Вакцинация против гриппа у больных склеродермией

В исследовании примут участие 50 пациентов со склеродермией и 30 здоровых лиц пожилого возраста.

После подписания информированного согласия все субъекты будут вакцинированы инактивированной сплит-вирионной вакциной, рекомендованной ВОЗ этой осенью.

Пациенты будут оцениваться на 0-й неделе и через 6 недель. Клиническая оценка будет основываться на модифицированной шкале Роднана, количестве ишемических язв на пальцах, наличии желудочно-кишечных и респираторных симптомов, количестве опухших и болезненных суставов, визуальной общей оценке врача, СОЭ и СРБ. Кровь берут в день вакцинации. и через 6 недель.

Иммуногенность вакцины будет проверена с помощью реакции ингибирования гемагглютинации (HI).

Вирус гриппа имеет два важных поверхностных гликопротеина: гемагглютинин (HA) и нейраминидазу (NA). Антигенная классификация и субтипирование вирусов гриппа основаны на этих двух гликопротеинах. ГК играет ключевую роль во проникновении вируса в клетку, связываясь с рецепторами клеточной поверхности, которые также обнаруживаются на эритроцитах некоторых видов. Связывание с эритроцитами приводит к гемагглютинации, которую можно наблюдать в виде ковра из агглютинированных эритроцитов на дне пробирки или лунки микротитрационного аппарата. В тесте HI антитела, направленные против вирусных гемагглютининов, блокируют связывание вируса с клетками крови и, таким образом, ингибируют реакцию гемагглютинации.

Антитела к HI до и после иммунизации были протестированы в Центральной вирусологической лаборатории Министерства здравоохранения Израиля с использованием теста HI в соответствии со стандартной процедурой ВОЗ 16. Сыворотки отделяли, маркировали кодом и хранили при -20°C до тестирования. Сыворотки обрабатывали фильтратом холерного фермента, разрушающего рецепторы, для удаления неспецифических ингибиторов и эритроцитами индейки для удаления неспецифических агглютининов. Обработанные сыворотки тестировали с помощью теста HI против трех антигенов, включенных в вакцину: A/Калифорния (CAL), A/Висконсин и B/Малайзия. Рабочее разведение (тестовая доза) каждого антигена содержало четыре гемагглютинина в 25 мкл антигена. Тестовые дозы разводили в фосфатно-солевом буфере (PBS) и добавляли к серийным разведениям антисыворотки. Титр ингибирования гемагглютинации определяли как максимальное разведение сыворотки, при котором полностью ингибируется гемагглютинация эритроцитов.

Титр антисыворотки, не демонстрирующий никакого ингибирования, будет записан как <10. Гуморальный ответ будет определяться либо четырехкратным или более увеличением титра, либо повышением от непротективного исходного уровня <1/40 до 1/40 антител HI через четыре недели после вакцинации 17,18. Средние геометрические титры антител будут рассчитаны для оценки иммунитета всей группы.

Первичная конечная точка исследования: доля пациентов, достигших титра антител выше 1/40, против каждого из антигенов, включенных в вакцину. Вторичная конечная точка: безопасность вакцины.