Vacinação contra influenza em pacientes com esclerodermia

Cinquenta pacientes com esclerodermia e 30 controles saudáveis ​​e idosos pareados participarão do estudo.

Depois de assinar o consentimento informado, todos os indivíduos serão vacinados com a vacina de vírions inativados, recomendada pela OMS neste outono.

Os pacientes serão avaliados no poço 0 e 6 semanas depois. A avaliação clínica será baseada no escore de Rodnan modificado, número de úlceras digitais isquêmicas, presença de sintomas gastrointestinais e respiratórios, número de articulações inchadas e sensíveis, avaliação visual global do médico, VHS e PCR Sangue a ser coletado no dia da vacinação e 6 semanas depois.

A imunogenicidade da vacina será testada pelo teste de inibição da Hemaglutinação (HI).

O vírus influenza possui duas importantes glicoproteínas de superfície: a hemaglutinina (HA) e a neuraminidase (NA). A classificação antigênica e a subtipagem dos vírus influenza são baseadas nessas duas glicoproteínas. O HA desempenha um papel fundamental na entrada das células do vírus, ligando-se aos receptores da superfície celular, que também são encontrados nos glóbulos vermelhos de certas espécies. A ligação aos glóbulos vermelhos resulta em hemaglutinação, que pode ser observada como um tapete de glóbulos vermelhos aglutinados no fundo de um tubo ou poço de microtitulação. No teste HI, o anticorpo direcionado contra as hemaglutininas virais bloqueia a ligação do vírus às células sanguíneas e, portanto, inibe a reação de hemaglutinação.

Os anticorpos HI pré e pós-imunização foram testados no Laboratório Central de Virologia do Ministério da Saúde de Israel usando o teste HI de acordo com um procedimento padrão da OMS 16. Os soros foram separados, rotulados com código e armazenados a -20°C até serem testados. Os soros foram tratados com filtrado de cólera de enzima destruidora de receptores para remover inibidores não específicos e com glóbulos vermelhos de Turquia para remover aglutininas não específicas. Os soros tratados foram testados pelo teste HI contra os três antígenos incluídos na vacina: A/Califórnia (CAL), A/Wisconsin e B/Malásia. A diluição de trabalho (dose teste) de cada antígeno continha quatro unidades de hemaglutinina em 25 µl de antígeno. As doses de teste foram diluídas em solução salina tamponada com fosfato (PBS) e adicionadas à diluição seriada do anti-soro. O título de inibição da hemaglutinina foi determinado como a maior diluição de soro que inibe completamente a hemaglutinação dos glóbulos vermelhos.

O título de um anti-soro que não apresenta nenhuma inibição será registrado como <10. A resposta humoral será definida como um aumento de quatro vezes ou mais no título, ou um aumento de um nível basal não protetor de <1/40 a 1/40 em anticorpos HI quatro semanas após a vacinação 17,18. Os títulos médios geométricos de anticorpos serão calculados para avaliar a imunidade de todo o grupo.

Endpoint Primário do estudo: a proporção de pacientes que atingem um título de anticorpos acima de 1/40, contra cada um dos antígenos incluídos na vacina. Endpoint Secundário: Segurança da vacina