Transplantace fetální pupečníkové krve (UCB) pro lysozomální střádavá onemocnění (IUHST-001)

Účelem této studie je určit bezpečnost terapie fetálními kmenovými buňkami v prvním trimestru s použitím nepříbuzných dárcovských částečně HLA-shodných kmenových a progenitorových buněk získaných z lidské pupečníkové krve pro léčbu vybraných lysozomálních střádavých onemocnění, o kterých je známo, že způsobují závažné a nevratné neurologické postižení v raném dětství a které je v dětství smrtelné.

Tato studie je navržena jako prospektivní otevřená studie fáze I v jediném centru. Je navržen tak, aby vyhodnotil bezpečnost a proveditelnost podávání buněk ALD-601 UCB plodům v prvním trimestru, o nichž je známo, že jsou postiženy letálním lysozomálním střádavým onemocněním. Velikost vzorku je 12 pacientů zařazených do kohort velikosti 3. Bezpečnostní opatření budou monitorována nezávislým DSMC v každé ze 4 kohort před přechodem do další kohorty.

Biologickým rodičům, u kterých se zvažuje léčba, bude provedeno testování HLA, analýza mutací na stav onemocnění a psychologické poradenství. Matky budou mít ultrazvuk pro gestační věk a testování choriových klků pro analýzu mutace na Krabbe, MLD, Tay Sachs, Sandhoff nebo PMD (podle toho, co je vhodné). Den před plánovaným převodem bude stanovena délka korunky. Hmotnost plodu se vypočítá ze vzorce: Y (kg) = (2,9026 x 10-1) (X 2,6528). Odhadovaná hmotnost plodu v tomto gestačním věku by byla asi 0,5 unce nebo 14 gramů. Bude identifikována vhodně spárovaná nepříbuzná pupečníková krev a 20% část bude zpracována pro izolaci buněk ALD-601. Buňky ALD-601 (ALDHbr) jsou izolovány vysokorychlostním průtokovým tříděním na FACSAria (BD Biosciences). Po dokončení třídění se spočítají buňky ALD-601 UCB, stanoví se životaschopnost a buněčné složení vzorku se měří analytickou průtokovou cytometrií s použitím fluorescenčních protilátek proti markeru linie pro T-buňky, granulocyty, monocyty a erytrocyty. Obsah buněk ALDHbr je také potvrzen analytickou průtokovou cytometrií. Dávka 1 x 105 - 2 x 106 buněk/kg odhadované hmotnosti plodu se suspenduje ve 300 mikrolitrech média Cellgenix Stem Cell Medium (CellGenix, Inc.). Kritéria uvolňování umožní maximálně 5 x 104 T buněk/kg. Pokud vytříděný vzorek obsahuje více než 5 x 104 T buněk/kg, je znovu roztříděn pomocí FACSAria a znovu vyhodnocen na počet buněk, životaschopnost a buněčný obsah. Testování sterility bude zahrnovat kultury Bac-T/ALERT, měření endotoxinu (LAL) a barvení podle gramů. Po splnění kritérií pro uvolnění produktu je ALD-601 přepraven při 2-8 °C v ověřeném chladiči do Duke a uvolněn do laboratoře kmenových buněk. Personál Duke přepraví chladič obsahující produkt ALD-601 do ultrazvukové soupravy, kde lékařský tým nechá ALD-601 před injekcí krátce zahřát na pokojovou teplotu. Pod kontinuálním ultrazvukovým vedením bude k propíchnutí peritoneální dutiny plodu použita procedura 22-gauge X 5 palců. K potvrzení intraperitoneálního umístění bude nakapáno 100 mikrolitrů sterilního fyziologického roztoku. Infuze kmenových buněk se pak vstříkne jehlou a následuje injekce 200 mikrolitrů (mrtvý prostor jehly: 60 mikrolitrů), aby se vytěsnily všechny buňky z mrtvého prostoru jehly. O 24 hodin později bude provedeno ultrazvukové vyšetření k potvrzení životaschopnosti plodu. Následný ultrazvuk bude proveden v 18. týdnu těhotenství k potvrzení životaschopnosti, posouzení podrobné anatomie plodu a adekvátního sériového růstu plodu.