Ex Vivo Perfusion av Genredigerade Grislevers hos Patienter med Svår Leverinsufficiens

Detta är en encentrerad, prospektiv, öppen klinisk studie utformad för att rekrytera en patient med svår leversvikt för att utvärdera säkerheten och effektiviteten av extrakorporal perfusion med en geredigerad grislever som en övergångsterapi inför transplantation.

Bakgrund och motivering:

Svår leversvikt har extremt hög korttidsmortalitet, och bristen på mänskliga donorlevers begränsar behandlingsalternativen. Xenotransplantation med genetiskt modifierade grisar representerar ett lovande lösningsalternativ på organsbrist. Denna studie bygger på framgångar i prekliniska försök med gris-till-icke-mänsklig primat levertransplantation och på senare subkliniska försök på hjärndöda mottagare. Genom att använda en extrakorporal (ex vivo) perfusionsmetod minimerar studien kirurgisk trauma för patienten samtidigt som den möjliggör bedömning av den xenogena leverfunktionen och kompatibiliteten.

Studiepopulation:

Studien kommer att rekrytera en vuxen patient (ålder 18–70 år) med svår leversvikt som uppfyller diagnoskriterierna i "Riktlinjer för diagnostik och behandling av leversvikt (2024 års utgåva)". Berättigade deltagare måste ha grad II eller högre hepatisk encefalopati och en förväntad dålig prognos med hög korttidsmortalitet (28-dagars mortalitet ≥15%). En oberoende kommitté med tre experter kommer att bedöma förväntningar om naturlig mortalitet för att välja lämpliga kandidater. Viktiga exklusionskriterier inkluderar immunfunktionsstörning (t.ex. HIV), tidigare allogen transplantation eller oförmåga att tolerera kirurgiskt trauma.

Intervention:

Interventionen innebär att patienten kopplas till en extrakorporal perfusionskrets som innehåller en lever från en sex-gen-gereddigerad Bama-miniatyrgris (tillhandahållen av Sichuan Zhongke Aoge Biotechnology Co., Ltd.). Grislevern tas ut med standardtekniker med hypoterm perfusion (Schüssner-lösning och hyperton citrat-purinolösning) och transporteras under strikta kylförhållanden (1–6°C).

Kirurgisk procedur:

Under lokalbedövning etableras vaskulär åtkomst via en vena jugularis interna och en vena femoralis. Patienten kopplas till perfusionsplattformen, och den konserverade geredigerade grislevern integreras i den extrakorporala kretsen.

Immunsuppression och antiinflammatoriskt schema:

Deltagare kommer att få ett multilekemedels-immunsuppressivt protokoll som inkluderar:

Rituximab (375 mg/m²) preoperativt Kanin-antihuman tymocytimmunoglobulin (ATG, 1–1,5 mg/kg/dag i 2–3 dagar) Tacrolimus (måltråg 15–25 ng/mL) Mycophenolat mofetil (1 g två gånger dagligen) Etanercept (anti-TNF-α, 25 mg två gånger i veckan) Methylprednisolon (högdosavtrappningsschema) Eculizumab (900 mg, 24 timmar före perfusion) för komplementhämmning

Antikoagulation och stödjande vård:

Heparin natrium kommer att administreras för att upprätthålla APTT vid 1,5–2,5 gånger normal och ACT vid 200–300 sekunder. Ganciclovir kommer att ges för cytomegalovirusprofylax. Standard stödjande vård för leversvikt, inklusive antiinfektionsterapi, leverskyddande åtgärder och nutritionsstöd, kommer att tillhandahållas enligt kliniska riktlinjer.

Primära mål:

Att observera förändringar i vitala tecken, fysiologiska parametrar, biokemiska indikatorer, koagulationsfunktion, inflammatoriska responser och immunrelaterade markörer hos patienter med svår leversvikt efter extrakorporal perfusion av geredigerad grislever Att utvärdera om proceduren kan förbättra leverfunktionen signifikant och fungera som en effektiv övergångsterapi inför transplantation

Sekundära mål:

Att utvärdera överlevnad och funktionell livskraft hos grislevern genom övervakning av gallesekretion (volym och färg), blodflöde i portaven/hepatiska artären/hepatiska venen och histopatologisk undersökning av biopsiprov varannan dag Att utforska perioperativa hanteringsstrategier och optimera behandlingsprotokollet för extrakorporal leverperfusion Att bedöma biosäkerhet genom daglig övervakning av porcint endogent retrovirus (PERV) och porcint cytomegalovirus för att utvärdera risker för tvärartsöverföring

Utfallsmått:

Primärt: Förbättring av leverfunktionsparametrar (bilirubin, INR, hepatisk encefalopatigrad), koagulationsfunktion och inflammatoriska markörer; framgångsrik övergång till mänsklig levertransplantation eller klinisk återhämtning Sekundärt: Transplantatöverlevnadstid, gallproduktionskvalitet, vaskulär patens vid ultraljud, histologiska tecken på avstötning (ISHLT-gradering), förekomst av biverkningar och virussäkerhetsparametrar

Studielängd och uppföljning:

Studieperioden är från oktober 2025 till december 2026. Extrakorporal perfusion kommer att fortsätta tills något av följande inträffar: (1) framgångsrik övergång till allogen levertransplantation, (2) klinisk återhämtning som tillåter avslut av stöd, (3) transplantatfel, (4) deltagardöd, eller (5) maximal varaktighet på 14 dagar. Om det initiala transplantatet misslyckas kan en andra geredigerad grislever användas för fortsatt perfusion.

Säkerhetsövervakning:

Omfattande säkerhetsövervakning inkluderar timliga vitala tecken, dagliga laboratoriebedömningar (CBC, lever-/njurfunktion, koagulation, tacrolimusnivåer), daglig bukultraljud och rigorös dokumentation av biverkningar. En oberoende etikkommitté övervakar studien, och deltagare (eller familjemedlemmar) kan återkalla samtycket när som helst före eller under proceduren.

Statistisk analys:

Som en en-deltagarstudie kommer data att analyseras deskriptivt. Kontinuerliga variabler kommer att uttryckas som medelvärde ± standardavvikelse, med förändringar från baslinje dokumenterade longitudinellt.