Efectos sobre los niveles de citocinas IL-1ß, IL-4, TNF-α y la microbiota oral de una composición que comprende aceite de oliva, betaína y xilitol suministrada como pasta de dientes diaria.

La integridad de la barrera juega un papel fundamental en la homeostasis del sistema inmunológico innato. Estas barreras, sus células y redes, cuando están intactas y habitadas por un microbioma eubiótico, regulan la inmunidad y la inflamación, manteniendo el cuerpo en un estado de homeostasis y equilibrio con el resultado de la salud.

La presión externa sobre las barreras mucosas y cutáneas por sustancias extrañas y circunstancias ambientales proporciona un terreno cambiante para la expresión de citoquinas proinflamatorias que conduce a lo que hoy se conoce como infección metabólica e inflamación sistémica. La presión mantenida puede exceder los mecanismos de control del sistema inmunológico, lo que resulta en una liberación incontrolada de una variedad de citoquinas proinflamatorias como IL-1ß y TNF-α, que contribuirán aún más a la rotura de la barrera y a un estado de desregulación e inflamación inmune. Por el contrario, a la IL-4 se le han atribuido propiedades tanto antiinflamatorias como proinflamatorias.

La inflamación periodontal, el segundo contribuyente más frecuente a la carga inflamatoria sistémica detrás de la obesidad, es un factor importante que regula al alza las citoquinas proinflamatorias salivales y ofrece un modelo práctico para abordar la compleja interacción entre la inflamación y las enfermedades inflamatorias crónicas.

DISEÑO DEL ESTUDIO El estudio actual será un ensayo controlado aleatorio en pacientes periodontales no leves programados para una visita de rutina en la Universidad de Barcelona (UB), Hospital Dental Universitario de Barcelona (HOUB), Campus de Bellvitge.

Aleatorización y enmascaramiento Los pacientes serán asignados aleatoriamente mediante una secuencia de asignación aleatoria generada utilizando Microsoft Office Excel 2019 (Microsoft Corporation, Washington, EE. UU., 2013). Se utilizará una distribución 1:1 para asignar a los participantes al Grupo de Intervención (IG) o al Grupo de Control (CG).

El grupo de intervención utilizará una pasta de dientes experimental que contiene una nueva composición que comprende aceite de oliva, betaína y xilitol. El grupo de control utilizará una pasta de dientes placebo. Los excipientes serán comunes a ambos grupos. Todos los productos estarán envasados ​​en tubos blancos con una etiqueta que identificará el número de paciente. La información del producto asignada a cada paciente se colocará en un sobre sellado, exhibiendo exclusivamente el número de asignación del paciente para mantener la integridad del proceso de cegamiento. Tanto los participantes como los operadores estarán enmascarados para la asignación.

Intervenciones Los participantes de ambos grupos serán atendidos en la clínica dental al inicio y al final del estudio. Durante la primera visita se recuperarán los datos de referencia. La visita final se realizará después de un mes para la recopilación de datos finales.

I. Primera Visita (T0):

Se informará a los pacientes sobre los detalles del estudio. Los datos de sexo y edad se recuperarán del historial médico. No se realizará ningún tratamiento periodontal, higiene o profilaxis para evitar alterar la microbiota subgingival. Se recuperarán los siguientes datos:

• Examen de la mucosa oral
• Índice de dientes cariados, perdidos y obturados (DMFT)
• Índice de placa de O'Leary
• Examen periodontal básico: profundidad de sondaje y pérdida de inserción clínica.
• Sialometría: se midió el flujo salival estimulado y no estimulado.
• pH salival Se utilizará saliva no estimulada para el análisis de citocinas. Las muestras se tomarán con puntas de papel estériles insertadas en el surco gingival de al menos tres dientes, preferiblemente del 16, 22, 41, 47 para análisis microbiano.

Se registrará el peso y la altura de los participantes y se calculará el índice de masa corporal (IMC) para permitir la clasificación de los participantes según su estado nutricional.

Al final de la visita, los pacientes recibirán su pasta de dientes asignada al azar y se les indicará que se cepillen los dientes tres veces al día y se abstengan de utilizar cualquier otro producto de higiene bucal. La segunda y última visita se programará después de 1 mes.

II. Segunda Visita (T1):

Se repetirá el procedimiento de la primera visita, recogiendo los mismos datos. Además, el paciente calificará la facilidad de uso, el sabor, la satisfacción, la aceptación, la preferencia y la recomendación de 0 a 10. En este momento, se realizará profilaxis oral y/o raspado radicular en los pacientes correspondientes.

Análisis de citoquinas Las muestras de saliva no estimulada se enviarán inmediatamente al laboratorio de microbiología del Hospital UB Bellvitge. Las muestras se centrifugarán (14000 rpm, 10 min, 4ºC) y los sobrenadantes se almacenarán a -80ºC hasta la determinación de las concentraciones de TNF-α, IL-1β e IL-4 mediante ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA). Se utilizarán kits comerciales (BioLegend ELISA MaxDeluxe Kit Human TNF, IL-1β e IL-4 y Human TNF, IL-1β e IL-4 Enhanced Sensitivity Flex test BD Cytometric Bead Array).

Análisis microbiológico Las puntas de papel impregnadas se colocarán en un criotubo de 2 ml y se enviarán inmediatamente al laboratorio de microbiología del Hospital UB Bellvitge, donde se congelarán a -80ºC para su posterior procesamiento mediante reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa (qPCR en tiempo real) utilizando el ensayo TaqMan. La carga bacteriana total, expresada como unidades logarítmicas (log) de unidades formadoras de colonias por ml (ufc/ml), se determinará amplificando el gen 16S rRNA utilizando cebadores procariotas universales.

Análisis estadístico El tamaño de la muestra se calculó utilizando un α=0,05, un ß=0,2 y un nivel de significancia de dos colas del 95%. Según los datos de un estudio piloto que prueba la misma composición, que mostró una reducción significativa en la carga de patógenos en el surco subgingival y la placa bacteriana después de 4 semanas de uso de la composición probada en pacientes sanos, se reclutarán doce pacientes por grupo.