Effets sur les taux de cytokines IL-1ß, IL-4, TNF-α et le microbiote oral d'une composition comprenant de l'huile d'olive, de la bétaïne et du xylitol délivrée sous forme de dentifrice quotidien.

L'intégrité de la barrière joue un rôle central dans l'homéostasie du système immunitaire inné. Ces barrières, leurs cellules et leurs réseaux, lorsqu'ils sont intacts et habités par un microbiome eubiotique, régulent l'immunité et l'inflammation, maintenant le corps dans un état d'homéostasie et d'équilibre avec l'état de santé.

La pression externe exercée sur les muqueuses et les barrières cutanées par des substances étrangères et des circonstances environnementales crée un terrain changeant pour l'expression de cytokines pro-inflammatoires conduisant à ce que l'on appelle aujourd'hui une infection métabolique et une inflammation systémique. Une pression maintenue peut dépasser les mécanismes de contrôle du système immunitaire, entraînant une libération incontrôlée d’une variété de cytokines pro-inflammatoires telles que l’IL-1ß et le TNF-α, qui contribueront davantage à la rupture de la barrière et à un état de dérégulation immunitaire et d’inflammation. Au contraire, on attribue à l’IL-4 des propriétés à la fois anti-inflammatoires et pro-inflammatoires.

L’inflammation parodontale, deuxième contributeur le plus fréquent à la charge inflammatoire systémique derrière l’obésité, est un facteur important de régulation positive des cytokines pro-inflammatoires salivaires et offre un modèle pratique pour aborder les interactions complexes entre l’inflammation et les maladies inflammatoires chroniques.

CONCEPTION DE L'ÉTUDE L'étude actuelle sera un essai contrôlé randomisé chez des patients parodontaux non légers programmés pour une visite de routine à l'Université de Barcelone (UB), Hôpital dentaire de l'Université de Barcelone (HOUB), Campus Bellvitge.

Randomisation et masquage Les patients seront assignés au hasard au moyen d'une séquence d'assignation aléatoire générée à l'aide de Microsoft Office Excel 2019 (Microsoft Corporation, Washington, USA, 2013). Une distribution 1:1 sera utilisée pour attribuer les participants soit au groupe d'intervention (IG), soit au groupe de contrôle (CG).

Le groupe d'intervention utilisera un dentifrice expérimental contenant une nouvelle composition comprenant de l'huile d'olive, de la bétaïne et du xylitol. Le groupe témoin utilisera un dentifrice placebo. Les excipients seront communs aux deux groupes. Tous les produits seront conditionnés dans des tubes blancs avec une étiquette identifiant le numéro de patient. Les informations sur le produit attribuées à chaque patient seront placées dans une enveloppe scellée, présentant exclusivement le numéro d'attribution du patient pour maintenir l'intégrité du processus de mise en aveugle. Les participants et les opérateurs seront masqués pour l'affectation.

Interventions Les participants des deux groupes seront assistés à la clinique dentaire au début et à la fin de l'étude. Lors de la première visite, les données de base seront récupérées. La visite finale aura lieu après un mois pour la collecte finale des données.

I. Première visite (T0) :

Les patients seront informés des détails de l'étude. Les données sur le sexe et l'âge seront récupérées à partir des antécédents médicaux. Aucun traitement parodontal, d'hygiène ou de profilaxie ne sera réalisé pour éviter d'altérer le microbiote sous-gingival. Les données suivantes seront récupérées :

• Examen de la muqueuse buccale
• Index des dents cariées, manquantes et obturées (DMFT)
• Index des plaques O'Leary
• Examen parodontal de base : sondage de la profondeur et perte d'attache clinique
• Sialométrie : les flux salivaires non stimulés et stimulés ont été mesurés.
• pH salivaire La salive non stimulée sera utilisée pour l'analyse des cytokines. Des échantillons seront prélevés avec des pointes de papier stériles insérées dans le sillon gingival d'au moins trois dents, de préférence parmi 16, 22, 41, 47 pour analyse microbienne.

Le poids et la taille des participants seront enregistrés et l'indice de masse corporelle (IMC) calculé pour permettre la classification des participants en fonction de leur état nutritionnel.

À la fin de la visite, les patients recevront leur dentifrice attribué aléatoirement et il leur sera demandé de se brosser les dents trois fois par jour et de s'abstenir d'utiliser tout autre produit d'hygiène bucco-dentaire. La deuxième et dernière visite sera programmée après 1 mois.

II. Deuxième visite (T1) :

La procédure de la première visite sera répétée, collectant les mêmes données. De plus, le patient évaluera la facilité d'utilisation, la saveur, la satisfaction, l'acceptation, la préférence et la recommandation de 0 à 10. À ce moment-là, une prophylaxie orale et/ou un détartrage radiculaire seront effectués chez les patients attendus.

Analyse des cytokines Des échantillons de salive non stimulée seront envoyés immédiatement au laboratoire de microbiologie de l'hôpital UB Bellvitge. Les échantillons seront centrifugés (14 000 tr/min, 10 min, 4 °C) et les surnageants conservés à -80 °C jusqu'à la détermination des concentrations de TNF-α, d'IL-1β et d'IL-4 par test immuno-enzymatique (ELISA). Des kits commerciaux (BioLegend ELISA MaxDeluxe Kit Human TNF, IL-1β e IL-4 et Human TNF, IL-1β e IL-4 Enhanced Sensitivity Flex test BD Cytometric Bead Array) seront utilisés.

Analyse microbiologique Les pointes de papier imprégnées seront placées dans un cryotube de 2 ml et envoyées immédiatement au laboratoire de microbiologie de l'hôpital UB Bellvitge, où elles seront congelées à -80 ° C pour un traitement ultérieur par réaction en chaîne par polymérase quantitative (qPCR en temps réel) à l'aide du test TaqMan. La charge bactérienne totale, exprimée en unités logarithmiques (log) d'unités formant colonie par mL (ufc/ml), sera déterminée en amplifiant le gène de l'ARNr 16S à l'aide d'amorces procariotiques universelles.

Analyse statistique La taille de l'échantillon a été calculée en utilisant un α = 0,05, un ß = 0,2 et un niveau de signification bilatéral de 95 %. Sur la base des données d'une étude pilote testant la même composition, qui a montré une réduction significative de la charge pathogène dans le sillon sous-gingival et la plaque bactérienne après 4 semaines d'utilisation de la composition testée chez des patients sains, douze patients par groupe seront recrutés.