. Pour mesurer l'efficacité de la couverture stérile de la contamination bactérienne de l'air, les plaques de gélose seront laissées à découvert en attendant la chirurgie dans les groupes d'intervention et de contrôle. Lors de la préparation du patient pour la chirurgie, les couvertures seront retirées et toutes les plaques seront collectées en fermant les couvercles.

Microbiologie - Les plaques seront analysées au Département de médecine de laboratoire, Microbiologie clinique, Hôpital universitaire d'Örebro, selon un protocole d'étude spécifique. Les plaques d'hématine seront incubées à 36°C dans des conditions aérobies tandis que les plaques FAA seront incubées dans des conditions anaérobies (10% H2, 10% CO2, 80% N2) à 37°C. Après 24 et 48 h d'incubation aérobie et cinq jours d'incubation anaérobie, la croissance bactérienne sera déterminée quantitativement en comptant les unités formant colonie par boîte. Les isolats seront identifiés par des procédures de diagnostic de routine et déterminés au niveau de l'espèce par spectrométrie de masse à temps de vol à désorption/ionisation laser assistée par matrice (Microflex LT et Biotyper 3.1, Bruker Daltonik, Brême, Allemagne).

Le test standard de sensibilité aux antibiotiques pour les staphylocoques sera effectué par le test de diffusion sur disque pour la céfoxitine (30 mg), l'acide fusidique (10 mg), l'érythromycine (15 mg), la clindamycine (2 mg), le triméthoprime/sulfaméthoxazole (25 mg), la gentamicine ( 10 mg), norfloxacine (10 mg), ciprofloxacine (5 mg) et rifampicine (5 mg) (tous les disques antibiotiques d'Oxoid, Basingstoke, Royaume-Uni) avec une suspension bactérienne 0,5 McFarland dans 0,85 % de NaCl sur gélose Mueller-Hinton II 3,8 Plaques % w/v (BD Diagnostic Systems, Sparks, MD, USA). Après 16-20 h d'incubation à 35°C, les diamètres de zone seront mesurés et chaque isolat sera évalué selon les seuils du Comité européen sur les tests de sensibilité aux antimicrobiens (http://www.eucast.org). Les isolats résistants à au moins trois des groupes d'antibiotiques testés seront considérés comme multirésistants.

La sensibilité de Cutibacterium acnes à la benzylpénicilline et à la clindamycine sera étudiée à l'aide d'un test de gradient. Les concentrations minimales inhibitrices seront déterminées par Etest (bioMérieux, Marcy l'Etoile, France) sur des plaques FAA (LAB M) avec des suspensions 0,5 McFarland de bactéries dans du NaCl et une incubation à 36°C en atmosphère anaérobie pendant 24 h. Pour le métronidazole, un disque (Oxoid) sera utilisé. Le séquençage génomique bactérien peut être analysé afin de comprendre si la bactérie provient des personnes au sein de la salle d'opération ou de l'environnement hospitalier.

Toutes les données concernant les infections postopératoires seront extraites d'un registre local Carath, Département de Chirurgie Cardiothoracique et Vasculaire. Un formulaire de rapport de cas (CRF) sera utilisé pour collecter des données concernant les caractéristiques du patient, les paramètres de la salle d'opération (par ex. température, humidité de l'air, nombre de personnes, nombre d'ouvertures de porte) et données chirurgicales (par ex. type de chirurgie, durée de la chirurgie).