Magzati köldökzsinórvér (UCB) transzplantáció lizoszómális raktározási betegségekre (IUHST-001)

A tanulmány célja az első trimeszterben végzett magzati őssejt-terápia biztonságosságának meghatározása humán köldökzsinórvérből származó, nem rokon donorok HLA-val egyező ős- és progenitor sejtjeit olyan kiválasztott lizoszómális raktározási betegségek kezelésére, amelyekről ismert, hogy súlyos és visszafordíthatatlanok. neurológiai fogyatékosság korai csecsemőkorban, és amelyek gyermekkorban halálosak.

Ezt a tanulmányt prospektív I. fázisú nyílt elrendezésű egyközpontú vizsgálatnak tervezték. Úgy tervezték, hogy értékelje az ALD-601 UCB sejtek beadásának biztonságosságát és megvalósíthatóságát olyan magzatok első trimeszterében, amelyekről ismert, hogy halálos lizoszómális raktározási betegségben szenvednek. A minta mérete 12, 3-as méretű kohorszba bevont beteg. A biztonsági intézkedéseket egy független DSMC fogja felügyelni mind a 4 kohorszban, mielőtt továbblépne a következő kohorszba.

A terápiára fontolóra vett biológiai szülők HLA-tesztet, mutációelemzést a betegség állapotára vonatkozóan és pszichológiai tanácsadást kapnak. Az anyáknak ultrahangvizsgálatot kell végezniük a terhességi kor megállapítására és chorionboholy-tesztet a Krabbe, MLD, Tay Sachs, Sandhoff vagy PMD mutációk elemzésére (amelyik megfelelő). A korona-far hossza a tervezett átszállás előtti napon kerül meghatározásra. A magzat súlyát a következő képlet alapján számítjuk ki: Y (kg) = (2,9026 x 10-1) (X 2,6528). A magzat becsült súlya ebben a terhességi korban körülbelül 0,5 uncia vagy 14 gramm lenne. Megfelelően illeszkedő, nem rokon köldökzsinórvért azonosítanak, és a 20%-os részt manipulálják az ALD-601 sejtek izolálására. Az ALD-601 (ALDHbr) sejteket a FACSAria (BD Biosciences) nagysebességű áramlási szortírozásával izoláljuk. A válogatás befejeztével megszámlálják az ALD-601 UCB sejteket, meghatározzák az életképességet, és a minta sejtösszetételét analitikai áramlási citometriával mérik, fluoreszcens antitesteket használva a T-sejtek, granulociták, monociták és eritrociták vonali markerére. Az ALDHbr sejtek tartalmát analitikai áramlási citometria is megerősíti. 1x105-2x106 sejt/kg becsült magzati tömeg dózist szuszpendálunk 300 mikroliter Cellgenix Stem Cell Medium táptalajban (CellGenix, Inc.). A kibocsátási kritériumok legfeljebb 5 x 104 T-sejt/kg-ot tesznek lehetővé. Ha a szétválogatott minta több mint 5 x 104 T-sejt/kg-ot tartalmaz, akkor a FACSAria segítségével újraválogatják, és újraértékelik a sejtszámot, az életképességet és a sejttartalmat. A sterilitási vizsgálat magában foglalja a Bac-T/ALERT tenyészeteket, az endotoxin mérést (LAL) és a Gram-festést. A termékkibocsátásra vonatkozó kritériumok teljesítése után az ALD-601-et 2-8 C-os hőmérsékleten validált hűtőben szállítják a Duke-ba, és az Őssejt-laboratóriumba bocsátják. A Duke személyzete az ALD-601 terméket tartalmazó hűtőt az ultrahangos egységbe szállítja, ahol az orvosi csapat lehetővé teszi, hogy az ALD-601 rövid időre szobahőmérsékletre melegedjen az injekció beadása előtt. Folyamatos ultrahangos irányítás mellett egy 22 G X 5 hüvelykes eljárási tűvel szúrják át a magzat peritoneális üregét. 100 mikroliter steril sóoldatot csepegtetünk az intraperitoneális elhelyezés megerősítésére. Az őssejt-infúziót ezután a tűn keresztül fecskendezik be, majd 200 mikroliter befecskendezése következik (a tű holttere: 60 mikroliter), hogy az összes sejtet kiszorítsák a tű holtteréből. 24 órával később ultrahangot végeznek a magzat életképességének megerősítésére. A terhesség 18. hetében ezt követően ultrahangvizsgálatot végeznek az életképesség megerősítésére, a magzat részletes anatómiájának és a megfelelő sorozatos magzatnövekedés értékelésére.