DEUX OEUF：挖掘鸡蛋促进儿童生长和发育的潜力

背景及意义

在怀孕、哺乳和婴儿期等关键生命阶段，饮食不足和多样化会导致儿童营养不良，特别是在低收入和中等收入国家 (LMIC)。减少发育迟缓并改善儿童早期发育的干预措施。 母亲的营养状况已被证明直接影响儿童发育迟缓的发生，并通过其他儿童因素间接影响发育迟缓。 世卫组织儿童生长标准的使用表明，宫内生长迟缓是一个比以前认识到的更严重的问题，并且儿科生长迟缓往往始于子宫内，并且与母体营养直接相关。

孕产妇饮食在孕产妇和儿童整体健康中发挥着重要作用，因为孕产妇营养是妊娠结局、胎儿生长发育以及出生结局的重要预测因素。 怀孕和哺乳期间营养需求的增加是众所周知的。

在中低收入国家，典型的饮食多样性较低，并且往往缺乏动物源食品 (ASF)，而动物源食品是生物可利用的大量营养素和微量营养素的丰富来源。 ASF 的营养价值已被强调为减少儿童营养不良的重要饮食工具，因为常量营养素以及必需微量营养素的营养密度和生物利用度较高，而这些营养素在素食中可能不是最理想的。 鉴于与植物性饮食相比的这些营养优势，人们越来越多地围绕在饮食中增加非洲猪瘟的努力进行对话，但比例较低，特别是在中低收入国家的小农社区，那里的饮食多样性通常较低，营养结果较差。 然而，最近的 Cochrane 综述发现没有足够的证据表明 ASF 在改善儿童生长方面比植物性饮食更有效，并明确指出需要进行足够有力的试验并研究特定的 ASF。

鸡蛋是蛋白质、必需脂肪酸、维生素 A 和 B12 以及胆碱和二十二碳六烯酸 (DHA) 的极好来源，这些营养素与儿童生长和认知发展相关。 与中低收入国家的其他非洲猪瘟一样，撒哈拉以南非洲地区的育龄妇女很少消费鸡蛋，特别是在营养不良率较高的农村地区，尽管与其他非洲猪瘟相比，鸡蛋的承受能力和可用性相对较高。 最近的研究表明，在引入补充食品后，婴幼儿食用鸡蛋可能会改善中低收入国家的营养状况。

迄今为止，将鸡蛋作为减少营养不良的饮食工具的研究主要集中在儿童鸡蛋消费（6个月大或以后），几乎没有研究探索针对儿童鸡蛋消费的营养干预措施的潜在影响。孕妇或哺乳期母亲作为改善孕产妇和儿童健康结果的机制。 考虑到怀孕期间的营养需求以及非洲猪瘟的营养成分和生物利用度，本研究假设怀孕期间食用非洲猪瘟将改善营养不良流行地区的胎儿生长。 据研究所知，尚无研究仅关注母亲在怀孕期间摄入 ASF 来调查其对胎儿生长和儿童健康结果的影响。 这项随机对照试验将解决文献中关于母亲食用特定 ASF（鸡蛋）对子宫内生长迟缓和大脑发育的潜在影响的现有空白。

假设、目的和目标/研究问题：

H01：每天食用两个鸡蛋的母亲所生的孩子与食用典型饮食的母亲所生的孩子的长度没有显着差异。

H11：每天吃两个鸡蛋的母亲生下的孩子的出生身长明显长于吃典型饮食的母亲所生的孩子主要目的：该研究将测试每天吃两个鸡蛋的母亲营养干预的效果，比较孩子的出生长度卢旺达尼亚加塔雷区典型饮食习惯的妇女所生婴儿的出生长度。

方法研究描述：

这项研究是一项随机对照试验，旨在研究卢旺达尼亚加塔雷地区母亲从怀孕前三个月到分娩期间食用鸡蛋对儿童生长和发育的营养益处。 具体来说，该研究旨在检测在整个怀孕期间每天接受两个鸡蛋的母亲与食用该地区典型饮食的母亲所生孩子之间的分娩长度差异。 女性在分娩过程中会得到营养补充。 他们将在这段时间内的四次门诊就诊期间接受监测（妊娠早期、中期、晚期和分娩时的登记）。 然后，母亲和婴儿将继续参加该研究，以便在产后 1 个月和 6 个月进行随访。 除了出生长度（主要结果）外，该研究还将调查营养干预对子宫内大脑发育、新生儿发育评估、六个月 LAZ 和六个月发育评估的影响。 956 名孕妇将被招募并独立分配到两个研究部门之一。

学习规划：

所有登记的母亲将被随机分为两个研究组之一：治疗组 (T1) 或对照组 (T2)。 从妊娠早期入组之日起直至分娩，治疗组的母亲每天将获得两个鸡蛋的 ASF 补充剂。 对照组的母亲将被要求继续遵循她们的典型饮食习惯。 双臂母亲将在怀孕期间接受有关健康饮食的标准信息、教育和交流，并且不会被限制在饮食中添加鸡蛋或任何其他食物。 妈妈们双臂相拥

在怀孕期间接受有关健康饮食的标准信息、教育和交流，并且不会被限制在饮食中添加鸡蛋或任何其他食物。 所有参与研究的母亲都将获得最新的 GoR 标准孕妇护理、具有蜂窝连接的手机、健康保险（如果尚未承保）以及每天前往社区卫生工作者家中参加研究的补偿。 根据 GoR 营养不良母亲护理标准，任何未每月获得 6 公斤 Shisha Kibondo (SK) 的登记母亲将在怀孕期间每月获得 6 公斤强化面粉 (CSB+)，其营养成分与 SK 相当。膳食补充剂将从入学时开始并持续到分娩；目标入组是妊娠早期（妊娠 9-<14 周）。 参与者将包括母子二人组：孕妇及其孩子将被招募、登记并跟踪孩子出生后的前六个月。 历史上，食用鸡蛋造成的健康风险与鸡蛋中的高胆固醇含量以及可能增加的心血管疾病 (CVD) 风险有关。 然而，现有文献的结果尚无定论，几乎所有已发表的研究都是针对高收入国家的人口。 因此，有人认为，鸡蛋的有害影响很明显，可能归因于与高水平食物摄入相关的负面饮食模式，而不是鸡蛋消费。 尽管关于普通人群食用鸡蛋的总体健康益处和风险的证据不一，但科学越来越多地支持将鸡蛋作为健康饮食的一部分。 在干预之前，研究人员将询问参与者对鸡蛋的任何已知反应或过敏。 过去对鸡蛋消费的反应或过敏将使参与者没有资格参加。 该研究将仔细记录和报告食用鸡蛋的任何不良反应。

研究地点和研究人群：干预措施将在卢旺达东部省的尼亚加塔雷地区进行，特别是恩达马和卡兰加齐卫生中心的服务区。 请注意，如果入学速度与基于形成性研究和公布的出生人数的预期不符，则将考虑将入学和干预准备扩大到第三个医疗中心。

干涉 ：

这项研究将有一个干预组和一个对照组——在怀孕期间每天提供两个鸡蛋，或典型的饮食。 鸡蛋将由经过培训的研究人员每天在 Karangazi 和/或 Ndama 健康中心根据质量控制程序准备，以确保日常准备和服务的安全（如下所述）。 鸡蛋将完全煮熟（煮或蒸）并用干净的水准备。 研究小组将根据食品准备中心的需要提供烹饪锅、烹饪燃料和炉灶，以及用于清洗锅具的清洁用品和清洁水，以及额外的存储和服务用具。

准备工作完成后，食品分销商将负责协调每天将鸡蛋运送到村庄的分发点，这些分发点将是社区卫生工作者的家。 该研究将把鸡蛋从准备中心运送到登记母亲的村庄。 摩托车将配备架子支撑来运输鸡蛋，使其保持完整并可以安全食用。 CSB+ 套餐将分发给所有女性。 采购将直接从 Shisha Kibondo 制造商处进行，以确保参加 GoR 计划的母亲收到的产品与研究具有可比性。

所有参与该研究的女性都将被要求每天前往指定的村庄消费地点（CHW 之家）。 治疗组中的女性将在一天中的指定时间在现场收到鸡蛋、营养和健康信息，对照组中的女性将仅收到营养信息，并被要求在不同的时间段到达。 地点将位于距妇女之家约 20 分钟步行路程的范围内；如果在此半径内没有可用站点，则将根据需要确定其他分发站点。 每个干预组的女性将被要求在不同的时间前来或在不同的地点见面，以尽量减少治疗组和对照组之间的溢出效应。 所有妇女（干预和控制）每天前往社区卫生工作者家的费用都将得到补偿。 目前的计划是，如果女性每周至少来 6 天，则每天可获得 500 RWF 的补偿。 根据社区的可接受性，该金额或阈值可能会在试点后略有变化。 为了提高食用鸡蛋的可接受性和坚持性，将在食用鸡蛋时添加盐。 妇女将由社区卫生工作者接收鸡蛋，并且社区卫生工作者、受 WV 培训的当地志愿者或研究人员将直接观察和记录其消耗情况（包括部分或全部消耗）。 将通过使用照片（在主动消费期间拍摄）、每日登录以及使用研究参与者身份证和/或手机扫描来确保女性身份的确认。

CHW 由于参与和支持该研究，每月将获得按比例分配的 30,000 RWF 补偿。 在社区卫生工作者因其他职责或旅行而无法工作的情况下，西弗吉尼亚州志愿者将分发鸡蛋并观察鸡蛋的消耗情况。 在社区卫生工作者无法避免缺勤的情况下，研究人员将与社区卫生工作者密切合作，并在可能的情况下使用社区卫生工作者的家进行分发。 只有当不可能时，才会在特定日期确定替代分发地点，并且妇女将通过使用研究提供的手机随时了解这些变化。 在整个研究过程中，我们将监测对干预措施的遵守情况，以确保高摄入率，目标是 100% 的遵守率（每周 7 天，每天观察到 2 个鸡蛋的消耗量）。 尽管希望 100% 遵守，但研究团队认识到，由于研究区域之外的旅行、工作或家庭义务、疾病或其他原因，女性可能无法在某些日子出现。 该妇女还可以选择在任何一天拒绝食物。 如果母亲在没有事先通知缺席或解释的情况下未能到研究团队领取指定的补充品，团队成员将尝试联系该母亲并在当天晚些时候再次拜访，以确保遵守规定。 然而，在一天结束时，如果母亲没有来到社区卫生工作者之家接收鸡蛋，西弗吉尼亚州工作人员可能会前往她的家中尝试运送并观察鸡蛋的消耗情况。 如果妇女在指定时段内没有到社区卫生工作者之家食用鸡蛋，则任何一天都会发生这种情况。 如果恶心被确定为每日食用营养补充剂的障碍，将提供非处方（市售）抗恶心药物。 （注意：所提供的抗恶心药物不包含任何抗组胺药）。 如果该妇女住院并留在研究范围内，研究小组将在医疗机构工作人员的许可下将其运送到该机构。 此外，如果母亲因缺勤、拒绝或其他原因没有服用食品补充剂，但尚未正式退出研究，研究团队将尝试每 2-4 天通过电话或 CHW 工作人员外展活动与母亲联系询问是否恢复干预1个月。 如果母亲重新加入研究团队，所有干预和数据收集都将恢复。 研究团队将尽可能考虑并解决研究期间发现的任何参与障碍。 如果流产，该妇女将继续接受为期 30 天的干预。

食品安全：该项目将确保鸡蛋和CSB+采购和分销周期内满足以下条件；在鸡蛋准备过程中；食品分销中的所有参与者都接受以下方面的培训： 鸡蛋分销的质量控制流程（SOP、监控、记录保存等）将由卢旺达的认证机构卢旺达标准委员会 (RSB) 进行认证。 鸡蛋和 CSB 储存期间

+ 从供应商处，指定的食品处理人员将确保储存地点符合要求的标准。 卵子最多可保存 3 周。 CSB+ 将储存在阴凉干燥的地方，并将根据制造商的指南监控有效期。 批号将受到监控并存储，以备产品召回之需。 储存容器应清洁、干燥。

在向母亲提供鸡蛋的过程中，遵守并确保卫生习惯。

研究人群的选择随机化程序：

该研究将在 1:1 的基础上进行单独随机化，使用具有不同块大小的分层块随机化来随机分配治疗组，以保持入组地点（Ndama 和 Karangazi）和胎龄组（9-11 周和12-<14 周）。 参与者将首先根据报名地点和胎龄进行分层。 将为每个层预先生成一个区块链，例如 1000 个区块。

每个区块的大小将被随机且独立地选择为 2、4 或 6 个个体。 在给定大小的每个块内，任一臂的数量相等，但顺序是随机打乱的。 例如，给定站点和给定胎龄组的前四个块可能看起来像 [EGG (E), CONTROL (C), C, E]-[ CL, E]-[E, C]-[ CL ，E，E CL，CL，E]。 前 14 名患者将获得链中的顺序分配。 该团队将使用 sealenvelope.com 上的工具生成随机列表。 随机种子将使用 random.org 上的随机整数生成器生成，该生成器引入了来自不可预测的大气噪声的随机性。 每个研究中心都会收到自己的随机名单。 每项作业都将存储在密封的信封中，并且将根据每个胎龄组的随机列表对信封进行排序。 当研究对象经过入学筛选并被认为符合资格时，她将被提供入学机会并参与知情同意程序。 如果她同意参加（同意），她将选择一个信封，里面有一张纸，表明她是属于治疗组（鸡蛋）还是对照组（典型饮食）。 除了唯一的研究 ID 之外，每个受试者还将有一个唯一的随机代码，以便可以轻松跟踪每个受试者的原始分配。 执行实际分析的数据分析师将对治疗分配不知情。 信封将提前预先填充，研究参与者和促进随机化揭示过程的工作人员都将不知道信封内的内容，直到信封被打开。

学习程序：

在招募开始之前，研究人员将在村庄组织教育活动，以促进早期产前保健就诊（ANC）并为前往医疗中心提供便利。 尿妊娠检测将分发给社区卫生工作者，以鼓励确认疑似怀孕并尽早参加第一次产前护理，以尽早确定怀孕情况。 研究开始时，工作人员将与社区卫生工作者协调，补偿妊娠检测呈阳性的妇女从村庄到服务于流域的医疗保健中心的交通费用。 在指定的招募日，研究人员将在医疗中心进行标准化超声筛查并收集基线数据，如下所述。

所有年龄在 18 岁至 44 岁（报告或根据身份证，如果有）且没有计划搬出研究区域的孕妇将根据上述资格标准考虑入组。 研究人员将进行初步资格筛查（如果尚未确认，则包括尿妊娠测试）、签署知情同意书，并进行超声筛查和资格确认。 所有超声检查将由参与该项目的妇产科医生或经过培训的超声护士进行。 将在超声筛查期间使用经过验证的基于人工智能的算法（SCANNAV FetalCheck，IntelligentUltrasound，英国）来确定怀孕日期。 还将测量冠臀长 (CRL) 和头围，并根据标准方法和 INTERGROWTH 21 标准报告的末次月经 (LMP)。 任何胎儿异常、宫外妊娠、稽留流产或其他偶然的异常发现将被转介至当地医疗机构进行适当的护理。 CRL 和基于头围的数据将与基于超声分析的人工智能胎龄测定进行比较。 确认怀孕 9 周至 14 周以下的女性将被邀请自愿参加研究，并签署适当的知情书面同意书。 9 周以下的女性将被要求稍后返回，以满足资格标准。 对于识字率较低的妇女，将根据需要大声宣读书面同意书。 根据目前流域内的出生率和分娩率，符合条件的孕妇的登记将于2024年5月开始，预计于2025年9月完成。

在登记时，将对家庭的人口和基线特征、牲畜所有权、WASH（社会人口统计）、怀孕和病史、母亲对危险因素的行为（疟疾）、抑郁症（心理社会）进行基线调查。健康）、体力活动、饮食多样性、性别暴力和家庭粮食安全（参见基线调查问卷）。 将收集研究参与者、其他家庭成员和其他熟人的电话联系信息，以确保研究团队能够在出生后联系到研究参与者和孩子。 该研究将测量孕妇的身高、体重和中上臂围 (MUAC)。 将使用测距仪重复测量站立高度，并使用数字秤（例如 Seca）测量体重，精确到 0.1 千克。 静息血压将使用经过验证的系统（例如 Omron）测量三次，并根据母亲的 MUAC 配备适当的袖带尺寸。

完成调查和人体测量后，该妇女将被要求提供头发样本，并由经过培训的抽血师抽取血液样本。 将使用生物分析仪测量母体血红蛋白以获得全血细胞计数分析。 血液将保存在带有冰袋的冷藏箱中，分离血清后将在采集后8小时内放入-20℃冷藏箱中。 收集后 7 天内，样本将被转移到基加利国家参考实验室 (NRL) 或类似设施的 -80C 冰箱中进行长期储存。

在基线调查、收集人体测量数据和血液样本后，母亲们将拍照并被登记为研究参与者。 他们将使用西弗吉尼亚州的最后一英里移动解决方案 (LMMS) 平台专门为该研究创建带有条形码和照片的数字身份证。 注册后，女性将通过选择自己选择的信封，被随机分配到对照组或每日两卵组。

随机化后，所选的手臂分配将被添加到数字 ID 中。 将打印并层压研究参与卡的硬拷贝。 参与者将被告知，他们需要在所有医疗机构就诊时出示研究 ID 卡（包括 ANC 就诊和分娩，以及区/省医院（如果有并发症））。 此外，将指导参与控制和干预的妇女每天到村里指定的分发点签到并出示卡片，以便获得适当的控制或干预内容。 怀孕测试呈阳性、被认为处于妊娠早期并同意进行资格筛查的女性，无论最终资格如何，都将获得 3000 RWF 现金用于参与。 如果母亲参加了研究，但目前尚未参加健康保险计划，研究人员将为母亲及其家人提供便利并支付其参加费用。 CHW 每月将获得 30000 RWF 的补偿（按比例分配），以表彰他们在招募、转诊、干预实施和研究后续活动方面的努力和参与。

第二个和第三个三个月评估程序（ANC 访问）

参与者将被要求每月返回健康中心进行正常的 ANC 就诊时间表。 在其中两次 ANC 访视中，参与者将被要求在 ANC 访视之后进行额外的研究访视：一次在 20-26 周，另一次在 30-34 周。 在每次访问之前，他们还将收到研究访问的短信/电话提醒。 在这些就诊中，妇产科医生或护士超声技师将进行超声测量，以利用宫底高度和超声成像评估胎儿生长情况以评估大脑发育。 使用超声波机器，经过培训的超声波技师将收集用于产前护理的标准图像，包括： 双顶径；头围;小脑直径；腹围；股骨长度；肱骨长度；并估计胎儿体重。 将采取以下额外措施：多维度和投影的丘脑测量；胼胝体长度；和神经节丘脑卵圆形测量，包括直径、矢状长度和估计体积。 现场收集的图像将与研究团队共享，以进行持续监督和数据质量监控。 通过超声波扫描发现的胎儿异常或其他不良状况将被转介到适当的医疗机构进行护理。 在第 20-26 周和 30-34 周访视时，将要求参与者提供头发样本，并按上述方法抽取母血并测量母体血红蛋白。 将通过一项简短调查收集自上次访问以来的医疗状况、体力活动、母乳喂养意愿和母亲饮食信息（参见妊娠访问问卷）。 在两次 ANC 访问期间还将收集人体测量数据。 所有参加这些访问的参与者都将获得 3000 RWF 现金，以补偿他们的时间。

出生探访程序

所有出生结果数据将在出生后 72 小时内收集，前 24 小时作为目标窗口。 参与者在前往医疗机构分娩或在家分娩时将通知研究人员。 研究人员还将与社区卫生工作者保持沟通，以了解分娩和分娩状态的最新情况。 出生结果将由经过培训的研究护士进行测量。 如果是在家分娩但未向健康中心报告的情况（预计大约占分娩的 5-10%），护士普查员团队将访问房屋并在那里进行测量，注意确保分娩情况平稳并尽可能保证测量环境的安全。 主要结果出生时长将在出生时（<72 小时）进行测量。

两名研究护士计数员将使用长度板 (Seca) 一起测量长度，一式三份，精确到 0.1 厘米。 使用数字秤 (Seca) 测量出生体重，精确到 0.1 公斤。 婴儿头围的测量精确到0.1厘米。 分娩的临床特征以及所有产前护理和产后访视（直至 6 个月大）将基于医疗记录（如果同意）以及孕产妇回忆，包括 HIV 状况、谁参与分娩、产伤和阿普加评分。 新生儿出生时会抽取血液并按照上述方法储存。 所有登记的妇女在出生时都将收到一把雨伞，并作为分娩措施时间的补偿，根据实施措施的地点，机构访问将获得 3000 RWF，家庭访问将获得 1000 RWF。 对照妇女在出生时还将额外收到 kitenge 布。

母婴随访程序（出生后 1MO 和 6MO） 出生后，大约在 1 个月和 6 个月大时将进行两次随访。 研究普查员将到所有母子的住处拜访他们。 在每次就诊时，母亲或主要照顾者都会回答每次就诊的调查，以记录他们自己的个人饮食 (DQQ)、婴儿喂养方法以及婴儿是否纯母乳喂养 (WHO IYCF、DQQ)。 调查问卷将使用世界卫生组织推荐的最佳母乳喂养核心指标，包括早期开始母乳喂养（出生后1小时内）、纯母乳喂养（EBF）直至出生后6个月。 还将实施关于婴儿健康和发病情况（腹泻、呼吸道、发烧、疟疾）以及寻求护理行为的调查模块。 如果获得同意且待资金到位，将提取卫生机构（门诊、IMCI、住院）的医疗记录和 CHW 患病儿童接触表，以了解营养干预措施对儿童健康结果的影响，包括腹泻、呼吸道感染、发烧和疟疾，以及死亡率。 鉴于与不良出生结果和营养的关联，该研究还将管理有关性别暴力暴露的调查问题（使用国土安全部的问题）。 将使用长度板 (Seca) 测量儿童身长一式三份，精确至 0.1 厘米。 使用数字秤（Seca）测量重量，精确到 0.1kg。 婴儿头围的测量精确到0.1厘米。 还将对 MUAC 进行评估，并转诊那些被归类为中度或重度急性营养不良的人。 此外，婴儿 6 个月大时，将使用 CREDI 评估神经发育情况，CREDI 是一种经过验证的评估工具，此前曾在卢旺达使用过。 CREDI（长格式）提供运动、认知、语言、社交情感发展方面的特定领域分数以及总体分数。 婴儿出生时以及 1 个月和 6 个月时的母亲和婴儿都会抽取血液，并按如下所述进行储存。 如果同意，将要求母亲提供头发样本。 所有参加这些访问的参与者都将获得 1000 RWF 现金，以补偿他们的时间。

样本大小：

怀孕期间营养干预的研究发现，LAZ 的平均差异范围为 0.12、0.19 至 0.29。 然而，尚无研究专门研究怀孕期间单独补充鸡蛋或其他 ASF 的影响。 根据有关其他食品补充剂的现有文献以及一些文献综述论文中的内容，该研究假设 LAZ 的平均差异为 0.18，这是与对照相比，基于食物的干预措施对出生身长的合理且具有临床意义的效应大小手臂。 为达到 80% 的边际功效和 5% 的显着性水平，20% 的自然减员（考虑到流产、死产和随访失败）所需的样本量为每组 478 个。 因此，该研究的目标是在拟议的研究中纳入 956 名女性的总体样本。