Effecten op cytokines IL-1ß, IL-4, TNF-α niveaus en orale microbiota van een samenstelling bestaande uit olijfolie, betaïne en xylitol, geleverd als dagelijkse tandpasta.

Barrière-integriteit speelt een cruciale rol in de homeostase van het aangeboren immuunsysteem. Deze barrières, hun cellen en netwerken, wanneer ze intact zijn en bewoond worden door een eubiotisch microbioom, reguleren de immuniteit en ontstekingen, waardoor het lichaam in een staat van homeostase en evenwicht blijft met de uitkomst van de gezondheid.

Externe druk op slijmvliezen en huidbarrières door vreemde stoffen en omgevingsomstandigheden biedt een veranderende basis voor pro-inflammatoire cytokine-expressie, wat leidt tot wat tegenwoordig bekend staat als metabole infectie en systemische ontsteking. Aangehouden druk kan de controlemechanismen van het immuunsysteem overschrijden, wat resulteert in een ongecontroleerde afgifte van een verscheidenheid aan pro-inflammatoire cytokines zoals IL-1ß en TNF-α, wat verder zal bijdragen aan het breken van de barrière en aan een toestand van ontregeling en ontsteking van het immuunsysteem. Integendeel, aan IL-4 worden zowel ontstekingsremmende als pro-inflammatoire eigenschappen toegeschreven.

Parodontale ontstekingen, de tweede meest voorkomende oorzaak van systemische inflammatoire belasting na obesitas, zijn een belangrijke factor die de pro-inflammatoire cytokines in het speeksel opwaarts reguleert, en biedt een praktisch model om de complexe overspraak tussen ontstekingen en chronische ontstekingsziekten aan te pakken.

STUDIEONTWERP Het huidige onderzoek zal een gerandomiseerde gecontroleerde studie zijn bij niet-milde parodontale patiënten, gepland voor een routinebezoek aan de Universiteit van Barcelona (UB), Dental Hospital Barcelona University (HOUB), Bellvitge Campus.

Randomisatie en maskering Patiënten worden willekeurig toegewezen door middel van een willekeurige toewijzingsreeks die is gegenereerd met behulp van Microsoft Office Excel 2019 (Microsoft Corporation, Washington, VS, 2013). Er wordt een 1:1-verdeling gebruikt om deelnemers toe te wijzen aan de Interventiegroep (IG) of de Controlegroep (CG).

De interventiegroep zal een experimentele tandpasta gebruiken die een nieuwe samenstelling bevat, bestaande uit olijfolie, betaïne en xylitol. De controlegroep gebruikt een placebo-tandpasta. Hulpstoffen zullen voor beide groepen gemeenschappelijk zijn. Alle producten worden verpakt in witte tubes met een label waarop het aantal patiënten vermeld staat. De productinformatie die aan elke patiënt wordt toegewezen, wordt in een verzegelde envelop geplaatst, waarop uitsluitend het patiënttoewijzingsnummer staat vermeld om de integriteit van het blinderingsproces te behouden. Zowel deelnemers als operators worden gemaskeerd voor toewijzing.

Interventies Deelnemers uit beide groepen zullen aan het begin en aan het einde van het onderzoek in de tandheelkundige kliniek worden bezocht. Tijdens het eerste bezoek worden de basisgegevens verzameld. Het laatste bezoek zal na een maand plaatsvinden voor de definitieve gegevensverzameling.

I. Eerste bezoek (T0):

Patiënten worden geïnformeerd over de details van het onderzoek. Gegevens over geslacht en leeftijd worden uit de medische geschiedenis gehaald. Er zal geen parodontale behandeling, hygiëne of profilaxis worden uitgevoerd om verandering van de subgingivale microbiota te voorkomen. De volgende gegevens worden hersteld:

• Onderzoek van het mondslijmvlies
• Index voor vergane, ontbrekende en gevulde tanden (DMFT).
• O'Leary Plaque-index
• Basisparodontaal onderzoek: diepteonderzoek en klinisch hechtingsverlies
• Sialometrie: De ongestimuleerde en gestimuleerde speekselstroom werd gemeten.
• Speeksel-pH Ongestimuleerd speeksel zal worden gebruikt voor cytokine-analyse. Er zullen monsters worden genomen met steriele papieren punten die in de gingivale sulcus van ten minste drie tanden worden gestoken, bij voorkeur vanaf 16, 22, 41, 47, voor microbiële analyse.

Het gewicht en de lengte van de deelnemer worden geregistreerd en de body mass index (BMI) wordt berekend, zodat de deelnemers kunnen worden geclassificeerd op basis van hun voedingsstatus.

Aan het einde van het bezoek ontvangen de patiënten hun gerandomiseerde toegewezen tandpasta en krijgen zij de instructie om drie keer per dag hun tanden te poetsen en geen andere mondhygiëneproducten te gebruiken. Het tweede en laatste bezoek wordt na 1 maand gepland.

II. Tweede bezoek (T1):

De procedure vanaf het eerste bezoek wordt herhaald, waarbij dezelfde gegevens worden verzameld. Bovendien beoordeelt de patiënt het gebruiksgemak, de smaak, de tevredenheid, de acceptatie, de voorkeur en de aanbeveling van 0 tot 10. Op dit moment zal orale profylaxe en/of wortelverwijdering worden uitgevoerd bij patiënten die in verwachting zijn.

Cytokine-analyse Monsters van ongestimuleerd speeksel worden onmiddellijk naar het microbiologisch laboratorium van het UB Bellvitge Ziekenhuis gestuurd. De monsters worden gecentrifugeerd (14.000 rpm, 10 min, 4ºC) en de supernatanten worden bij -80ºC bewaard totdat de TNF-α-, IL-1β- en IL-4-concentraties worden bepaald door middel van een enzymgekoppelde immunosorbenttest (ELISA). Er zullen commerciële kits (BioLegend ELISA MaxDeluxe Kit Human TNF, IL-1β e IL-4 en Human TNF, IL-1β e IL-4 Enhanced Sensitivity Flex test BD Cytometric Bead Array) worden gebruikt.

Microbiologische analyse Geïmpregneerde papieren punten worden in een cryobuisje van 2 ml geplaatst en onmiddellijk naar het microbiologisch laboratorium van het UB Bellvitge Ziekenhuis gestuurd, waar ze bij -80ºC worden ingevroren voor verdere verwerking door kwantitatieve polymerasekettingreactie (real-time qPCR) met behulp van TaqMan-assay. De totale hoeveelheid bacteriën, uitgedrukt als logaritmische eenheden (log) kolonievormende eenheden per ml (cfu/ml), zal worden bepaald door het amplificeren van het 16S rRNA-gen met behulp van universele prokariotische primers.

Statistische analyse De steekproefomvang is berekend met behulp van een α=0,05, een ß=0,2 en een tweezijdig significantieniveau van 95%. Op basis van gegevens uit een pilotstudie waarin dezelfde samenstelling werd getest en die een significante vermindering van de ziekteverwekkers in de subgingivale sulcus en bacteriële plaque liet zien na 4 weken gebruik van de geteste samenstelling bij gezonde patiënten, zullen twaalf patiënten per groep worden gerecruteerd.