Influenzavaccinatie bij patiënten met sclerodermie

Vijftig patiënten met sclerodermie en 30 gezonde, leeftijd gematchte controles zullen deelnemen aan de studie.

Na ondertekening van de geïnformeerde toestemming zullen alle proefpersonen worden gevaccineerd met het geïnactiveerde gesplitste virionvaccin dat dit najaar door de WHO wordt aanbevolen.

Patiënten worden na 0 en 6 weken later geëvalueerd. Klinische evaluatie zal gebaseerd zijn op de gewijzigde Rodnan-score, aantal digitale ischemische ulcera, aanwezigheid van gastro-intestinale en respiratoire symptomen, aantal gezwollen en gevoelige gewrichten, visuele globale evaluatie van de arts, ESR en CRP Bloed wordt verzameld op de dag van vaccinatie en 6 weken daarna.

De immunogeniciteit van het vaccin zal worden getest door middel van een hemagglutinatie-inhibitie (HI)-test.

Influenzavirus heeft twee belangrijke oppervlakteglycoproteïnen: het hemagglutinine (HA) en het neuraminidase (NA). Antigene classificatie en subtypering van influenzavirussen is gebaseerd op deze twee glycoproteïnen. HA speelt een sleutelrol bij het binnendringen van virussen door zich te binden aan receptoren op het celoppervlak, die ook worden aangetroffen op rode bloedcellen van bepaalde soorten. Binding aan rode bloedcellen resulteert in hemagglutinatie, die kan worden waargenomen als een tapijt van geagglutineerde rode bloedcellen op de bodem van een buisje of microtiterholte. Bij de HI-test blokkeren antilichamen gericht tegen de virale hemagglutininen de binding van het virus aan de bloedcellen en remmen zo de hemagglutinatiereactie.

De pre- en post-immunisatie HI-antilichamen werden getest in het Central Virology Laboratory van het Israëlische ministerie van Volksgezondheid met behulp van de HI-test volgens een standaard WHO-procedure 16. Sera werden gescheiden, gecodeerd en bewaard bij -20°C totdat ze werden getest. Sera werden behandeld met receptorvernietigend enzym cholerafiltraat om niet-specifieke remmers te verwijderen, en met rode bloedcellen uit Turkije om niet-specifieke agglutininen te verwijderen. De behandelde sera werden getest met een HI-test tegen de drie antigenen die in het vaccin zijn opgenomen: A/California (CAL), A/Wisconsin en B/Malaysia. De werkverdunning (testdosis) van elk antigeen bevatte vier hemagglutinine-eenheden in 25 µl antigeen. Testdoses werden verdund in met fosfaat gebufferde zoutoplossing (PBS) en toegevoegd aan seriële verdunning van antiserum. De hemagglutinine-remmingstiter werd bepaald als de hoogste verdunning van serum die de hemagglutinatie van rode bloedcellen volledig remt.

De titer van een antiserum dat geen remming vertoont, wordt geregistreerd als <10. Humorale respons zal worden gedefinieerd als een viervoudige of meer stijging van de titer, of een stijging vanaf een niet-beschermend basislijnniveau van <1/40 tot 1/40 in HI-antilichamen vier weken na vaccinatie 17,18. Geometrisch gemiddelde antilichaamtiters zullen worden berekend om de immuniteit van de hele groep te beoordelen.

Primair eindpunt van de studie: het percentage patiënten dat een titer van antilichamen van meer dan 1/40 bereikt tegen elk van de antigenen die in het vaccin zijn opgenomen. Secundair eindpunt: veiligheid van het vaccin.