Sclerodermában szenvedő betegek influenza elleni védőoltása

Ötven szklerodermában szenvedő beteg és 30 egészséges, idős, egyező kontrollcsoport vesz részt a vizsgálatban.

A tájékozott beleegyező nyilatkozat aláírása után minden alany beoltásra kerül a WHO által idén ősszel javasolt, inaktivált split virion vakcinával.

A betegeket a 0. héten és 6 héttel később értékelik. A klinikai értékelés a módosított Rodnan-pontszámon, a digitális ischaemiás fekélyek számán, a gyomor-bélrendszeri és légúti tünetek meglétén, a duzzadt és érzékeny ízületek számán, az orvos vizuális átfogó értékelésén, az ESR- és CRP-véren alapul, amelyet az oltás napján kell gyűjteni. és 6 héttel később.

A vakcina immunogenitását hemagglutinációs gátlási (HI) teszttel vizsgálják.

Az influenzavírusnak két fontos felszíni glikoproteinje van: a hemagglutinin (HA) és a neuraminidáz (NA). Az influenzavírusok antigén osztályozása és altípusa ezen a két glikoproteinen alapul. A HA kulcsszerepet játszik a vírussejtekbe való bejutásban, mivel a sejtfelszíni receptorokhoz kötődik, amelyek bizonyos fajok vörösvérsejtjein is megtalálhatók. A vörösvértestekhez való kötődés hemagglutinációt eredményez, amely egy cső vagy mikrotiter üreg alján agglutinált vörösvértestek szőnyegeként figyelhető meg. A HI tesztben a vírusos hemagglutininek elleni antitest blokkolja a vírus kötődését a vérsejtekhez, így gátolja a hemagglutinációs reakciót.

Az immunizálás előtti és utáni HI antitesteket az izraeli Egészségügyi Minisztérium Központi Virológiai Laboratóriumában tesztelték a HI teszttel a WHO szabványos eljárása 16 szerint. A szérumokat elválasztottuk, kódjelzéssel elláttuk, és a tesztelésig -20 °C-on tároltuk. A szérumokat receptorromboló enzim kolera szűrletével kezelték a nem specifikus inhibitorok eltávolítására, és pulyka vörösvértestekkel, hogy eltávolítsák a nem specifikus agglutinineket. A kezelt szérumokat HI teszttel tesztelték a vakcinában található három antigén ellen: A/California (CAL), A/Wisconsin és B/Malaysia. Mindegyik antigén munkahígítása (tesztdózisa) négy hemagglutinin egységet tartalmazott 25 µl antigénben. A tesztdózisokat foszfáttal pufferolt sóoldattal (PBS) hígítottuk, és hozzáadtuk az antiszérum sorozathígításához. A hemagglutinin gátlási titert a szérum legmagasabb hígításaként határoztuk meg, amely teljes mértékben gátolja a vörösvértestek hemagglutinációját.

A gátlást nem mutató antiszérum titerét <10-ként rögzítjük. A humorális választ a titer négyszeres vagy nagyobb emelkedéseként, vagy a HI-antitestek nem protektív alapszintjének <1/40-ről 1/40-re való emelkedéseként határozzák meg négy héttel a vakcinázás után 17,18. Az antitestek geometriai átlagtitereit kiszámítjuk, hogy értékeljük az egész csoport immunitását.

A vizsgálat elsődleges végpontja: azoknak a betegeknek az aránya, akiknél az oltóanyagban szereplő antigének mindegyike ellen 1/40 feletti antitesttitert érnek el. Másodlagos végpont: A vakcina biztonságossága