Očkování proti chřipce u pacientů se sklerodermií

Studie se zúčastní 50 pacientů se sklerodermií a 30 zdravých, věkově odpovídajících kontrol.

Po podepsání informovaného souhlasu budou všechny subjekty očkovány inaktivovanou split virionovou vakcínou, kterou letos na podzim doporučila WHO.

Pacienti budou hodnoceni v týdnu 0 a 6 týdnech později. Klinické hodnocení bude založeno na modifikovaném Rodnanově skóre, počtu digitálních ischemických vředů, přítomnosti gastrointestinálních a respiračních symptomů, počtu oteklých a citlivých kloubů, vizuálním celkovém hodnocení lékaře, ESR a CRP Krev odebraná v den očkování a o 6 týdnů později.

Imunogenicita vakcíny bude testována testem inhibice hemaglutinace (HI).

Virus chřipky má dva důležité povrchové glykoproteiny: hemaglutinin (HA) a neuraminidázu (NA). Antigenní klasifikace a subtypizace chřipkových virů je založena na těchto dvou glykoproteinech. HA hraje klíčovou roli při vstupu viru do buňky tím, že se váže na buněčné povrchové receptory, které se nacházejí také na červených krvinkách určitých druhů. Vazba na červené krvinky vede k hemaglutinaci, kterou lze pozorovat jako koberec aglutinovaných červených krvinek na dně zkumavky nebo mikrotitrační jamky. V HI testu protilátka namířená proti virovým hemaglutininům blokuje vazbu viru na krevní buňky a tím inhibuje hemaglutinační reakci.

Pre- a postimunizační HI protilátky byly testovány v Centrální virologické laboratoři izraelského ministerstva zdravotnictví pomocí HI testu podle standardního postupu WHO 16. Séra byla oddělena, označena kódem a skladována při -20 °C až do testování. Séra byla ošetřena cholerovým filtrátem enzymu ničícího receptory k odstranění nespecifických inhibitorů a tureckými červenými krvinkami k odstranění nespecifických aglutininů. Ošetřená séra byla testována HI testem proti třem antigenům obsaženým ve vakcíně: A/California (CAL), A/Wisconsin a B/Malajsie. Pracovní ředění (testovací dávka) každého antigenu obsahovalo čtyři jednotky hemaglutininu ve 25 ul antigenu. Testované dávky byly zředěny fyziologickým roztokem pufrovaným fosfátem (PBS) a přidány k sériovému ředění antiséra. Titr inhibice hemaglutininu byl stanoven jako nejvyšší ředění séra, které zcela inhibuje hemaglutinaci červených krvinek.

Titr antiséra nevykazujícího žádnou inhibici bude zaznamenán jako <10. Humorální odpověď bude definována jako buď čtyřnásobný nebo vícenásobný nárůst titru, nebo vzestup z nechráněné výchozí hladiny <1/40 až 1/40 u HI protilátek čtyři týdny po vakcinaci 17,18. Pro posouzení imunity celé skupiny budou vypočteny geometrické průměrné titry protilátek.

Primární cíl studie: podíl pacientů, kteří dosáhnou titru protilátek nad 1/40 proti každému z antigenů obsažených ve vakcíně Sekundární cíl: Bezpečnost vakcíny