Vaccinazione antinfluenzale in pazienti con sclerodermia

Parteciperanno allo studio 50 pazienti con sclerodermia e 30 controlli sani di pari età.

Dopo aver firmato il consenso informato, tutti i soggetti saranno vaccinati con il vaccino a virione diviso inattivato raccomandato dall'OMS questo autunno.

I pazienti saranno valutati a weel 0 e 6 settimane dopo. La valutazione clinica si baserà sul punteggio Rodnan modificato, numero di ulcere ischemiche digitali, presenza di sintomi gastrointestinali e respiratori, numero di articolazioni gonfie e dolenti, valutazione visiva globale del medico, VES e CRP Sangue da raccogliere il giorno della vaccinazione e 6 settimane dopo.

L'immunogenicità del vaccino sarà testata mediante test di inibizione dell'emoagglutinazione (HI).

Il virus dell'influenza ha due importanti glicoproteine ​​di superficie: l'emoagglutinina (HA) e la neuraminidasi (NA). La classificazione antigenica e la sottotipizzazione dei virus influenzali si basano su queste due glicoproteine. L'HA svolge un ruolo chiave nell'ingresso delle cellule virali legandosi ai recettori della superficie cellulare, che si trovano anche sui globuli rossi di alcune specie. Il legame con i globuli rossi determina l'emoagglutinazione, che può essere osservata come un tappeto di globuli rossi agglutinati sul fondo di una provetta o di un pozzetto di microtitolazione. Nel test HI, gli anticorpi diretti contro le emoagglutinine virali impediscono al virus di legarsi alle cellule del sangue e quindi inibiscono la reazione di emoagglutinazione.

Gli anticorpi HI pre e post immunizzazione sono stati testati presso il Laboratorio Centrale di Virologia del Ministero della Salute israeliano utilizzando il test HI secondo una procedura standard dell'OMS 16. I sieri sono stati separati, etichettati con codice e conservati a -20°C fino al momento del test. I sieri sono stati trattati con l'enzima distruttivo del colera filtrato del recettore per rimuovere gli inibitori non specifici e con i globuli rossi di tacchino per rimuovere le agglutinine non specifiche. I sieri trattati sono stati testati mediante HI test contro i tre antigeni inclusi nel vaccino: A/California (CAL), A/Wisconsin e B/Malesia. La diluizione di lavoro (dose di prova) di ciascun antigene conteneva quattro unità di emoagglutinina in 25 µl di antigene. Le dosi di prova sono state diluite in soluzione salina tamponata con fosfato (PBS) e aggiunte alla diluizione seriale dell'antisiero. Il titolo di inibizione dell'emoagglutinina è stato determinato come la massima diluizione del siero che inibisce completamente l'emoagglutinazione dei globuli rossi.

Il titolo di un antisiero che non mostra alcuna inibizione verrà registrato come <10. La risposta umorale sarà definita come un aumento quadruplo o superiore del titolo o un aumento da un livello basale non protettivo di <1/40 a 1/40 di anticorpi HI quattro settimane dopo la vaccinazione 17,18. Sarà calcolata la media geometrica dei titoli anticorpali per valutare l'immunità dell'intero gruppo.

Endpoint primario dello studio: la percentuale di pazienti che raggiungono un titolo anticorpale superiore a 1/40, contro ciascuno degli antigeni inclusi nel vaccino Endpoint secondario: sicurezza del vaccino