水浸皱纹测试对小纤维神经病变的诊断准确性 (WIWT-SFN)

这是一项前瞻性、单中心、观察性诊断准确性研究，旨在评估水浸皱纹试验（WIWT）在神经肌肉科评估的成人中识别小纤维神经病（SFN）的性能。 复合参考标准是符合SFN的专科临床评估，并至少有一项经过验证的临床量表（犹他早期神经病量表[UENS]或改良多伦多临床神经病评分[mTCNS]）异常。 定量感觉测试（QST）和交感皮肤反应（SSR）作为比较测试获取，但不构成参考标准的一部分。 该研究遵循STARD诊断准确性研究原则，并使用预定义的操作程序进行测试执行、数据捕获和分析。

研究设置和工作流程 参与者在三级医院的神经肌肉门诊进行评估。 该研究采用仅基线设计：所有指标测试和比较测试尽可能在同一天完成。 单独的图像评分可靠性评估在48小时至7天后进行，无需患者额外就诊。 整体工作流程为：(1) 确认资格并获取同意；(2) 完成标准化神经系统检查和临床量表；(3) 执行或验证QST和SSR（无论结果如何）；(4) 执行WIWT；(5) 获取标准化指尖照片；(6) 由经过培训的评分员独立评分图像；(7) 数据录入和验证；(8) 根据预先指定的计划进行统计分析。

参考标准（复合） 参考标准整合了治疗神经肌肉专家的判断（病史和检查）与至少一项UENS或mTCNS的异常临床量表，使用其已发布的评分规则。 量表由其手册规定，由经过测试说明和评分规范培训的人员执行。 参考标准分类（SFN与非SFN）记录在专门的裁决表中。 WIWT、QST和SSR的测试操作员在测试时无法访问参考分类。

指标测试：WIWT-技术执行 参与者保持坐姿。 双手浸入水中至少至远端指间皱褶处，持续15分钟。 浸入前，确认皮肤清洁且完全干燥。 手部保持放松（手指中立姿势），指尖不得按压容器表面。 由于没有恒温浴缸，浸入起始温度为43-44°C，预期被动冷却约每5分钟2°C，目标结束温度约37-38°C。 使用服务温度计在0、5、10和15分钟测量水温，以确认预期范围。 浸入期间不添加或更换水。 使用校准秒表计时程序。 完成后，轻轻拍干手部，并获取双手第2-5指掌侧远端指骨的标准化照片。 环境条件保持稳定（室内房间，典型环境温度，间接照明），并记录在源表中。

图像采集和标准化 使用诊所的数字相机或智能手机按照固定模板拍摄照片：(a) 距离指尖约20-25厘米；(b) 相机垂直于掌侧面对齐，以最小化视差；(c) 中性、漫射照明，避免硬阴影；(d) 在画面中包含1厘米比例标记；(e) 锁定焦点在每个指尖的远端垫上。 原始图像立即检查是否有运动模糊或构图错误，必要时在参与者离开前重复拍摄。 图像存储为高分辨率JPEG或HEIC（≥8 MP），传输到安全的机构驱动器，并按确定性约定自动重命名（StudyID_手_侧_指_时间点.扩展名）。 文件名或图像内容中不出现患者标识符。

评分标准和评分员培训 由经过培训的评分员对每只手第2-5指的皱纹进行0-4级序数评分，评分员不参与临床参考评估，且对QST/SSR结果相互设盲。 评分员使用带共识标签的精选示例照片集完成简短培训，然后进行校准练习（≥20张图像），并接受反馈，直至达到预定义的协议阈值。 对于每位参与者，计算每手总和并得出双侧总和评分；双侧分类阈值使用预先指定的规则（异常＜24；正常≥24）。 对于可靠性子研究，四名评分员独立对所有图像评分两次，间隔48小时至7天，第二次会话以随机顺序呈现以减少回忆。 第二次会话使用的图像集与第一次相同，不包含新照片。

比较测试（QST和SSR） QST包括使用诊所标准设备按照制造商说明和本地实验室SOP测量的热检测阈值和振动阈值，设备每日检查记录在日志中。 SSR从掌侧电极记录，使用标准滤波器设置和扫描参数；根据实验室约定提取振幅和潜伏期。 QST和SSR的操作员独立于WIWT团队，且无法访问WIWT照片或评分。

偏倚缓解和设盲 为限制回顾和纳入偏倚，参考标准预先定义，不包括WIWT、QST或SSR结果。 WIWT检查员对参考分类和QST/SSR读数设盲；QST和SSR操作员相互设盲且对WIWT设盲；图像评分员仅接收去除元数据的编码图像集。 WIWT与QST/SSR的顺序不固定，并记录以探索潜在顺序效应。 所有分析代码和决策规则（用于排除、平局处理和异常值管理）均预先指定。

数据收集和管理 数据在纸质病例报告表（CRF）上捕获，并转录到机构服务器上托管的类似REDCap的电子数据库中，具有用户认证、基于角色的访问和完整审计跟踪。 主要变量（参考分类、WIWT总和评分、UENS/mTCNS总分）应用双数据录入；差异由第三方评审员使用源文件解决。 自动数据验证规则检查范围（例如，0/5/10/15分钟的温度值，测试时长=15±1分钟，每指评分范围0-4）、内部一致性（例如，双侧总和等于组成手指的总和）和逻辑约束（例如，不缺失“起始温度”和“结束温度”两者）。 数据字典定义变量名称、格式、允许代码、推导和编辑检查。 版本控制在数据库级别处理；数据库锁定后的所有更改需要变更控制批准并生成审计条目。

样本量依据 计划样本量约为30名参与者，选择在预期病例组合下，为敏感性和特异性估计提供可接受的精度（例如，敏感性约0.80，特异性约0.70），双侧95%置信区间约±0.10。 最终样本量还考虑了可靠性子研究，确保图像和评分员数量在预期方差分量下为组内相关系数（ICC）提供足够的精度，置信区间宽度≤0.15。

统计分析概述 分析预先指定。 对于主要诊断准确性分析，WIWT与复合参考标准进行比较。 在预先指定的双侧总和阈值处报告敏感性、特异性及其精确或95%置信区间。 ROC分析将双侧总和WIWT评分视为连续预测因子；AUC和95% CI使用非参数方法计算。 在观察到的患病率下报告阳性和阴性预测值。 双侧总和评分的评分者间可靠性使用双向随机效应、绝对一致性ICC [ICC(2,1)]，评分者内可靠性使用双向混合效应ICC [ICC(3,1)]，95%置信区间从ANOVA方差分量推导；次要可靠性指标（每指序数评分的加权kappa）可描述性报告。 预先指定的敏感性分析包括：(a) 排除方案偏离的WIWT运行（温度/时间偏差）；(b) 替代温度窗口定义；(c) 探索性描述替代分类切点，不重新定义主要分析。 主要目标不需要进行测试间差异的假设检验；如果执行，AUC比较将使用DeLong方法。

数据治理、保密和归档 所有研究数据在存储时去标识化；将StudyID映射到个人标识符的链接文件存储在单独的受限目录中，仅临床团队可访问。 照片不包含面部或指尖皮肤以外的独特标记；尽可能移除戒指和指甲油。 数据保留期限符合机构政策和本地法规要求。 最终分析数据集和代码的访问权限仅限于分析团队；发表后对去标识化数据的请求遵循记录中其他地方输入的数据共享声明。

风险评估和安全报告 WIWT、QST和SSR是非侵入性程序，风险最小（主要是短暂不适或皮肤浸渍）。 与测试相关的不良事件预计罕见且轻微；与测试执行时间相关的任何意外事件记录在源表中，并按机构政策报告。 鉴于其最小风险、非干预性设计，该研究不使用正式的数据监测委员会。

研究时间表 招募正在进行中。 基线测试和图像采集在入组当天进行；可靠性评分在48小时至7天内进行。 数据库锁定计划在预期主要完成日期后不久进行。 记录将在达到主要里程碑（例如，入组目标、完成日期或分析计划的变更）时更新。