ZyVac-TCV 孟加拉国研究

这将是伤寒结合疫苗 (Vi-TCV) (ZyVac® TCV) 的 III 期有效性研究。 该研究将采用测试阴性设计 (TND)，在居住在孟加拉国达卡选定地理区域的 6 个月至 15 岁儿童封闭队列中进行。 TND 是一种特殊类型的病例对照研究，包括在同一医疗机构中表现出相似体征和症状（与病例相似）的对照组。 通过实验室检测对患有感兴趣疾病的个体进行测试，其中测试阳性和测试阴性的个体分别被视为病例和对照。

假设：

伤寒Vi-多糖结合疫苗将有效预防孟加拉国儿童伤寒。

具体目标

主要目标：

使用测试阴性设计评估伤寒结合疫苗 (TCV) 对血培养确诊的伤寒的有效性

次要目标：

评估伤寒结合疫苗（TCV）对按年龄组（6个月至<2岁、2至4岁、5至15岁）分层的血培养确诊伤寒的有效性 评估伤寒结合疫苗（TCV）的有效性）针对血培养证实的伤寒，按疫苗接种后的随访期（第一个和第二个六个月）分层。年龄组（6个月至<2岁、2至4岁、5至15岁）

研究区域 本研究将在达卡南部城市公司的 5、6、7、48、49、50、63、71 和 72 区进行，面积约 10.33 平方公里。 该领域尚未开展 TCV 活动。 根据 2022 年人口和住房普查，选定地理流域内的总人口约为 465,000 人，家庭户数约为 122,000 户。 男性比例为 54%，平均家庭规模约为 3.8 人。 假设约 20% 的人口年龄在 6 个月至 15 岁之间，则符合年龄条件的儿童的预期人数约为 92,000 人。

基线测绘 将根据开源地理参考卫星图像（来源：Esri、Maxar、Earthstar Geographys 和地理信息系统 (GIS) 用户社区）创建研究区域的地图。 研究区域的卫星图像将被分成几个小块来打印，并提供给现场团队进行数据收集。 在此过程中，现场团队将根据地图访问整个区域，并在打印图像中绘制结构/建筑物、道路和其他显着地理特征。 所有建筑物/构筑物都将分配一个唯一的地理信息系统（GIS）识别号，并提交给GIS团队开发数字矢量数据（点、线和多边形特征）。 结构/建筑物（多边形特征）质心x和y坐标的数字数据将用于表示现实世界坐标值或全球定位系统（GPS）值。

基线列表 研究区域内的所有家庭都将被分配一个唯一的识别号码，并且所有家庭成员都将被列举。 将获得有关符合年龄条件的儿童的信息，包括姓名、年龄、性别、出生日期和父母姓名。 此外，还将收集户主姓名、住址、户主手机号码。 先前分配的 GIS ID 将合并到基线列表表格中，新识别的结构将在 GIS 数据库中更新。 我们将拍摄出生证明或国家免疫卡的照片，以确认参与者的年龄（如果有）。 户主或关键线人将提供口头同意。

潜在符合疫苗接种资格的儿童的参与者卡 准备好基线名单后，我们将确定符合年龄条件（6 个月至 15 岁）的参与者。 然后我们将为所有符合条件的儿童准备参加卡，并在疫苗接种前提供。 参与者卡上将有一个唯一的识别号码，将在疫苗接种期间使用。 将准备一份潜在合格参与者的主名单。

疫苗接种

疫苗接种临时排除标准：

如果在接种疫苗时出现以下任何情况，参与者将被暂时禁止接种疫苗：

过去 30 天内接受过任何其他疫苗 接种疫苗前 24 小时内当前体温至少 38°C 或报告发烧 接种疫苗前 4 小时内使用过退烧药 年龄在 12 至 15 岁之间的未婚女孩，其接种疫苗的第一天末次月经 (LMP) 超过 28 天前或就诊时不知道末次月经日期

如果这些适用，参与者将暂时被排除在疫苗接种之外，直到临时排除标准不再适用。 请注意，对于发烧超过 38°C 的儿童，这必须是退烧后至少 48 小时。 年龄≥12至15岁的未婚女孩，其末次月经第一天超过28天或在就诊时不知道最后一次月经的日期，将被要求在下次月经开始后返回接种疫苗。 将进行重新评估，以确保这些临时排除标准不再存在。

核实可能符合资格的儿童 所有有符合年龄资格的儿童的家庭将被告知前往最近的疫苗接种中心。 如果在基线列出期间未提供参与者的出生证明或国家免疫卡，我们将通知其父母或监护人在接种疫苗时携带它们。 到达疫苗接种中心后，参与者和疫苗接种 ID 将通过列表数据库和主列表进行验证。 然后根据纳入/排除标准进行筛选。

知情同意书 最新批准的书面知情同意书/同意书将以当地语言提交给参与者的家长/监护人，详细说明研究的确切性质、研究对参与者的影响、研究的影响和限制。方案、已知的副作用以及参与所涉及的任何风险。 将明确说明，参与者的家长/监护人可以随时以任何理由自由地退出研究，而不影响未来的护理，不影响其合法权利，并且没有义务给出退出的理由。 在招募期间，参与者及其父母/监护人将有尽可能多的时间考虑信息，并有机会询问研究者或其他独立方，以决定他们是否参加研究。 然后将使用参与者父母/监护人注明日期的签名或指纹以及提交并获得知情同意书的人的注明日期的签名，获得书面知情同意/同意，并额外选择同意血液样本。 信息表将以他们能够理解的语言提供给 11 -15 岁的儿童。 对于 11 岁及以上的儿童，获得同意的人将在同意书上记录知情同意。 获得同意的人必须具备适当的资格和经验，并已获得首席研究员 (PI) 的授权。 将向参与者提供一份已签署的知情同意书的副本。 签署的原始表格将保留在研究地点。 第三方将作为家长/监护人的证人，证明同意书中的信息和任何其他书面信息已向家长/监护人准确解释并理解，并且家长/监护人自由地给出了知情同意书监护人。 证人还将在同意书上签名并注明日期。

筛选和资格评估 通过检查数据库确认参与者后，将获得知情的书面同意。 经过适当的同意程序后，将测量体温，并询问家长使用退烧药和之前接种疫苗的时间，以评估临时排除标准。 将记录简短的病史，并根据纳入和排除标准评估资格。 具有临时排除标准的参与者将收到通知，并要求在发烧消退后 48 小时或最后一次疫苗接种后 30 天返回，以进行重复评估和重新同意。 年龄≥12至15岁的未婚女孩，其末次月经第一天超过28天或在就诊时不知道最后一次月经的日期，将被要求在下次月经开始后返回接种疫苗。 研究团队的成员将通过筛选病例报告表（CRF）收集/编辑人口统计信息（包括年龄和地址）和参与者的联系方式。 资格审核完成后，将为参加者发放一张包含疫苗接种ID和体温信息的贴纸；这些将用于疫苗责任日志。

疫苗接种 疫苗接种小组最后会检查身份，然后注射疫苗。 疫苗接种后，信息将记录在疫苗接种 CRF 中。 如果参与者被纳入免疫原性研究，则在接种疫苗之前，将由经过适当培训的工作人员采集血样。 接种研究疫苗后，参与者将被要求等待至少 30 分钟，以防出现任何立即过敏反应或任何其他不良事件 (AE)。 应建议育龄女性参与者在接种疫苗后三个月内不要怀孕。

研究药品 (IMP) 与破伤风类毒素缀合的纯化伤寒沙门氏菌 Vi 荚膜多糖作为载体蛋白（伤寒 Vi 缀合疫苗 I.P.）。 商品名：ZyVac® TCV，Zydus Lifesciences Limited。

每 0.5 毫升疫苗剂量含有：

纯化的伤寒沙门氏菌 Vi-荚膜多糖 25 μg 与破伤风类毒素（载体蛋白）缀​​合 16 至 50 μg 2-苯氧乙醇（作为防腐剂） 2.50 mg 等渗缓冲溶液 q.s. 该疫苗采用预装 2.5 毫升 5 剂小瓶包装。 对于年幼的儿童，最好在大腿中部的前外侧进行肌肉注射，对于年龄较大的儿童，最好在上臂进行注射，并采取无菌预防措施。

供应 Vi-TCV 疫苗 (ZyVac® TCV) 将由 Zydus Lifesciences Limited 提供。

储存 当不用于日常活动时，Vi-TCV 研究疫苗将储存在温度监控的 icddr,b 冷室设施中，温度为 2° 至 8°C。 在日常活动中使用时，疫苗将储存在温度监控的冰箱或冷藏箱中。 每个小瓶都会贴上“疫苗小瓶监视器”（VVM）的标签；温度敏感点，可指示小瓶所暴露的累积热量。 当暴露在高温下可能使疫苗降解超出可接受的水平并且不应使用时，它会警告最终用户。

储存特别注意事项 储存于 2°C 至 8°C。 不要冻结。 如果冷冻则丢弃。 请将本品放在儿童接触不到的地方。 使用前轻轻摇匀。 请勿在标签所示有效期后使用疫苗

研究疫苗的责任 疫苗将被运往孟加拉国的中央储存设施并通过海关。 然后将其运输并分发到当地疫苗接种点，同时保持冷链（目标温度在 2°-8°C 之间）。 将在研究期间每天记录接受、使用和浪费的研究疫苗的剂量数量，并每周检查一次。

免疫接种后的不良事件 接种研究疫苗后，将密切观察参与者至少 30 分钟是否有任何立即过敏反应或任何其他不良事件 (AE)。 所有详细信息将记录在 CRF 中。

不良事件跟进（第 7 天，-1/+7）：

将选择 600 名参与者进行主动监测随访和免疫原性子研究。 接种当天，每位参与者都会收到一张日记卡。 接种疫苗 7 天后，我们将通过电话或亲自联系参与者进行随访，并记录免疫接种后的任何不良事件 (AEFI)。 这些参与者的选择将按年龄分层（6 个月至 <2 岁、2-4 岁和 5-15 岁），每个年龄层分配 200 名。

我们鼓励不属于此子集的参与者的家长前往 Maniknagar 现场办事处的“不良事件监测单元”，该中心将配备一名医生，并且每天 24 小时待命，以便在整个疫苗接种期间进行不良事件监测+ 7 天。

信息将包括：

口头再次确认同意参与研究。 家长/监护人报告与疫苗接种和疫苗接种后药物使用相关的不良事件。

施用 TCV 后，出现局部 AE（疼痛、发红、肿胀和硬结）和全身 AE（发烧、恶心、呕吐、腹泻、头痛 1、不适 1、肌痛 1、关节痛 1、异常哭泣 2、食欲不振 2、嗜睡 2 和烦躁 2 (1 ：适用于年龄≥2岁的受试者；2：适用于年龄<2岁的受试者））将记录7接种疫苗后几天。

未经请求的（其他）AE 将在接种疫苗后记录 28 天。 重申联系方式以及在发烧（≥2 天和/或体温升高）的情况下前往 Maniknagar 现场办事处的说明

• 演示时温度为 38°C）。

因果关系

每个不良事件与研究药物的关系必须由具有医学资格的个人根据以下定义确定：

相关：怀疑研究疫苗与 AE 之间存在关系（未确定概率程度）；研究疫苗有可能导致 AE

不相关：不怀疑研究疫苗与AE之间存在关系；还有其他更可能的原因，并且研究疫苗的施用不被怀疑导致 AE 记录不良事件的程序

从疫苗接种到第 7 天 TCV 给药后，出现局部 AE（疼痛、发红、肿胀和硬结），出现全身 AE（发烧、恶心、呕吐、腹泻、头痛 1、不适 1、肌痛 1、关节痛 1、异常哭泣 2、食欲不振 2、嗜睡2和烦躁2（1：适用于年龄≥2岁的参与者；2：适用于<2岁的参与者））疫苗接种后持续7天。 未经请求的（其他）AE 将在接种疫苗后记录 28 天。

对于注射疫苗，要记录的局部体征和症状通常至少包括所有年龄段的注射部位的疼痛、发红和肿胀。 可以使用各种类型的测量装置来记录发红和肿胀的程度。 将使用数字温度计记录发烧情况并确定腋窝温度。 对于主观症状（例如疲劳和肌痛），将考虑以下评分系统。

由具有医学资质的研究者判断，研究团队/研究者观察到的或参与者家长/监护人报告的疫苗接种后前 7 天内发生的所有与疫苗接种相关的不良事件都将记录在 CRF 中。 信息的收集将分为被动和主动两种。

为了对 600 名参与者进行主动监控，将通过电话或家访主动收集信息。 我们鼓励不属于此子集的参与者的家长前往马尼克纳加尔现场办事处的“不良事件监测小组”，该小组将配备一名医生，并且每天 24 小时待命，以便在整个疫苗接种期间进行不良事件监测+ 7 天。

将记录以下信息：描述、发病日期和结束日期、严重程度、与研究药物的相关性评估以及采取的行动。 必要时应提供后续信息。

事件的严重程度将按照以下等级进行评估：1 = 轻度，2 = 中度，3 = 严重，4 = 可能危及生命

研究者、研究团队成员观察到的或家长/监护人报告的所有严重不良事件 (SAE) 将记录在 CRF 中。

在整个研究期间，由具有医学资格的研究者判断、由研究者或研究团队成员观察、或由家长/监护人报告的严重不良事件 (SAE) 将记录在 CRF 中。 将记录以下信息：描述、发病日期和结束日期、严重程度、与研究药物的相关性评估以及采取的行动。 必要时应提供后续信息。 在整个研究期间，所有 SAE 都将记录在 CRF 中。 患有 SAE 的参与者将由具有医学资格的调查员进行跟踪，直到问题解决或事件被认为稳定为止。

严重不良事件的报告程序 icddr,b 机构审查委员会 (IRB) 制定的表格将用于报告所有 SAE。

疫苗接种后 6 个月内发生的所有 SAE 将在现场研究团队开始工作后 24 小时内向数据安全监测委员会 (DSMB)、药物管理局 (DGDA)、PI 和其他研究调查人员报告知道该事件。 更详细的报告表将在初次报告后最短的时间内完成并发送给上述所有各方。 额外和进一步要求的信息（对原始案例的后续或更正）将在后续安全报告表中详细说明。 所有 SAE 必须在 7 天内报告给研究申办者。 研究结束时，总结报告将提交给 icddr、b IRB 和 DGDA。

退热镇痛药适应症 发热（腋温>38°C/100.4°F）时使用退热药 或摸起来很热）接种疫苗后。 如果接种疫苗后出现疼痛或不适，将使用镇痛药。

还将成立安全监督委员会 DSMB 来监督该研究的安全部分。 DSMB 成员不会以任何方式参与该研究。 此外，具有相关研究相关或治疗专业知识的医生将被确定为独立安全监测员（ISM）。 ISM 将不会成为本研究的研究者。 在任何情况下，都会要求已确定的 ISM 对出现不良事件的儿童进行独立评估。 评估详情将报告给 PI 和 DSMB。

妊娠随访 对于在常规随访中确定为在接种疫苗时怀孕或在接种疫苗后三个月内怀孕的所有已婚女孩，将对妊娠结果进行随访。 该随访将包括每月访视直至怀孕结束，最后一次接触发生在分娩或妊娠结果后。 从妊娠第八个月开始，每周将通过电话进行额外的随访。 我们将记录与怀孕相关的信息，将其视为医学上的重要事件。

免疫原性研究 600 名参与者的子集将参加免疫原性子研究，并将在一个月（D30/+7 天）、6 个月（ D180+/-14 天），以及接种疫苗后一年（D365+/-30 天）。 每个年龄层（6个月至<2岁、2至4岁、5至15岁）的前200名同意的参与者将被选择并参加免疫原性子研究。

在这些额外的访问中，将执行以下程序：

确认继续参与研究 采集血液（3 毫升用于 6 个月至 4 年，5 毫升用于 5 至 15 年） 确认联系方式并重申在发烧 ≥ 2 天和/或情况下前往医疗保健机构的指示或就诊时体温≥38°C。

上述信息将记录在免疫原性CRF中。 参加免疫原性研究的参与者的父母/监护人将获得后续预约的详细信息。

肠热病监测 马尼克纳加尔现场办事处和 Mugda 医学院和医院将对基线名单中记录的所有符合年龄条件（6 个月至 15 岁）的居民进行肠热病监测。 就诊时有≥2天发烧主观病史和/或体温≥38°C的参与者将被纳入监测。 将收集血样（3ml）用于微生物培养。 参与者将接受适当的临床管理。 血培养阳性患者将被上门拜访以确认其身份，并收集有关其病情的信息，如果病情没有改善，将要求患者前往现场办公室。 治疗将根据实验室测试进行必要的调整。

研究人员将定期走访基线清单中包含的家庭，提醒他们，如果他们的孩子（疫苗接种者和非疫苗接种者）发烧，请前往马尼克纳加尔现场办事处寻求治疗。

被动监测登记的资格标准

参与者信息可在列表数据库中找到 家长/监护人愿意并且有能力提供知情同意。 对于 11 至 15 岁的参与者，也将被视为知情同意。 来自研究地区的参与者，在就诊时发烧持续≥2天和/或体温≥38°C。 研究第一天年龄为 6 个月至 15 岁的参与者疫苗接种运动

实验室程序

被动监测样本将从登记参与者收集的血液样本的微生物培养将在 icddr,b 临床微生物学、免疫学和分子诊断实验室中使用 BACTEC 或 BacT/ALERT 系统进行。 血培养法的敏感性和特异性分别为59%和100%。 来自可疑菌落的生物体将通过生化测试进行鉴定，最终鉴定将通过沙门氏菌特异性抗血清（Denka Sieken，东京，日本）进行玻片凝集试验来完成。 将通过纸片扩散法在 Mueller-Hinton 琼脂平板上评估引起肠热病的伤寒沙门氏菌和副伤寒沙门氏菌的抗生素敏感性模式，其中 Oxoid 纸片含有氨苄西林、复方新诺明、氯霉素、阿奇霉素、头孢曲松、环丙沙星、萘啶酸和头孢克肟。 该程序将按照 GCP 指南和标准操作程序进行。 这些测试的结果将记录在参与者 CRF 中。 分离的菌株将保存在粘膜免疫学和疫苗学实验室进行进一步分析。

免疫原性研究样本 用于免疫原性子研究的血液样本将每天运送到 icddr,b 实验室。 样本将由经过培训的研究人员按照标准操作程序 (SOP) 进行处理和存储。 血清/血浆将被储存并用于使用市售酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒（VaccZyme，结合位点）测量抗Vi-IgG抗体。 该测定将根据制造商的说明进行。 实验室流程将在 icddr,b 的粘膜免疫学和疫苗学实验室进行。

参与者的撤回 参与者的父母/监护人可以随时撤回同意。 如果研究者认为有必要，出于任何原因，研究者也可以随时终止参与者的研究，包括： 不合格（在研究期间出现或回顾性地在筛选时被忽视） 明显的方案偏差 严重不遵守治疗方案或研究要求 导致无法继续遵守研究程序和随访的不良事件或疾病进展

根据参与者希望退出的方面，退出将导致任何后续电话、访问或血液测试（适用于子集）的停止。 研究中不需要进一步的治疗，因此不需要采取额外的行动。 参与者的父母/监护人在退出时可以选择仅退出主动研究程序（后续电话和访问），但仍对主要结果进行被动监测（允许我们访问他们的医院记录和血液检查结果） ，或退出所有研究联系。 参与者退出之前收集的数据和血液样本将作为研究数据的一部分进行保存和分析。 退出研究的参与者可以选择在未来某个日期重新参与（如果他们选择这样做）。 所有退出研究的参与者都将获得有关如何重新参与研究的信息（如果他们愿意的话）。 退出研究的原因（如果已知）将记录在参与者的 CRF 中。

源文件 每个参与者都将拥有完整的记录源文件，包括整个研究期间的 CRF、实验室报告和测试结果。

数据管理 研究人员将填充参与者 CRF 的内容，所有研究数据将直接记录到电子数据捕获 (EDC) 系统中（例如 八角软件）。 将使用电子设备和 CRF 硬拷贝来收集和记录数据。 当电子设备被带回中央现场办公室并且有可靠的互联网可用时，数据将在线收集并定期上传到云服务器。 纸质CRF（pCRF）也将作为备份，在在线数据收集中断的情况下，pCRF将用于收集数据，然后在可行的情况下将数据输入EDC系统。

基线列表数据将通过内部设计的 Android 应用数据库 SQLite 和 SQL Server 在电子设备上离线收集。 系统将包含一些逻辑检查，并在保存到服务器之前进行检查。 将使用 SQL 脚本定期检查数据以检测错误。 错误将由用户更正并再次传输到服务器。 数据更正后，系统中始终会提供更正审核跟踪。 数据管理人员会定期保留SQL Server数据库的备份，并将备份存储在台式机、笔记本电脑和其他可移动设备上。

所有其他 CRF 将在名为 Octalsoft 的 EDC 系统上设计和维护，这是一个用于构建和管理在线调查和数据库的安全 Web 应用程序。 将定期对系统进行质量控制检查。 EDC系统（CRF数据）和内部设计的Android应用程序都将通过安全的Web界面使用关系数据库，并在数据输入期间应用数据检查以确保数据质量。

所有参与者都将通过唯一的试验特定编号和/或代码进行识别；这将不包括任何可识别信息。 一些个人信息将保存在icddr,b设计的Android应用程序中。 只有现场研究人员和赞助商数据管理员才能查看个人信息。

试用人员将可以通过唯一的用户名和密码访问内部设计的 Android 应用程序和 Octalsoft。 根据试验中的角色和职责，每位试验工作人员都可以适当级别地访问 CRF 和收集的数据。

在试验期间，所有参与者数据将存储并维护在 icddr,b 的本地服务器上，如上所述。 匿名数据将与印度的赞助商共享。 试验结束时，所有个人可识别数据将被删除，完全匿名的数据将被保留以供进一步分析。

样本量计算和结果 本病例对照测试阴性设计研究需要 515 个样本量（103 例病例和 412 例对照），假设目标年龄合格人群的疫苗有效性为 80%，疫苗覆盖率为 65%（ 6个月至15年），每个病例4个对照，精度宽度为±10%（20%），1型错误率为0.05。 考虑到6个月至15岁未接种人群中伤寒发病率为每10万人年230例，因此疫苗接种目标数约为6万人。

为了实现 6 个月至 15 岁接种疫苗的目标人数（占总人口的约 31%），所需的符合年龄条件的儿童和所有年龄段的人口将分别为约 92,000 人和约 297,000 人。

统计分析对于疫苗保护的评估，将使用条件逻辑回归模型，以匹配的病例对照状态作为结果，以疫苗接种状态和选定的协变量作为自变量，以未接种疫苗作为评估的参照类别。疫苗保护。 疫苗接种与伤寒之间关联的优势比将通过拟合模型中疫苗接种系数的乘方来估计，并且系数的标准误差将用于计算估计效果的 95% 置信区间。 防护效果的计算方式为[(1 - 优势比) X 100%]。 P <0.05 时将考虑统计显着性阈值。

免疫原性和安全性数据分析 抗 Vi-IgG 抗体滴度的几何平均滴度 (GMT) 和血清转化率（与接种前第 0 天相比，第 30 天诱导的抗 Vi-IgG 抗体滴度上升≥4 倍）计算出来的。 协方差分析将用于调整基线滴度的不平衡。