Effekter på cytokiner IL-1ß, IL-4, TNF-α-nivåer och oral mikrobiota av en sammansättning bestående av olivolja, betain och xylitol levererad som en daglig tandkräm.

Barriärintegritet spelar en avgörande roll i homeostasen av det medfödda immunsystemet. Dessa barriärer, deras celler och nätverk, när de är intakta och bebodda med en eubiotisk mikrobiom, reglerar immunitet och inflammation, håller kroppen i ett tillstånd av homeostas och balanserar med hälsoresultatet.

Yttre tryck på slemhinnor och hudbarriärer från främmande ämnen och miljöförhållanden, ger en föränderlig grund för pro-inflammatoriska cytokinuttryck som leder till vad som idag kallas metabolisk infektion och systemisk inflammation. Bibehållet tryck kan överskrida immunsystemets kontrollmekanismer, vilket resulterar i en okontrollerad frisättning av en mängd pro-inflammatoriska cytokiner som IL-1ß och TNF-α, som ytterligare kommer att bidra till barriärbrott och till ett tillstånd av immunförstöring och inflammation. Tvärtom har IL-4 tillskrivits både antiinflammatoriska och pro-inflammatoriska egenskaper.

Parodontal inflammation, den näst vanligaste bidragsgivaren till systemisk inflammatorisk belastning bakom fetma, är en viktig faktor som uppreglerar salivproinflammatoriska cytokiner och erbjuder en praktisk modell för att hantera den komplexa överhörningen mellan inflammation och kroniska inflammatoriska sjukdomar.

STUDIEDESIGN Den aktuella studien kommer att vara en randomiserad kontrollerad studie på icke-lindriga parodontala patienter som är planerade för ett rutinbesök vid universitetet i Barcelona (UB), Dental Hospital Barcelona University (HOUB), Bellvitge Campus.

Randomisering och maskering Patienter kommer att tilldelas slumpmässigt med hjälp av en slumpmässig tilldelningssekvens genererad med Microsoft Office Excel 2019 (Microsoft Corporation, Washington, USA, 2013). En 1:1-fördelning kommer att användas för att tilldela deltagare till antingen interventionsgruppen (IG) eller kontrollgruppen (CG).

Interventionsgruppen kommer att använda en experimentell tandkräm som innehåller en ny sammansättning bestående av olivolja, betain och xylitol. Kontrollgruppen kommer att använda en placebotandkräm. Hjälpämnen kommer att vara gemensamma för båda grupperna. Alla produkter kommer att förpackas i vita tuber med en etikett som identifierar patientnumret. Produktinformationen som allokeras till varje patient kommer att placeras i ett förseglat kuvert, som exklusivt visar patienttilldelningsnummer för att upprätthålla integriteten hos bländningsprocessen. Både deltagare och operatörer kommer att maskeras till uppdraget.

Interventioner Deltagare från båda grupperna kommer att delta på tandkliniken i början och i slutet av studien. Under första besöket kommer baslinjedata att återställas. Slutbesök kommer att äga rum efter en månad för slutlig datainsamling.

I. Första besöket (T0):

Patienterna kommer att informeras om studiedetaljerna. Uppgifter om kön och ålder kommer att återställas från medicinsk historia. Ingen periodontal behandling, hygien eller profilaxis kommer att utföras för att undvika att subgingival mikrobiota förändras. Följande data kommer att återställas:

• Undersökning av munslemhinnan
• Förfallna, saknade och fyllda tänder (DMFT) index
• O'Leary Plaque Index
• Grundläggande parodontal undersökning: Undersökning av djup och klinisk anknytningsförlust
• Sialometri: Ostimulerat och stimulerat salivflöde mättes.
• Saliv pH Ostimulerad saliv kommer att användas för cytokinanalys. Prover kommer att tas med sterila papperspunkter insatta i tandköttssulcus på minst tre tänder, helst från 16, 22, 41, 47 för mikrobiell analys.

Deltagarens vikt och längd kommer att registreras och body mass index (BMI) beräknas för att möjliggöra klassificering av deltagarna efter deras näringsstatus.

I slutet av besöket kommer patienterna att få sin randomiserade tandkräm och instrueras att borsta tänderna tre gånger om dagen och avstå från att använda andra munhygienprodukter. Det andra och sista besöket kommer att ske efter 1 månad.

II. Andra besöket (T1):

Proceduren från första besöket kommer att upprepas och samma data samlas in. Dessutom kommer patienten att bedöma användarvänlighet, smak, tillfredsställelse, acceptans, preferenser och rekommendationer från 0 till 10. Vid denna tidpunkt kommer oral profylax och/eller rotfjällning att utföras hos patienter som kommer att behövas.

Cytokinanalys Prover från ostimulerad saliv skickas omedelbart till det mikrobiologiska laboratoriet på UB Bellvitge sjukhus. Proverna kommer att centrifugeras (14000 rpm, 10 min, 4ºC), och supernatanter lagras vid -80ºC tills TNF-α, IL-1β och IL-4 koncentrationer bestäms genom enzymkopplad immunosorbentanalys (ELISA). Kommersiella kit (BioLegend ELISA MaxDeluxe Kit Human TNF, IL-1β e IL-4 och Human TNF, IL-1β e IL-4 Enhanced Sensitivity Flex test BD Cytometric Bead Array) kommer att användas.

Mikrobiologisk analys Impregnerade papperspunkter kommer att placeras i ett 2 ml kryorör och skickas omedelbart till mikrobiologiska laboratoriet på UB Bellvitge Hospital, där de kommer att frysas vid -80ºC för vidare bearbetning genom kvantitativ polymeraskedjereaktion (realtids-qPCR) med TaqMan-analys. Den totala bakteriemängden, uttryckt som logaritmiska enheter (log) av kolonibildande enheter per ml (cfu/ml), kommer att bestämmas genom att amplifiera 16S rRNA-genen med användning av universella prokariotiska primrar.

Statistisk analys Provstorleken har beräknats med användning av en α=0,05, en ß=0,2 och en 2-tailed signifikansnivå på 95 %. Baserat på data från en pilotstudie som testade samma komposition, som visade en signifikant minskning av patogenbelastningen i subgingival sulcus och bakteriell plack efter 4 veckors användning av den testade kompositionen hos friska patienter, kommer tolv patienter per grupp att rekryteras.