Трансплантация пуповинной крови плода (UCB) при лизосомных болезнях накопления (IUHST-001)

Целью данного исследования является определение безопасности терапии фетальными стволовыми клетками в первом триместре беременности с использованием стволовых клеток неродственного донора, частично HLA-совместимых стволовых клеток и клеток-предшественников, полученных из пуповинной крови человека, для лечения отдельных лизосомных болезней накопления, которые, как известно, вызывают тяжелые и необратимые неврологическая инвалидность в раннем младенчестве и летальные исходы в детстве.

Это исследование разработано как проспективное открытое одноцентровое исследование I фазы. Он предназначен для оценки безопасности и осуществимости введения клеток UCB ALD-601 плодам первого триместра беременности, о которых известно, что они поражены летальной лизосомной болезнью накопления. Размер выборки составляет 12 пациентов, зарегистрированных в когортах размера 3. Меры безопасности будут контролироваться независимым DSMC в каждой из 4 когорт до перехода к следующей когорте.

Биологические родители, которых рассматривают для лечения, должны пройти тестирование на HLA, анализ мутаций для определения статуса заболевания и психологическое консультирование. Матери будут проходить ультразвуковое исследование для определения гестационного возраста и тестирование ворсин хориона для анализа мутаций Krabbe, MLD, Tay Sachs, Sandhoff или PMD (в зависимости от того, что применимо). Длина от темени до крестца будет определена за день до запланированной передачи. Вес плода будет рассчитываться по формуле: Y (кг) = (2,9026 х 10-1) (Х 2,6528). Предполагаемый вес плода в этом гестационном возрасте будет составлять около 0,5 унции или 14 граммов. Подходящим образом подобранная неродственная пуповинная кровь будет идентифицирована, и часть 20% будет обработана для выделения клеток ALD-601. Клетки ALD-601 (ALDHbr) выделяют с помощью высокоскоростной сортировки на FACSAria (BD Biosciences). По завершении сортировки подсчитывают клетки UCB ALD-601, определяют жизнеспособность и измеряют клеточный состав образца с помощью аналитической проточной цитометрии с использованием флуоресцентных антител к маркеру линии Т-клеток, гранулоцитов, моноцитов и эритроцитов. Содержание клеток ALDHbr также подтверждается аналитической проточной цитометрией. Дозу 1×105-2×106 клеток/кг расчетной массы плода суспендируют в 300 мкл среды для стволовых клеток Cellgenix (CellGenix, Inc.). Критерии выпуска допускают максимум 5 x 104 Т-клеток/кг. Если отсортированный образец содержит более 5 x 104 Т-клеток/кг, он подвергается повторной сортировке с использованием FACSAria и повторно оценивается по числу клеток, жизнеспособности и клеточному содержанию. Тестирование на стерильность будет включать посев Bac-T/ALERT, измерение эндотоксина (LAL) и окрашивание по Граму. После соответствия критериям выпуска продукта ALD-601 транспортируется при температуре 2–8°C в сертифицированном холодильнике в компанию Duke и передается в лабораторию стволовых клеток. Персонал Duke перенесет холодильник с продуктом ALD-601 в кабинет УЗИ, где медицинская бригада позволит ALD-601 ненадолго нагреться до комнатной температуры перед инъекцией. Под непрерывным ультразвуковым контролем для пункции брюшной полости плода будет использоваться процедурная игла размером 22 размера X 5 дюймов. Для подтверждения внутрибрюшинного введения вводят 100 мкл стерильного физиологического раствора. Затем через иглу вводят инфузию стволовых клеток с последующей инъекцией 200 мкл (мертвое пространство иглы: 60 мкл), чтобы вытеснить все клетки из мертвого пространства иглы. УЗИ будет выполнено через 24 часа, чтобы подтвердить жизнеспособность плода. Последующее УЗИ будет проведено на 18 неделе беременности, чтобы подтвердить жизнеспособность, оценить подробную анатомию плода и адекватный серийный рост плода.