Влияние на уровни цитокинов IL-1ß, IL-4, TNF-α и микробиоту полости рта композиции, содержащей оливковое масло, бетаин и ксилит, поставляемой в виде зубной пасты для ежедневного использования.

Целостность барьера играет ключевую роль в гомеостазе врожденной иммунной системы. Эти барьеры, их клетки и сети, будучи неповрежденными и населенными эубиотическим микробиомом, регулируют иммунитет и воспаление, поддерживая организм в состоянии гомеостаза и баланса с исходом здоровья.

Внешнее давление на слизистую оболочку и кожные барьеры со стороны посторонних веществ и условий окружающей среды обеспечивает изменяющуюся основу для экспрессии провоспалительных цитокинов, что приводит к тому, что сегодня известно как метаболическая инфекция и системное воспаление. Поддерживаемое давление может превысить механизмы контроля иммунной системы, что приведет к неконтролируемому высвобождению различных провоспалительных цитокинов, таких как IL-1β и TNF-α, что в дальнейшем будет способствовать разрушению барьера и состоянию иммунной дисрегуляции и воспалению. Напротив, IL-4 приписывают как противовоспалительные, так и провоспалительные свойства.

Воспаление пародонта, второй по частоте фактор системной воспалительной нагрузки после ожирения, является важным фактором, повышающим регуляцию провоспалительных цитокинов слюны, и предлагает практическую модель для решения сложных перекрестных помех между воспалением и хроническими воспалительными заболеваниями.

План исследования. Настоящее исследование будет рандомизированным контролируемым исследованием с участием пациентов с пародонтом легкой степени тяжести, запланированных для планового посещения Университета Барселоны (UB), Стоматологической больницы Университета Барселоны (HOUB), кампуса Беллвитге.

Рандомизация и маскирование Пациенты будут распределены случайным образом с помощью последовательности случайных распределений, созданной с использованием Microsoft Office Excel 2019 (Microsoft Corporation, Вашингтон, США, 2013). Распределение 1:1 будет использоваться для распределения участников либо в группу вмешательства (IG), либо в контрольную группу (CG).

Группа вмешательства будет использовать экспериментальную зубную пасту, содержащую новую композицию, включающую оливковое масло, бетаин и ксилит. Контрольная группа будет использовать зубную пасту плацебо. Вспомогательные вещества будут общими для обеих групп. Вся продукция будет упакована в белые тубы с этикеткой, на которой будет указано количество пациентов. Информация о продукте, выделенная каждому пациенту, будет помещена в запечатанный конверт, на котором будет указан исключительно номер пациента, чтобы обеспечить целостность процесса маскировки. И участники, и операторы будут замаскированы в соответствии с назначением.

Вмешательства Участники обеих групп будут посещать стоматологическую клинику в начале и в конце исследования. Во время первого посещения исходные данные будут восстановлены. Заключительный визит состоится через месяц для окончательного сбора данных.

I. Первое посещение (Т0):

Пациенты будут проинформированы о деталях исследования. Данные о поле и возрасте будут восстановлены из истории болезни. Во избежание изменения поддесневой микробиоты пародонтологическое лечение, гигиена или профилактика не проводятся. Будут восстановлены следующие данные:

• Осмотр слизистой оболочки полости рта
• Индекс разрушенных, отсутствующих и запломбированных зубов (DMFT)
• Индекс зубного налета О'Лири
• Базовое пародонтологическое обследование: глубина зондирования и потеря клинического прикрепления.
• Сиалометрия: измеряли нестимулированный и стимулированный слюноотделение.
• pH слюны. Для анализа цитокинов будет использоваться нестимулированная слюна. Для микробного анализа пробы будут брать стерильными бумажными штифтами, вставленными в десневую борозду как минимум трех зубов, предпочтительно 16, 22, 41, 47.

Будет записан вес и рост участника и рассчитан индекс массы тела (ИМТ), чтобы можно было классифицировать участников в соответствии с их статусом питания.

В конце визита пациенты получат случайно назначенную зубную пасту и будут проинструктированы чистить зубы три раза в день и воздерживаться от использования любых других средств гигиены полости рта. Второй и последний визит будет назначен через 1 месяц.

II. Второй визит (Т1):

Процедура первого посещения будет повторена, собрав те же данные. Кроме того, пациент оценит простоту использования, вкус, удовлетворенность, принятие, предпочтение и рекомендацию от 0 до 10. В это время у соответствующих пациентов будет проводиться профилактика полости рта и/или удаление зубного камня на корнях.

Цитокиновый анализ. Образцы нестимулированной слюны будут немедленно отправлены в микробиологическую лабораторию больницы UB Bellvitge. Образцы центрифугируют (14000 об/мин, 10 мин, 4°C), а супернатанты хранят при -80°C до определения концентраций TNF-α, IL-1β и IL-4 с помощью иммуноферментного анализа (ELISA). Будут использоваться коммерческие наборы (BioLegend ELISA MaxDeluxe Kit Human TNF, IL-1β e IL-4 и Human TNF, IL-1β e IL-4 Enhanced Sensitivity Flex test BD Cytometric Bead Array).

Микробиологический анализ. Пропитанные бумажные штифты будут помещены в криопробирку объемом 2 мл и немедленно отправлены в микробиологическую лабораторию больницы UB Bellvitge, где будут заморожены при -80°C для дальнейшей обработки с помощью количественной полимеразной цепной реакции (кПЦР в реальном времени) с использованием анализа TaqMan. Общая бактериальная нагрузка, выраженная в логарифмических единицах (log) колониеобразующих единиц на мл (КОЕ/мл), будет определяться путем амплификации гена 16S рРНК с использованием универсальных прокариотических праймеров.

Статистический анализ Размер выборки был рассчитан с использованием α = 0,05, β = 0,2 и двустороннего уровня значимости 95%. На основании данных пилотного исследования по тестированию той же композиции, которое показало значительное снижение патогенной нагрузки в поддесневой борозде и бактериальном налете после 4 недель применения тестируемой композиции у здоровых пациентов, в каждую группу будет набрано по двенадцать пациентов.