Effetti sui livelli di citochine IL-1ß, IL-4, TNF-α e sul microbiota orale di una composizione comprendente olio d'oliva, betaina e xilitolo somministrati come dentifricio quotidiano.

L’integrità della barriera svolge un ruolo fondamentale nell’omeostasi del sistema immunitario innato. Queste barriere, le loro cellule e reti, quando intatte e abitate da un microbioma eubiotico, regolano l’immunità e l’infiammazione, mantenendo il corpo in uno stato di omeostasi e in equilibrio con l’esito della salute.

La pressione esterna sulle mucose e sulle barriere cutanee da parte di sostanze estranee e circostanze ambientali, fornisce un terreno mutevole per l’espressione di citochine proinfiammatorie che portano a ciò che oggi è noto come infezione metabolica e infiammazione sistemica. La pressione mantenuta può superare i meccanismi di controllo del sistema immunitario, determinando un rilascio incontrollato di una varietà di citochine proinfiammatorie come IL-1ß e TNF-α, che contribuiranno ulteriormente alla rottura della barriera e a uno stato di disregolazione immunitaria e infiammazione. Al contrario, all’IL-4 sono state attribuite proprietà sia antinfiammatorie che proinfiammatorie.

L’infiammazione parodontale, il secondo fattore più frequente che contribuisce al carico infiammatorio sistemico dietro l’obesità, è un fattore importante che sovraregola le citochine proinfiammatorie salivari e offre un modello pratico per affrontare il complesso dialogo tra infiammazione e malattie infiammatorie croniche.

PROGETTAZIONE DELLO STUDIO Il presente studio sarà uno studio randomizzato e controllato su pazienti parodontali non lievi programmati per una visita di routine presso l'Università di Barcellona (UB), Dental Hospital Barcelona University (HOUB), Campus Bellvitge.

Randomizzazione e mascheramento I pazienti verranno assegnati in modo casuale mediante una sequenza di assegnazione casuale generata utilizzando Microsoft Office Excel 2019 (Microsoft Corporation, Washington, USA, 2013). Verrà utilizzata una distribuzione 1:1 per assegnare i partecipanti al gruppo di intervento (IG) o al gruppo di controllo (CG).

Il gruppo di intervento utilizzerà un dentifricio sperimentale contenente una nuova composizione comprendente olio d'oliva, betaina e xilitolo. Il gruppo di controllo utilizzerà un dentifricio placebo. Gli eccipienti saranno comuni ad entrambi i gruppi. Tutti i prodotti saranno confezionati in tubi bianchi con un'etichetta che identificherà il numero del paziente. Le informazioni sul prodotto assegnate a ciascun paziente verranno inserite in una busta sigillata, esibendo esclusivamente il numero di allocazione del paziente per mantenere l'integrità del processo di oscuramento. Sia i partecipanti che gli operatori saranno mascherati all'assegnazione.

Interventi I partecipanti di entrambi i gruppi saranno assistiti presso la clinica odontoiatrica all'inizio e alla fine dello studio. Durante la prima visita verranno recuperati i dati di base. La visita finale avrà luogo dopo un mese per la raccolta definitiva dei dati.

I. Prima Visita (T0):

I pazienti saranno informati sui dettagli dello studio. I dati relativi a sesso ed età verranno recuperati dall'anamnesi. Non verrà effettuato alcun trattamento parodontale, igiene o profilassi per evitare di alterare il microbiota sottogengivale. Verranno recuperati i seguenti dati:

• Esame della mucosa orale
• Indice dei denti cariati, mancanti e otturati (DMFT).
• Indice delle placche di O'Leary
• Esame parodontale di base: profondità di sondaggio e perdita di attacco clinico
• Sialometria: è stato misurato il flusso salivare non stimolato e stimolato.
• pH salivare La saliva non stimolata verrà utilizzata per l'analisi delle citochine. I campioni verranno prelevati con punte di carta sterili inserite nel solco gengivale di almeno tre denti, preferibilmente da 16, 22, 41, 47 per l'analisi microbica.

Verranno registrati il ​​peso e l'altezza del partecipante e verrà calcolato l'indice di massa corporea (BMI) per consentire la classificazione dei partecipanti in base al loro stato nutrizionale.

Al termine della visita, i pazienti riceveranno il dentifricio assegnato in modo randomizzato e verranno istruiti a lavarsi i denti tre volte al giorno e ad astenersi dall'utilizzare altri prodotti per l'igiene orale. La seconda ed ultima visita sarà fissata dopo 1 mese.

II. Seconda Visita (T1):

Verrà ripetuta la procedura della prima visita, raccogliendo gli stessi dati. Inoltre, il paziente valuterà la facilità d'uso, il sapore, la soddisfazione, l'accettazione, la preferenza e la raccomandazione da 0 a 10. In questo momento, la profilassi orale e/o il ridimensionamento delle radici verranno eseguiti nei pazienti necessari.

Analisi delle citochine I campioni di saliva non stimolata verranno inviati immediatamente al laboratorio di microbiologia dell'UB Bellvitge Hospital. I campioni verranno centrifugati (14000 giri al minuto, 10 minuti, 4ºC) e i surnatanti verranno conservati a -80ºC fino alla determinazione delle concentrazioni di TNF-α, IL-1β e IL-4 mediante saggio immunoassorbente enzimatico (ELISA). Verranno utilizzati kit commerciali (BioLegend ELISA MaxDeluxe Kit Human TNF, IL-1β e IL-4 e Human TNF, IL-1β e IL-4 Enhanced Sensitivity Flex test BD Cytometric Bead Array).

Analisi microbiologica I punti di carta impregnati verranno posti in una crioprovetta da 2 ml e inviati immediatamente al laboratorio di microbiologia dell'ospedale UB Bellvitge, dove saranno congelati a -80ºC per ulteriore elaborazione mediante reazione a catena della polimerasi quantitativa (qPCR in tempo reale) utilizzando il saggio TaqMan. La carica batterica totale, espressa come unità logaritmiche (log) di unità formanti colonie per mL (cfu/ml), sarà determinata amplificando il gene 16S rRNA utilizzando primer procariotici universali.

Analisi statistica La dimensione del campione è stata calcolata utilizzando α=0,05, ß=0,2 e un livello di significatività a due code del 95%. Sulla base dei dati di uno studio pilota che ha testato la stessa composizione, che ha mostrato una significativa riduzione della carica patogena nel solco sottogengivale e nella placca batterica dopo 4 settimane di utilizzo della composizione testata in pazienti sani, verranno reclutati dodici pazienti per gruppo.