Perfuzja Ex Vivo Genetycznie Edytowanych Wątrob Świńskich u Pacjentów z Ciężką Niewydolnością Wątroby

To jest jednoośrodkowe, prospektywne, otwarte badanie kliniczne zaprojektowane do włączenia jednego pacjenta z ciężką niewydolnością wątroby w celu oceny bezpieczeństwa i skuteczności pozaustrojowej perfuzji z użyciem genetycznie zmodyfikowanej wątroby świni jako terapii pomostowej do przeszczepu.

Tło i uzasadnienie:

Ciężka niewydolność wątroby wiąże się z niezwykle wysoką śmiertelnością krótkoterminową, a niedobór ludzkich wątrob od dawców ogranicza opcje leczenia. Ksenotransplantacja z użyciem genetycznie zmodyfikowanych świń stanowi obiecujące rozwiązanie problemu niedoboru narządów. Niniejsze badanie opiera się na przedklinicznych sukcesach w ksenotransplantacji wątroby od świni do naczelnych innych niż ludzie oraz na niedawnych podklinicznych badaniach u ludzkich biorców ze śmiercią mózgową. Stosując podejście pozaustrojowej (ex vivo) perfuzji, badanie minimalizuje uraz chirurgiczny u pacjenta, jednocześnie umożliwiając ocenę funkcji i kompatybilności ksenogenicznej wątroby.

Populacja badana:

Badanie zrekrutuje jednego dorosłego pacjenta (w wieku 18-70 lat) z ciężką niewydolnością wątroby spełniającego kryteria diagnostyczne „Wytycznych dotyczących rozpoznania i leczenia niewydolności wątroby (wydanie 2024)”. Kwalifikujący się uczestnicy muszą mieć encefalopatię wątrobową stopnia II lub wyższego oraz przewidywane złe rokowanie z wysoką śmiertelnością krótkoterminową (28-dniowa śmiertelność ≥15%). Niezależny komitet zewnętrzny złożony z trzech ekspertów oceni oczekiwania dotyczące naturalnej śmiertelności w celu wyboru odpowiednich kandydatów. Kluczowe kryteria wykluczające obejmują dysfunkcję immunologiczną (np. HIV), wcześniejszy allogeniczny przeszczep lub niemożność tolerancji urazu chirurgicznego.

Interwencja:

Interwencja polega na podłączeniu pacjenta do obwodu pozaustrojowej perfuzji zawierającego wątrobę od świni miniaturowej rasy Bama z edytowanymi sześcioma genami (dostarczoną przez Sichuan Zhongke Aoge Biotechnology Co., Ltd.). Wątroba świni jest pozyskiwana przy użyciu standardowych technik z hipotermiczną perfuzją (roztwór Schüssnera i hipertoniczny roztwór cytrynianowo-purynowy) i transportowana w ścisłych warunkach przechowywania w chłodzie (1-6°C).

Procedura chirurgiczna:

W znieczuleniu miejscowym dostęp naczyniowy jest uzyskiwany przez jedną żyłę szyjną wewnętrzną i jedną żyłę udową. Pacjent jest podłączany do platformy perfuzyjnej, a zakonserwowana genetycznie zmodyfikowana wątroba świni jest zintegrowana z obwodem pozaustrojowym.

Schemat immunosupresji i leczenia przeciwzapalnego:

Uczestnicy otrzymają wielolekowy protokół immunosupresyjny obejmujący:

Rytuksymab (375 mg/m²) przedoperacyjnie Immunoglobulina antytymusowa królicza (ATG, 1-1,5 mg/kg/dzień przez 2-3 dni) Takrolimus (docelowy poziom minimalny 15-25 ng/mL) Mykofenolan mofetylu (1 g dwa razy dziennie) Etanercept (przeciw TNF-α, 25 mg dwa razy w tygodniu) Metyloprednizolon (schemat ze stopniowym zmniejszaniem wysokiej dawki) Ekulizumab (900 mg, 24 godziny przed perfuzją) do inhibicji dopełniacza

Przeciwkrzepliwość i opieka wspomagająca:

Heparyna sodowa będzie podawana w celu utrzymania APTT na poziomie 1,5-2,5-krotności normy i ACT w zakresie 200-300 sekund. Gancyklowir będzie zapewniany w celu profilaktyki zakażenia cytomegalowirusem. Standardowa opieka wspomagająca w niewydolności wątroby, w tym terapia przeciwzakaźna, środki hepatoprotekcyjne i wsparcie żywieniowe, będzie zapewniana zgodnie z wytycznymi klinicznymi.

Główne cele:

Obserwacja zmian w parametrach życiowych, parametrach fizjologicznych, wskaźnikach biochemicznych, funkcji krzepnięcia, odpowiedziach zapalnych i markerach związanych z układem odpornościowym u pacjentów z ciężką niewydolnością wątroby po pozaustrojowej perfuzji genetycznie zmodyfikowanej wątroby świni Ocena, czy procedura może znacząco poprawić funkcję wątroby i służyć jako skuteczna terapia pomostowa do przeszczepu

Cele drugorzędne:

Ocena przeżycia i funkcjonalnej żywotności wątroby świni poprzez monitorowanie wydzielania żółci (objętość i kolor), przepływu krwi w żyle wrotnej/tętnicy wątrobowej/żyle wątrobowej oraz badanie histopatologiczne próbek biopsyjnych co drugi dzień Eksploracja strategii zarządzania okołooperacyjnego i optymalizacja protokołu leczenia pozaustrojowej perfuzji wątroby Ocena bezpieczeństwa biologicznego poprzez codzienne monitorowanie świńskiego endogennego retrowirusa (PERV) i świńskiego cytomegalowirusa w celu oceny ryzyka transmisji międzygatunkowej

Miary wyników:

Główne: Poprawa parametrów funkcji wątroby (bilirubina, INR, stopień encefalopatii wątrobowej), funkcji krzepnięcia i markerów zapalnych; udane pomostowanie do przeszczepu ludzkiej wątroby lub powrót do zdrowia klinicznego Drugorzędne: Czas przeżycia przeszczepu, jakość produkcji żółci, drożność naczyń w badaniu USG, histologiczne dowody odrzucenia (stopniowanie ISHLT), częstość zdarzeń niepożądanych i parametry bezpieczeństwa wirusowego

Czas trwania badania i obserwacja:

Okres badania trwa od października 2025 do grudnia 2026. Pozaustrojowa perfuzja będzie kontynuowana do momentu wystąpienia jednego z następujących zdarzeń: (1) udane pomostowanie do allogenicznego przeszczepu wątroby, (2) powrót do zdrowia klinicznego umożliwiający zaprzestanie wsparcia, (3) niewydolność przeszczepu, (4) śmierć uczestnika lub (5) maksymalny czas trwania 14 dni. Jeśli początkowy przeszczep zawiedzie, druga genetycznie zmodyfikowana wątroba świni może zostać użyta do kontynuacji perfuzji.

Monitorowanie bezpieczeństwa:

Kompleksowe monitorowanie bezpieczeństwa obejmuje godzinowe pomiary parametrów życiowych, codzienne oceny laboratoryjne (morfologia, funkcja wątroby/nerek, krzepnięcie, poziomy takrolimusu), codzienne USG jamy brzusznej i rygorystyczną dokumentację zdarzeń niepożądanych. Niezależny komitet etyczny nadzoruje badanie, a uczestnicy (lub członkowie rodziny) mogą wycofać zgodę w dowolnym momencie przed lub podczas procedury.

Analiza statystyczna:

Jako badanie z jednym uczestnikiem, dane będą analizowane opisowo. Zmienne ciągłe będą wyrażane jako średnia ± odchylenie standardowe, ze zmianami od wartości wyjściowych dokumentowanymi w sposób podłużny.