Ex Vivo Perfuze Genově Upravených Prasečích Jater u Pacientů s Těžkým Selháním Jater

Toto je jednocentrová, prospektivní, otevřená klinická studie navržená pro zařazení jednoho pacienta se závažným selháním jater, která má vyhodnotit bezpečnost a účinnost mimotělní perfuze s použitím geneticky upraveného prasečího jater jako terapie přemosťující k transplantaci.

Pozadí a odůvodnění:

Závažné selhání jater má extrémně vysokou krátkodobou mortalitu a nedostatek lidských dárcovských jater omezuje možnosti léčby. Xenotransplantace s použitím geneticky modifikovaných prasat představuje slibné řešení nedostatku orgánů. Tato studie navazuje na předklinické úspěchy v xenotransplantaci jater z prasete na primáty a na nedávné subklinické studie u mozkově mrtvých lidských příjemců. Použitím mimotělního (ex vivo) perfuzního přístupu studie minimalizuje chirurgické trauma pacienta a zároveň umožňuje posouzení funkce a kompatibility xenogenního jater.

Studijní populace:

Studie bude rekrutovat jednoho dospělého pacienta (věk 18–70 let) se závažným selháním jater splňujícím diagnostická kritéria „Směrnic pro diagnostiku a léčbu jaterního selhání (vydání 2024)“. Vhodní účastníci musí mít jaterní encefalopatii stupně II nebo vyšší a předpokládanou špatnou prognózu s vysokou krátkodobou mortalitou (28denní mortalita ≥15 %). Nezávislý výbor tří expertů bude posuzovat očekávanou přirozenou mortalitu, aby vybral vhodné kandidáty. Klíčová vylučovací kritéria zahrnují imunitní dysfunkci (např. HIV), předchozí alogenní transplantaci nebo neschopnost snášet chirurgické trauma.

Intervence:

Intervence spočívá v připojení pacienta k mimotělnímu perfuznímu okruhu obsahujícímu játra ze šestigenově upraveného miniaturního prasete Bama (poskytnutého společností Sichuan Zhongke Aoge Biotechnology Co., Ltd.). Prasečí játra jsou získávána standardními technikami s hypotermickou perfuzí (Schüssnerův roztok a hypertonický citrát-purinový roztok) a transportována za přísných podmínek chlazení (1–6 °C).

Chirurgický postup:

V místní anestezii je zajištěn vaskulární přístup přes jednu vnitřní krční žílu a jednu stehenní žílu. Pacient je připojen k perfuzní platformě a konzervované geneticky upravené prasečí játra jsou integrovány do mimotělního okruhu.

Imunosupresivní a protizánětlivý režim:

Účastníci obdrží vícelékový imunosupresivní protokol zahrnující:

Rituximab (375 mg/m²) před operací Králíčí anti-lidský thymocytový imunoglobulin (ATG, 1–1,5 mg/kg/den po dobu 2–3 dnů) Takrolimus (cílový spodní hladiny 15–25 ng/mL) Mykofenolát mofetil (1 g dvakrát denně) Etanercept (anti-TNF-α, 25 mg dvakrát týdně) Methylprednisolon (vysokodávkovaný postupně snižovaný režim) Ekulizumab (900 mg, 24 hodin před perfuzí) pro inhibici komplementu

Antikoagulace a podpůrná péče:

Heparin sodný bude podáván k udržení APTT na 1,5–2,5násobku normálu a ACT na 200–300 sekund. Ganciklovir bude poskytnut pro profylaxi cytomegaloviru. Standardní podpůrná péče pro selhání jater, včetně protinfekční terapie, hepatoprotektivních opatření a nutriční podpory, bude poskytována podle klinických směrnic.

Primární cíle:

Pozorovat změny v životních funkcích, fyziologických parametrech, biochemických ukazatelích, funkci srážení, zánětlivých reakcích a imunitně souvisejících markerech u pacientů se závažným selháním jater po mimotělní perfuzi geneticky upraveného prasečího jater Vyhodnotit, zda může tento zákrok významně zlepšit funkci jater a sloužit jako účinná terapie přemosťující k transplantaci

Sekundární cíle:

Vyhodnotit přežití a funkční životaschopnost prasečího jater monitorováním sekrece žluči (objem a barva), průtoku krve v portální žíle/jaterní tepně/jaterní žíle a histopatologickým vyšetřením bioptických vzorků každý druhý den Prozkoumat perioperační managementové strategie a optimalizovat léčebný protokol pro mimotělní jaterní perfuzi Posoudit biologickou bezpečnost denním monitorováním prasečího endogenního retroviru (PERV) a prasečího cytomegaloviru k vyhodnocení rizik mezidruhového přenosu

Výsledné měřítka:

Primární: Zlepšení parametrů funkce jater (bilirubin, INR, stupeň jaterní encefalopatie), funkce srážení a zánětlivých markerů; úspěšné přemostění k transplantaci lidského jater nebo klinické uzdravení Sekundární: Doba přežití štěpu, kvalita produkce žluči, průchodnost cév na ultrazvuku, histologické důkazy rejekce (stupňování ISHLT), incidence nežádoucích příhod a parametry virové bezpečnosti

Doba trvání studie a sledování:

Doba studie je od října 2025 do prosince 2026. Mimotělní perfuze bude pokračovat, dokud nenastane jedna z následujících situací: (1) úspěšné přemostění k alogenní transplantaci jater, (2) klinické uzdravení umožňující ukončení podpory, (3) selhání štěpu, (4) úmrtí účastníka, nebo (5) maximální doba trvání 14 dnů. Pokud první štěp selže, může být pro pokračující perfuzi použito druhé geneticky upravené prasečí játra.

Monitorování bezpečnosti:

Komplexní monitorování bezpečnosti zahrnuje hodinové životní funkce, denní laboratorní hodnocení (krevní obraz, funkce jater/ledvin, srážení, hladiny takrolimu), denní břišní ultrazvuk a důkladnou dokumentaci nežádoucích příhod. Nezávislý etický výbor dohlíží na studii a účastníci (nebo rodinní příslušníci) mohou kdykoli před nebo během zákroku odvolat souhlas.

Statistická analýza:

Jako studie s jedním účastníkem budou data analyzována deskriptivně. Spojité proměnné budou vyjádřeny jako průměr ± směrodatná odchylka, přičemž změny od výchozího stavu budou dokumentovány longitudinálně.