同种异体脂肪活性蛋白治疗重度特发性肺纤维化的临床研究 (CEFFE-PF)

1. 研究目的：

   主要目的：研究同种异体脂肪环活性蛋白治疗重症特发性肺纤维化的疗效和安全性，主要观察评价指标包括：临床疗效、临床不良事件和实验室检查异常。

   问题的基础：

   动物实验发现，无细胞脂肪提取物（CEFFE）对博来霉素诱导的小鼠肺纤维化模型有一定的改善作用。 目前，国内临床研究发现，无细胞脂肪提取物（CEFFE）对治疗人类疾病是安全的，无明显副作用。 因此，本研究采用雾化吸入法吸入无细胞脂肪提取物（CEFFE）治疗重度特发性肺纤维化，并观察其疗效和安全性。

2. 研究设计：

   总体设计：采用单中心、自身对照试验设计，不设对照组，不设盲法。

   计划案例数：7。

   适应症：重度特发性肺纤维化。

3. 临床试验流程：

   3.1 签署知情同意书并收集相关临床资料；对于明确诊断为重度特发性肺纤维化的患者

   3.2 同种异体细胞游离脂肪提取物（CEFFE）处理过程：

   3.2.1异体来源CEFFE的制备：在上海交通大学医学院附属第九人民医院进行吸脂手术的健康供体，签署书面知情同意书。 由健康供体在局部麻醉下，腹腔注射肿胀液，用20mL注射器或机械负压机操作（不能加激光、超声、微波等辅助吸脂方法），按入组先后顺序确定分组，并按所需剂量提取脂肪，单次吸脂量以150ml -200ml为宜。 收集的脂肪组织用生理盐水冲洗，静置，离心机1200g离心3min。 离心后，去除底部多余的水，收集在无菌的50mL注射器中，储存并转移。 脂肪组织活性因子的制备在实验室和冷冻保存中进行。 用三通管连接两个10mL注射器，机械乳化60次，收集于50mL离心管中，2000g离心5min。 离心后，收集底部透明液层，经0.22um滤膜过滤，得到脂肪脱细胞活性蛋白，冷冻于-20℃冰箱中。

   3.2.2 健康捐赠者选择标准：

   3.2.2.1 18-45岁，男女不限

   3.2.2.2上海交通大学医学院附属第九人民医院吸脂术

   3.2.2.3 签署生物样本捐赠知情同意书

   3.2.3 排除标准：

   3.2.3.1乙肝、丙肝、HIV、梅毒、巨细胞病毒、疱疹病毒等感染者

   3.2.3.2 严重高血压、糖尿病、心脏病等慢性病患者

   3.2.3.3 患有肿瘤或既往有肿瘤病史的患者

   3.3经皮试验阴性后雾化吸入同种异体CEFFE；右前臂掌侧掌纹上方1cm处皮内注射CEFFE 0.2ml，左前臂掌侧掌纹上方1cm处皮内注射生理盐水0.2ml作为对照。 皮试结果判读：局部皮丘隆起，并有红晕硬块，直径＞1cm为阳性。

   给予单剂量2ml同种异体CEFFE原液（蛋白浓度3mg/ml），雾化吸入给药，每次雾化时间间隔8分钟，间隔3天；总共给予了 7 剂。

   3.4观察同种异体脂肪脱细胞活性蛋白治疗结束后第1、3、6、12月患者的临床症状、胸部CT、肺功能及相关不良反应。

4. 评价标准：

   4.1疗效标准：

   4.1.1 显效是指主要症状、体征明显缓解，客观指标明显改善。

   4.1.2 有效是指主要症状、体征有所好转，客观指标有所改善。

   4.1.3 无效是指主要症状、体征无变化，客观指标无明显变化或恶化。

   4.2 安全评价：

   临床不良事件和实验室检查与异基因CEFFE治疗肯定相关，可能与异基因CEFFE治疗相关，可能与异基因CEFFE治疗相关，可能与异基因CEFFE治疗无关，也可能与异基因CEFFE治疗无关。

   4.3评价终点：以治疗结束后1、3、6、12个月的临床疗效、综合疗效和安全性评价为主要评价终点。

5. 临床试验数据质量保证

   本次临床试验的质量控制由上海交通大学医学院附属第九人民医院进行质量控制，按照GCP、SOP和质量控制要求开展研究工作。 制定临床研究计划。 对参与试验的相关研究人员进行 GCP 培训。

   5.1 试验开始前，方案应提交上海交通大学医学院附属第九人民医院伦理委员会批准；

   5.2 根据GCP指南，在研究的设计和实施阶段应采取必要的步骤，以确保收集的数据准确、一致、完整和可信；

   5.3 参赛研究者将严格按照中国GCP标准进行试验，按照临床试验标准操作程序（SOP），如实、认真、详细地收集、记录病例报告表内容，并进行验证，确保数据的可靠性；

   5.4 研究者将方案要求的信息填入病例报告表（CRF），主管核实其完整准确，并指导研究中心工作人员进行必要的更正和补充；

   5.5 临床试验各项检查项目中使用的各类仪器、设备、试剂、标准品等应有严格的质量标准，并保证其在正常条件下工作；

   5.6 将测试计划中的统计问题送统计专家审核；

   5.7 试验期间，研究者对研究过程、知情同意、病例报告表（CRF）数据的正确性和完整性进行监督。

6. 研究资料的记录和保存

   按照GCP原则，研究者应保存受试者所有详细的原始档案，并在病例报告表中记录相关试验过程、用药、实验室检查数据、安全性数据和疗效评价，记录数据应符合完整、及时、清晰。 病例报告表、原始文件、病历等应清晰、详细，便于参与本次临床试验的人员识别。

   至少，主要研究者必须签署病例报告表的纳入确认页和完成页，以确认所有数据的准确性和完整性。

   病例报告表和原始文件只能由研究者修改。 病例报告表和原始文件的任何改动不得抹去原始数据。 正确的修改方法是在原始数据上画一条单线，然后在原始数据旁边写上修改后的数据，并签上日期和修改人的姓名首字母。

   试验数据应在试验结束后保留​​10年。 但是，如果现行法规或与赞助商的协议要求，这些数据应保存更长时间。

7. 统计处理方案

   7.1 病例报告表（CRF）的填写 研究者应及时完成病例报告表的填写，按照正确的修改方法进行修改，完成的病例报告表由主要研究者审核并签字

   7.2 统计分析方法及统计说明

   7.2.1主要疗效指标数据缺失值的处理：当部分受试者缺少主要疗效数据时，从统计学和专业角度确定补缺方法。 如有遗漏，则转移前一次测量的数据。

   7.2.2 不完全试验案例分析：剥落的原因要一一分析。

   7.2.3 描述性统计：均值、标准差、最大值、最小值、中位数、置信区间、频数（构成比）等。

   7.3 统计表达式

   7.3.1 报告主要是用表格来说明表格是不言而喻的，即有表格问题，有表格注释，有例子。

   7.3.2 重复测量数据的结果以表格形式表示，并附有统计图表以增加可读性。

   7.4 统计软件SAS 9.1.3 和Das for clinical trial 3.0软件同时对软件进行分析，对结果进行确认。

8. 测试过程中的修改和临时分析

研究计划一经课题组讨论和伦理委员会审查，不得随意更改；修改实施前，研究者必须将修改的内容和理由报临床试验伦理委员会批准，然后按照修改后的方案开展研究。