Effekter på cytokiner IL-1ß, IL-4, TNF-α nivåer og oral mikrobiota av en sammensetning bestående av olivenolje, betain og xylitol levert som en daglig tannkrem.

Barriereintegritet spiller en sentral rolle i homeostasen til det medfødte immunsystemet. Disse barrierene, deres celler og nettverk, når de er intakte og bebodd med et eubiotisk mikrobiom, regulerer immunitet og betennelse, holder kroppen i en tilstand av homeostase og balanserer med helseutfallet.

Ytre press på slimhinner og hudbarrierer fra fremmede stoffer og miljømessige forhold, gir et skiftende grunnlag for pro-inflammatorisk cytokinuttrykk som fører til det som i dag er kjent som metabolsk infeksjon og systemisk inflammasjon. Opprettholdt trykk kan overskride immunsystemets kontrollmekanismer, noe som resulterer i en ukontrollert frigjøring av en rekke pro-inflammatoriske cytokiner som IL-1ß og TNF-α, som ytterligere vil bidra til barrierebrudd og til en tilstand av immun dysregulering og betennelse. Tvert imot har IL-4 blitt tilskrevet både anti-inflammatoriske og pro-inflammatoriske egenskaper.

Periodontal betennelse, den nest hyppigste bidragsyteren til systemisk inflammatorisk belastning bak fedme, er en viktig faktor som oppregulerer spyttpro-inflammatoriske cytokiner, og tilbyr en praktisk modell for å adressere den komplekse krysstalen mellom betennelse og kroniske inflammatoriske sykdommer.

STUDIEDESIGN Den nåværende studien vil være en randomisert kontrollert studie på ikke-milde periodontale pasienter som er planlagt for et rutinebesøk ved Universitetet i Barcelona (UB), Tannsykehuset Barcelona Universitet (HOUB), Bellvitge Campus.

Randomisering og maskering Pasienter vil bli tilfeldig tildelt ved hjelp av en tilfeldig tildelingssekvens generert ved hjelp av Microsoft Office Excel 2019 (Microsoft Corporation, Washington, USA, 2013). En 1:1-fordeling vil bli brukt til å tilordne deltakere til enten Intervention Group (IG) eller Control Group (CG).

Intervensjonsgruppen vil bruke en eksperimentell tannkrem som inneholder en ny sammensetning bestående av olivenolje, betain og xylitol. Kontrollgruppen vil bruke placebotannkrem. Hjelpestoffer vil være felles for begge gruppene. Alle produktene vil bli pakket i hvite rør med en etikett som identifiserer antall pasienter. Produktinformasjonen som er tildelt hver pasient vil bli plassert i en forseglet konvolutt, som utelukkende viser pasienttildelingsnummeret for å opprettholde integriteten til blendingsprosessen. Både deltakere og operatører vil bli maskert til oppdrag.

Intervensjoner Deltakere fra begge grupper vil bli oppmøte på tannklinikken ved begynnelsen og slutten av studien. Under første besøk vil grunnlinjedata bli gjenopprettet. Endelig besøk vil finne sted etter en måned for endelig datainnsamling.

I. Første besøk (T0):

Pasientene vil bli informert om studiedetaljene. Kjønns- og aldersdata vil bli gjenvunnet fra sykehistorien. Ingen periodontal behandling, hygiene eller profilakse vil bli utført for å unngå å endre subgingival mikrobiota. Følgende data vil bli gjenopprettet:

• Munnslimhinneundersøkelse
• Indeks for forfalne, manglende og fylte tenner (DMFT).
• O'Leary Plaque Index
• Grunnleggende periodontal undersøkelse: Undersøkende dybde og klinisk tilknytningstap
• Sialometri: Ustimulert og stimulert spyttstrøm ble målt.
• Spytt pH Ustimulert spytt vil bli brukt til cytokinanalyse. Prøver vil bli tatt med sterile papirpunkter satt inn i gingival sulcus på minst tre tenner, fortrinnsvis fra 16, 22, 41, 47 for mikrobiell analyse.

Deltakerens vekt og høyde vil bli registrert og kroppsmasseindeks (BMI) beregnet for å tillate deltakerne klassifisering i henhold til deres ernæringsstatus.

På slutten av besøket vil pasientene motta sin randomiserte tildelte tannkrem og vil bli bedt om å pusse tennene tre ganger om dagen og avstå fra å bruke andre munnhygieneprodukter. Det andre og siste besøket vil bli planlagt etter 1 måned.

II. Andre besøk (T1):

Prosedyren fra første besøk vil bli gjentatt, og samler inn de samme dataene. I tillegg vil pasienten vurdere brukervennlighet, smak, tilfredshet, aksept, preferanse og anbefaling fra 0 til 10. På dette tidspunktet vil oral profylakse og/eller rotskalering bli utført hos pasienter som er i beredskap.

Cytokinanalyse Prøver fra ustimulert spytt sendes umiddelbart til mikrobiologilaboratoriet ved UB Bellvitge sykehus. Prøver vil bli sentrifugert (14000 rpm, 10 min, 4ºC), og supernatanter lagres ved -80ºC til bestemmelse av TNF-α, IL-1β og IL-4 konsentrasjoner ved enzymkoblet immunosorbentanalyse (ELISA). Kommersielle sett (BioLegend ELISA MaxDeluxe Kit Human TNF, IL-1β e IL-4 og Human TNF, IL-1β e IL-4 Enhanced Sensitivity Flex test BD Cytometric Bead Array) vil bli brukt.

Mikrobiologisk analyse Impregnerte papirpunkter plasseres i et 2 ml kryorør og sendes umiddelbart til mikrobiologilaboratoriet ved UB Bellvitge Hospital, hvor det fryses ved -80ºC for videre prosessering ved kvantitativ polymerasekjedereaksjon (sanntids qPCR) ved bruk av TaqMan-analyse. Total bakteriemengde, uttrykt som logaritmiske enheter (log) av kolonidannende enheter per ml (cfu/ml), vil bli bestemt ved å forsterke 16S rRNA-genet ved bruk av universelle prokariotiske primere.

Statistisk analyse Prøvestørrelsen er beregnet ved å bruke et α=0,05, et ß=0,2 og et 2-tailed signifikansnivå på 95 %. Basert på data fra en pilotstudie som testet samme sammensetning, som viste en signifikant reduksjon i patogenbelastning i subgingival sulcus og bakteriell plakk etter 4 ukers bruk av den testede sammensetningen hos friske pasienter, vil tolv pasienter per gruppe rekrutteres.