基因编辑猪肝脏在严重肝衰竭患者中的离体灌注

这是一项单中心、前瞻性、开放标签的临床试验，旨在招募一名严重肝衰竭患者，评估使用基因编辑猪肝脏进行体外灌注作为肝移植桥接治疗的安全性和有效性。

背景与原理：

严重肝衰竭短期死亡率极高，而人类供体肝脏的稀缺限制了治疗选择。使用基因工程改造猪进行异种移植是解决器官短缺的一个有前景的方案。本研究基于猪到非人灵长类肝脏异种移植的临床前成功经验，以及近期在脑死亡人类受试者中进行的亚临床试验。通过采用体外灌注方法，本研究最大限度地减少了对患者的手术创伤，同时能够评估异种肝脏的功能和相容性。

研究人群：

本研究将招募一名符合《肝衰竭诊疗指南（2024年版）》诊断标准的严重肝衰竭成年患者（年龄18-70岁）。符合条件的参与者必须患有II级或以上肝性脑病，且预测预后不良，短期死亡率高（28天死亡率≥15%）。由三名专家组成的第三方独立委员会将评估自然死亡率预期以选择合适的候选人。主要排除标准包括免疫功能不全（如HIV感染）、既往接受过同种异体移植，或无法耐受手术创伤。

干预措施：

干预措施包括将患者连接到一个包含六基因编辑巴马小型猪（由四川中科奥格生物科技有限公司提供）肝脏的体外灌注回路。猪肝脏的获取采用标准技术，包括低温灌注（Schüssner's溶液和高渗枸橼酸嘌呤溶液），并在严格的冷藏条件下（1-6°C）运输。

手术程序：

在局部麻醉下，通过一条颈内静脉和一条股静脉建立血管通路。将患者连接到灌注平台，并将保存的基因编辑猪肝脏整合到体外循环回路中。

免疫抑制与抗炎方案：

参与者将接受包含以下药物的多药免疫抑制方案：

术前利妥昔单抗（375 mg/m²）兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白（ATG，1-1.5 mg/kg/天，持续2-3天）他克莫司（目标谷浓度15-25 ng/mL）霉酚酸酯（1 g，每日两次）依那西普（抗TNF-α，25 mg，每周两次）甲泼尼龙（大剂量递减方案）依库珠单抗（900 mg，灌注前24小时给药）用于补体抑制

抗凝与支持治疗：

将给予肝素钠以维持APTT为正常值的1.5-2.5倍，ACT为200-300秒。将提供更昔洛韦用于巨细胞病毒预防。将根据临床指南提供肝衰竭的标准支持治疗，包括抗感染治疗、保肝措施和营养支持。

主要目标：

观察严重肝衰竭患者在基因编辑猪肝脏体外灌注后，生命体征、生理参数、生化指标、凝血功能、炎症反应和免疫相关标志物的变化评估该程序是否能显著改善肝功能，并作为一种有效的肝移植桥接治疗

次要目标：

通过每隔一天监测胆汁分泌（量和颜色）、门静脉/肝动脉/肝静脉血流以及活检标本的组织病理学检查，评估猪肝脏的存活和功能活性探索围手术期管理策略，并优化体外肝脏灌注治疗方案通过每日监测猪内源性逆转录病毒（PERV）和猪巨细胞病毒评估跨物种传播风险，以评估生物安全性

结局指标：

主要指标：肝功能参数（胆红素、INR、肝性脑病分级）、凝血功能和炎症标志物的改善；成功桥接到人类肝移植或临床康复次要指标：移植物存活时间、胆汁生成质量、超声血管通畅性、排斥反应的组织学证据（ISHLT分级）、不良事件发生率以及病毒安全性参数

研究持续时间与随访：

研究期为2025年10月至2026年12月。体外灌注将持续到发生以下情况之一：（1）成功桥接到同种异体肝移植，（2）临床康复允许停止支持，（3）移植物功能衰竭，（4）参与者死亡，或（5）达到最长14天的持续时间。如果初始移植物失败，可能会使用第二个基因编辑猪肝脏继续进行灌注。

安全性监测：

全面的安全性监测包括每小时的生命体征、每日的实验室评估（全血细胞计数、肝/肾功能、凝血功能、他克莫司水平）、每日的腹部超声检查以及严格的不良事件记录。独立伦理委员会监督本研究，参与者（或家属）可在手术前或手术期间随时撤回同意。

统计分析：

作为一项单参与者研究，数据将进行描述性分析。连续变量将以均值±标准差表示，并纵向记录相对于基线的变化。