Vacunación contra la influenza en pacientes con esclerodermia

Cincuenta pacientes con esclerodermia y 30 controles sanos de la misma edad participarán en el estudio.

Después de firmar el consentimiento informado, todos los sujetos serán vacunados con la vacuna de virus fraccionados inactivados que recomendó la OMS este otoño.

Los pacientes serán evaluados en el weel 0 y 6 semanas después. La evaluación clínica se basará en la puntuación de Rodnan modificada, el número de úlceras isquémicas digitales, la presencia de síntomas gastrointestinales y respiratorios, el número de articulaciones hinchadas y dolorosas, la evaluación global visual del médico, la VSG y la PCR. La sangre se recolectará el día de la vacunación. y 6 semanas después.

La inmunogenicidad de la vacuna se evaluará mediante la prueba de inhibición de la hemaglutinación (HI).

El virus de la influenza tiene dos glicoproteínas de superficie importantes: la hemaglutinina (HA) y la neuraminidasa (NA). La clasificación antigénica y la subtipificación de los virus de influenza se basan en estas dos glicoproteínas. HA desempeña un papel clave en la entrada de virus en las células al unirse a los receptores de la superficie celular, que también se encuentran en los glóbulos rojos de ciertas especies. La unión a los glóbulos rojos da como resultado la hemaglutinación, que puede observarse como una alfombra de glóbulos rojos aglutinados en el fondo de un tubo o pocillo de microtitulación. En la prueba HI, los anticuerpos dirigidos contra las hemaglutininas virales impiden que el virus se una a las células sanguíneas y, por lo tanto, inhibe la reacción de hemaglutinación.

Los anticuerpos HI antes y después de la inmunización se analizaron en el Laboratorio Central de Virología del Ministerio de Salud de Israel utilizando la prueba HI de acuerdo con un procedimiento estándar de la OMS 16. Los sueros se separaron, se etiquetaron con código y se almacenaron a -20 °C hasta que se analizaron. Los sueros se trataron con filtrado de cólera de enzima destructora de receptores para eliminar los inhibidores no específicos, y con glóbulos rojos de pavo para eliminar las aglutininas no específicas. Los sueros tratados se analizaron mediante la prueba HI frente a los tres antígenos incluidos en la vacuna: A/California (CAL), A/Wisconsin y B/Malasia. La dilución de trabajo (dosis de prueba) de cada antígeno contenía cuatro unidades de hemaglutinina en 25 µl de antígeno. Las dosis de prueba se diluyeron en solución salina tamponada con fosfato (PBS) y se añadieron a diluciones en serie de antisuero. El título de inhibición de la hemaglutinina se determinó como la dilución más alta de suero que inhibe completamente la hemaglutinación de los glóbulos rojos.

El título de un antisuero que no muestre ninguna inhibición se registrará como <10. La respuesta humoral se definirá como un aumento de cuatro veces o más en el título, o un aumento desde un nivel inicial no protector de <1/40 a 1/40 en anticuerpos HI cuatro semanas después de la vacunación 17,18. Se calcularán los títulos medios geométricos de anticuerpos para evaluar la inmunidad de todo el grupo.

Punto final primario del estudio: la proporción de pacientes que alcanzan un título de anticuerpos superior a 1/40, contra cada uno de los antígenos incluidos en la vacuna Punto final secundario: Seguridad de la vacuna