Ex Vivo Perfusion af Gen-redigerede Svinelever hos Patienter med Svær Leversvigt

Dette er en single-center, prospektiv, åben-label klinisk undersøgelse designet til at inkludere én patient med svær leversvigt for at evaluere sikkerheden og effektiviteten af ekstrakorporal perfusion ved brug af en genredigeret griselever som en bro-til-transplantation-terapi.

Baggrund og begrundelse:

Svær leversvigt har ekstremt høj korttidsdødelighed, og knapheden på humane donorlevere begrænser behandlingsmulighederne. Xenotransplantation ved brug af genetisk modificerede grise repræsenterer en lovende løsning på organmangel. Denne undersøgelse bygger på præklinisk succes i grise-til-ikke-menneskelige primat leverxenotransplantation og nylige subkliniske forsøg i hjernedøde humane modtagere. Ved at anvende en ekstrakorporal (ex vivo) perfusionstilgang minimerer undersøgelsen kirurgisk trauma for patienten, mens den muliggør vurdering af xenogen leverfunktion og kompatibilitet.

Undersøgelsespopulation:

Undersøgelsen vil rekruttere én voksen patient (alder 18-70 år) med svær leversvigt, der opfylder diagnostiske kriterier fra "Retningslinjer for diagnostik og behandling af leversvigt (2024-udgaven)". Berettigede deltagere skal have grad II eller højere hepatisk encefalopati og en forventet dårlig prognose med høj korttidsdødelighed (28-dages dødelighed ≥15%). Et tredjeparts uafhængigt udvalg af tre eksperter vil vurdere naturlige dødelighedsforventninger for at vælge passende kandidater. Vigtige eksklusionskriterier inkluderer immundysfunktion (f.eks. HIV), tidligere allogen transplantation eller manglende evne til at tolerere kirurgisk trauma.

Intervention:

Interventionen involverer forbindelse af patienten til et ekstrakorporalt perfusionskredsløb indeholdende en lever fra en seks-gen-redigeret Bama miniaturegrise (leveret af Sichuan Zhongke Aoge Biotechnology Co., Ltd.). Griseleveren indvindes ved brug af standardteknikker med hypoterm perfusion (Schüssner's opløsning og hyperton citrat-purine opløsning) og transporteres under strenge kølelagringsbetingelser (1-6°C).

Kirurgisk procedure:

Under lokalbedøvelse etableres vaskulær adgang via én vena jugularis interna og én vena femoralis. Patienten forbindes til perfusionsplatformen, og den konserverede genredigerede griselever integreres i det ekstrakorporale kredsløb.

Immunsuppression og antiinflammatorisk regimen:

Deltagere vil modtage en fler-lægemiddel immunundertrykkende protokol inkluderende:

Rituximab (375 mg/m²) præoperativt Kanin anti-human thymocyt immunoglobulin (ATG, 1-1,5 mg/kg/dag i 2-3 dage) Tacrolimus (målgennemstrømning 15-25 ng/mL) Mycophenolat mofetil (1 g to gange dagligt) Etanercept (anti-TNF-α, 25 mg to gange ugentligt) Methylprednisolon (høj-dosis udtrapningsregime) Eculizumab (900 mg, 24 timer før perfusion) til komplementhæmning

Antikoagulation og støttende pleje:

Heparin natrium vil administreres for at opretholde APTT ved 1,5-2,5 gange normalt og ACT ved 200-300 sekunder. Ganciclovir vil leveres til cytomegalovirusprofylakse. Standard støttende pleje for leversvigt, inklusive anti-infektionsterapi, leverbeskyttende foranstaltninger og ernæringsmæssig støtte, vil leveres i henhold til kliniske retningslinjer.

Primære mål:

At observere ændringer i vitale tegn, fysiologiske parametre, biokemiske indikatorer, koagulationsfunktion, inflammatoriske responser og immunrelaterede markører hos patienter med svær leversvigt efter ekstrakorporal perfusion af genredigeret griselever At evaluere om proceduren kan forbedre leverfunktionen signifikant og fungere som en effektiv bro-til-transplantation-terapi

Sekundære mål:

At evaluere overlevelsen og funktionelle levedygtigheden af griseleveren gennem overvågning af galdesekretion (volumen og farve), blodgennemstrømning i vena portae/arteria hepatica/vena hepatica og histopatologisk undersøgelse af bioptiprøver hver anden dag At udforske perioperative behandlingsstrategier og optimere behandlingsprotokollen for ekstrakorporal leverperfusion At vurdere biosikkerhed gennem daglig overvågning af porcint endogent retrovirus (PERV) og porcint cytomegalovirus for at evaluere kryds-arts transmissionsrisici

Resultatmål:

Primært: Forbedring i leverfunktionsparametre (bilirubin, INR, hepatisk encefalopatigrad), koagulationsfunktion og inflammatoriske markører; succesfuld bridging til human levertransplantation eller klinisk bedring Sekundært: Overlevelsetid for graft, galdeproduktionskvalitet, vaskulær patency på ultralyd, histologisk evidens for afstødning (ISHLT-gradering), forekomst af uønskede hændelser og virale sikkerhedsparametre

Undersøgelsesvarighed og opfølgning:

Undersøgelsesperioden er fra oktober 2025 til december 2026. Ekstrakorporal perfusion vil fortsætte indtil en af følgende situationer indtræffer: (1) succesfuld bridging til allogen levertransplantation, (2) klinisk bedring der tillader ophør af støtte, (3) graft-svigt, (4) deltagerens død, eller (5) maksimal varighed på 14 dage. Hvis det indledende graft svigter, kan en anden genredigeret griselever anvendes til fortsat perfusion.

Sikkerhedsovervågning:

Omfattende sikkerhedsovervågning inkluderer timelige vitale tegn, daglige laboratorievurderinger (CBC, lever/nyrefunktion, koagulation, tacrolimusniveauer), daglig abdominal ultralyd og streng dokumentation af uønskede hændelser. Et uafhængigt etisk udvalg overvåger undersøgelsen, og deltagere (eller familiemedlemmer) kan tilbagetrække samtykke til enhver tid før eller under proceduren.

Statistisk analyse:

Som en single-deltager undersøgelse vil data analyseres deskriptivt. Kontinuerte variable vil udtrykkes som middelværdi ± standardafvigelse, med ændringer fra baseline dokumenteret longitudinelt.