Ex Vivo Perfusie van Gen-bewerkte Varkenslevers bij Patiënten met Ernstig Leverfalen

Dit is een single-center, prospectieve, open-label klinische studie die is ontworpen om één patiënt met ernstig leverfalen te includeren om de veiligheid en werkzaamheid te evalueren van extracorporale perfusie met behulp van een genetisch gemodificeerde varkenslever als een brug-naar-transplantatietherapie.

Achtergrond en Rationale:

Ernstig leverfalen heeft een extreem hoge kortetermijnsterfte, en de schaarste aan humane donorlevers beperkt de behandelingsopties. Xenotransplantatie met behulp van genetisch gemodificeerde varkens vertegenwoordigt een veelbelovende oplossing voor het orgaantekort. Deze studie bouwt voort op preklinisch succes in varkens-naar-niet-humane primaat leverxenotransplantatie en recente subklinische studies bij hersendode humane ontvangers. Door gebruik te maken van een extracorporale (ex vivo) perfusiebenadering minimaliseert de studie het chirurgisch trauma voor de patiënt terwijl het de beoordeling van xenogene leverfunctie en compatibiliteit mogelijk maakt.

Studiepopulatie:

De studie zal één volwassen patiënt (leeftijd 18-70 jaar) met ernstig leverfalen includeren die voldoet aan de diagnostische criteria van de "Richtlijnen voor Diagnose en Behandeling van Leverfalen (2024 editie)". In aanmerking komende deelnemers moeten graad II of hoger hepatische encefalopathie hebben en een voorspelde slechte prognose met hoge kortetermijnsterfte (28-dagen sterfte ≥15%). Een onafhankelijke commissie van drie deskundigen zal de verwachtingen van natuurlijke sterfte beoordelen om geschikte kandidaten te selecteren. Belangrijke uitsluitingscriteria zijn immuundisfunctie (bijv. HIV), eerdere allogene transplantatie, of onvermogen om chirurgisch trauma te tolereren.

Interventie:

De interventie omvat het aansluiten van de patiënt op een extracorporaal perfusiecircuit dat een lever bevat van een zes-gen-gemodificeerd Bama-miniatuurvarken (geleverd door Sichuan Zhongke Aoge Biotechnology Co., Ltd.). De varkenslever wordt verkregen met standaardtechnieken met hypotherme perfusie (Schüssner's oplossing en hypertone citraat-purine oplossing) en getransporteerd onder strikte koude opslagomstandigheden (1-6°C).

Chirurgische Procedure:

Onder lokale anesthesie wordt vasculaire toegang tot stand gebracht via één vena jugularis interna en één vena femoralis. De patiënt wordt aangesloten op het perfusieplatform, en de bewaarde genetisch gemodificeerde varkenslever wordt geïntegreerd in het extracorporale circuit.

Immunosuppressie en Ontstekingsremmend Regime:

Deelnemers zullen een multidrug immunosuppressief protocol ontvangen inclusief:

Rituximab (375 mg/m²) pre-operatief Konijn anti-humaan thymocyten immunoglobuline (ATG, 1-1,5 mg/kg/dag gedurende 2-3 dagen) Tacrolimus (doelspiegel 15-25 ng/mL) Mycophenolaat mofetil (1 g tweemaal daags) Etanercept (anti-TNF-α, 25 mg tweemaal per week) Methylprednisolon (hooggedoseerd afbouwend regime) Eculizumab (900 mg, 24 uur pre-perfusie) voor complementremming

Anticoagulatie en Ondersteunende Zorg:

Heparine natrium zal worden toegediend om APTT op 1,5-2,5 keer normaal en ACT op 200-300 seconden te houden. Ganciclovir zal worden verstrekt voor cytomegalovirusprofylaxe. Standaard ondersteunende zorg voor leverfalen, inclusief anti-infectietherapie, leverbeschermende maatregelen en voedingsondersteuning, zal worden verleend volgens klinische richtlijnen.

Primaire Doelstellingen:

Het observeren van veranderingen in vitale functies, fysiologische parameters, biochemische indicatoren, stollingsfunctie, inflammatoire responsen en immuungerelateerde markers bij patiënten met ernstig leverfalen na extracorporale perfusie van genetisch gemodificeerde varkenslever Het evalueren of de procedure de leverfunctie significant kan verbeteren en kan dienen als een effectieve brug-naar-transplantatietherapie

Secundaire Doelstellingen:

Het evalueren van de overleving en functionele levensvatbaarheid van de varkenslever door monitoring van galsecretie (volume en kleur), bloedstroom in vena portae/arteria hepatica/vena hepatica, en histopathologisch onderzoek van biopsiemonsters om de dag Het verkennen van perioperatieve managementstrategieën en het optimaliseren van het behandelprotocol voor extracorporale leverperfusie Het beoordelen van de biologische veiligheid door dagelijkse monitoring van porcien endogeen retrovirus (PERV) en porcien cytomegalovirus om kruis-soort transmissierisico's te evalueren

Uitkomstmaten:

Primair: Verbetering in leverfunctieparameters (bilirubine, INR, hepatische encefalopathie graad), stollingsfunctie en ontstekingsmarkers; succesvolle overbrugging naar humane levertransplantatie of klinisch herstel Secundair: Overlevingstijd van het transplantaat, kwaliteit van galproductie, vasculaire doorgankelijkheid op echografie, histologisch bewijs van afstoting (ISHLT-gradering), incidentie van bijwerkingen en virale veiligheidsparameters

Studieduur en Follow-up:

De studieduur is van oktober 2025 tot december 2026. Extracorporale perfusie zal doorgaan totdat een van de volgende zich voordoet: (1) succesvolle overbrugging naar allogene levertransplantatie, (2) klinisch herstel waardoor ondersteuning kan worden gestaakt, (3) falen van het transplantaat, (4) overlijden van de deelnemer, of (5) maximale duur van 14 dagen. Als het initiële transplantaat faalt, kan een tweede genetisch gemodificeerde varkenslever worden gebruikt voor voortgezette perfusie.

Veiligheidsmonitoring:

Uitgebreide veiligheidsmonitoring omvat uurlijkse vitale functies, dagelijkse laboratoriumbeoordelingen (CBC, lever-/nierfunctie, stolling, tacrolimus spiegels), dagelijkse abdominale echografie en rigoureuze documentatie van bijwerkingen. Een onafhankelijke ethische commissie houdt toezicht op de studie, en deelnemers (of familieleden) kunnen op elk moment voor of tijdens de procedure toestemming intrekken.

Statistische Analyse:

Als een studie met één deelnemer zullen de data beschrijvend worden geanalyseerd. Continue variabelen zullen worden uitgedrukt als gemiddelde ± standaarddeviatie, met veranderingen ten opzichte van de baseline longitudinaal gedocumenteerd.