Influenssarokotus potilailla, joilla on skleroderma

Tutkimukseen osallistuu 50 sklerodermapotilasta ja 30 tervettä, ikääntynyttä verrokkia.

Tietoisen suostumuksen allekirjoittamisen jälkeen kaikki tutkittavat rokotetaan WHO:n tänä syksynä suosittelemalla inaktivoidulla split virion -rokotteella.

Potilaat arvioidaan viikolla 0 ja 6 viikkoa myöhemmin. Kliininen arviointi perustuu muutettuun Rodnanin pistemäärään, sormien iskeemisten haavaumien määrään, maha-suolikanavan ja hengitysteiden oireiden esiintymiseen, turvonneiden ja arkojen nivelten määrään, lääkärin visuaaliseen kokonaisarviointiin, ESR- ja CRP-vereen, joka kerätään rokotuspäivänä. ja 6 viikkoa myöhemmin.

Rokotteen immunogeenisyys testataan hemagglutinaation estotestillä (HI).

Influenssaviruksella on kaksi tärkeää pintaglykoproteiinia: hemagglutiniini (HA) ja neuraminidaasi (NA). Influenssavirusten antigeeninen luokittelu ja alatyypit perustuvat näihin kahteen glykoproteiiniin. HA:lla on keskeinen rooli virussolujen sisäänpääsyssä sitoutumalla solun pintareseptoreihin, joita löytyy myös tiettyjen lajien punasoluista. Punasoluihin sitoutuminen johtaa hemagglutinaatioon, joka voidaan havaita agglutinoituneiden punasolujen mattona putken tai mikrotiitterikuopan pohjalla. HI-testissä viruksen hemagglutiniinia vastaan ​​suunnattu vasta-aine estää viruksen sitoutumisen verisoluihin ja estää siten hemagglutinaatioreaktion.

Immunisaatiota edeltävät ja sen jälkeiset HI-vasta-aineet testattiin Israelin terveysministeriön keskusvirologian laboratoriossa käyttämällä HI-testiä WHO:n standardimenettelyn 16 mukaisesti. Seerumit erotettiin, leimattiin koodilla ja säilytettiin -20 °C:ssa testaukseen asti. Seerumit käsiteltiin reseptoria tuhoavalla entsyymikolerasuodoksella epäspesifisten estäjien poistamiseksi ja kalkkunan punasoluilla epäspesifisten agglutiniinien poistamiseksi. Käsitellyt seerumit testattiin HI-testillä kolmea rokotteeseen sisältyvää antigeeniä vastaan: A/California (CAL), A/Wisconsin ja B/Malaysia. Kunkin antigeenin työlaimennos (testiannos) sisälsi neljä hemagglutiniiniyksikköä 25 ul:ssa antigeeniä. Testiannokset laimennettiin fosfaattipuskuroidulla suolaliuoksella (PBS) ja lisättiin antiseerumin sarjalaimennukseen. Hemagglutiniinin estotiitteri määritettiin seerumin korkeimmaksi laimennokseksi, joka estää täysin punasolujen hemagglutinaation.

Antiseerumin tiitteri, joka ei osoita mitään estoa, kirjataan arvoksi <10. Humoraalinen vaste määritellään joko nelinkertaiseksi tai useammaksi tiitterin nousuksi tai nousuksi ei-suojaavasta lähtötasosta <1/40 arvoon 1/40 HI-vasta-aineissa neljä viikkoa rokotuksen jälkeen 17,18. Vasta-aineen geometriset keskimääräiset tiitterit lasketaan koko ryhmän immuniteetin arvioimiseksi.

Tutkimuksen ensisijainen päätepiste: niiden potilaiden osuus, jotka saavuttavat yli 1/40 vasta-ainetiitterin kutakin rokotteeseen sisältyvää antigeeniä vastaan. Toissijainen päätepiste: rokotteen turvallisuus