作为日用牙膏提供的包含橄榄油、甜菜碱和木糖醇的组合物对细胞因子 IL-1ß、IL-4、TNF-α 水平和口腔微生物群的影响。

屏障完整性在先天免疫系统的稳态中起着关键作用。 这些屏障、它们的细胞和网络，当完好无损并居住着益生微生物组时，可以调节免疫和炎症，使身体保持稳态和与健康结果平衡。

外来物质和环境条件对粘膜和皮肤屏障的外部压力，为促炎细胞因子的表达提供了变化的基础，导致今天所谓的代谢感染和全身炎症。 持续的压力可能会超出免疫系统的控制机制，导致多种促炎细胞因子（例如 IL-1ß 和 TNF-α）不受控制地释放，这将进一步导致屏障破坏以及免疫失调和炎症状态。 相反，IL-4 具有抗炎和促炎特性。

牙周炎症是仅次于肥胖的第二个最常见的全身炎症负荷因素，是上调唾液促炎细胞因子的重要因素，并提供了解决炎症和慢性炎症疾病之间复杂串扰的实用模型。

研究设计当前的研究将是一项针对非轻度牙周患者的随机对照试验，这些患者计划在巴塞罗那大学（UB）、巴塞罗那大学牙科医院（HOUB）Bellvitge 校区进行例行就诊。

随机化和屏蔽 将通过使用 Microsoft Office Excel 2019（Microsoft Corporation，华盛顿，美国，2013 年）生成的随机分配序列对患者进行随机分配。 将使用 1:1 分配将参与者分配到干预组 (IG) 或对照组 (CG)。

干预组将使用一种实验牙膏，其中含有一种新型组合物，该组合物包含橄榄油、甜菜碱和木糖醇。 对照组将使用安慰剂牙膏。 赋形剂对于两组都是通用的。 所有产品都将包装在白色管中，并贴上可识别患者人数的标签。 分配给每位患者的产品信息将被放置在密封的信封中，仅显示患者分配编号，以保持盲法过程的完整性。 参与者和操作员都将被隐藏以进行分配。

干预措施 两组参与者将在研究开始和结束时到牙科诊所就诊。 在第一次访问期间，基线数据将被恢复。 最后一次访问将在一个月后进行，以收集最终数据。

一、首次访问（T0）：

患者将被告知研究细节。 性别和年龄数据将从病史中恢复。 不会进行牙周治疗、卫生或牙周治疗以避免改变龈下微生物群。 将恢复以下数据：

• 口腔粘膜检查
• 蛀牙、缺失和补牙 (DMFT) 指数
• 奥利里斑块索引
• 基础牙周检查：探测深度和临床附着丧失
• 唾液测定法：测量未刺激和刺激的唾液流量。
• 唾液 pH 未刺激的唾液将用于细胞因子分析。 将用无菌纸尖插入至少三颗牙齿（优选16、22、41、47）的龈沟中取样，用于微生物分析。

将记录参与者的体重和身高并计算体重指数 (BMI)，以便根据参与者的营养状况对参与者进行分类。

访视结束时，患者将收到随机分配的牙膏，并被指导每天刷牙三次，并避免使用任何其他口腔卫生产品。 第二次也是最后一次访问将安排在 1 个月后。

二.第二次访问（T1）：

将重复第一次访问的过程，收集相同的数据。 此外，患者还将对易用性、风味、满意度、接受度、偏好和推荐进行评分（从 0 到 10）。 此时，将对适当的患者进行口腔预防和/或根部刮治。

细胞因子分析 未经刺激的唾液样本将立即送往 UB Bellvitge 医院的微生物实验室。 将离心样品（14000 rpm，10 分钟，4℃），并将上清液储存在-80℃，直到通过酶联免疫吸附测定（ELISA）测定 TNF-α、IL-1β 和 IL-4 浓度。 将使用商业试剂盒（BioLegend ELISA MaxDeluxe 试剂盒人 TNF、IL-1β e IL-4 和人 TNF、IL-1β e IL-4 增强灵敏度 Flex 测试 BD 细胞计数珠阵列）。

微生物分析 浸渍的纸点将被放置在 2 ml 冷冻管中，并立即送往 UB Bellvitge 医院的微生物实验室，在 -80°C 下冷冻，以便使用 TaqMan 测定通过定量聚合酶链反应（实时 qPCR）进行进一步处理。 总细菌负荷，以每毫升菌落形成单位 (cfu/ml) 的对数单位 (log) 表示，将通过使用通用原核引物扩增 16S rRNA 基因来确定。

统计分析 样本量是使用 α=0.05、β=0.2 和 95% 的 2 尾显着性水平计算的。 根据测试相同组合物的初步研究的数据，该研究显示在健康患者中使用测试的组合物4周后龈下沟和菌斑中的病原体载量显着减少，每组将招募12名患者。