Trasplante de sangre de cordón umbilical fetal (UCB) para enfermedades de almacenamiento lisosomal (IUHST-001)

El propósito de este estudio es determinar la seguridad de la terapia con células madre fetales en el primer trimestre utilizando células madre y progenitoras parcialmente compatibles con HLA de donantes no emparentados derivadas de la sangre del cordón umbilical humano para el tratamiento de enfermedades de almacenamiento lisosomal seleccionadas que se sabe que causan enfermedades graves e irreversibles. discapacidad neurológica en la primera infancia y que son letales en la niñez.

Este estudio está diseñado como un ensayo prospectivo de fase I de etiqueta abierta en un solo centro. Está diseñado para evaluar la seguridad y la viabilidad de la administración de células UCB ALD-601 a fetos de primer trimestre que se sabe que están afectados por una enfermedad de almacenamiento lisosomal letal. El tamaño de la muestra es de 12 pacientes inscritos en cohortes de tamaño 3. Las medidas de seguridad serán monitoreadas por un DSMC independiente en cada una de las 4 cohortes antes de pasar a la siguiente cohorte.

Los padres biológicos que se consideren para la terapia se someterán a pruebas de HLA, análisis de mutaciones para el estado de la enfermedad y asesoramiento psicológico. A las madres se les realizarán ecografías para la edad gestacional y pruebas de vellosidades coriónicas para el análisis de mutaciones de Krabbe, MLD, Tay Sachs, Sandhoff o PMD (según corresponda). La longitud de la coronilla se determinará el día antes de la transferencia programada. El peso fetal se calculará a partir de la fórmula: Y (kg) = (2,9026 x 10-1) (X 2,6528). El peso fetal estimado a esa edad gestacional sería de aproximadamente 0,5 onzas o 14 gramos. Se identificará una sangre de cordón umbilical no relacionada que coincida adecuadamente y la porción del 20 % se manipulará para el aislamiento de células ALD-601. Las células ALD-601 (ALDHbr) se aíslan mediante clasificación de flujo de alta velocidad en FACSAria (BD Biosciences). Una vez completada la clasificación, se cuentan las células UCB ALD-601, se determina la viabilidad y se mide la composición celular de la muestra mediante citometría de flujo analítica utilizando anticuerpos de fluorescencia para el marcador de linaje de células T, granulocitos, monocitos y eritrocitos. El contenido de células ALDHbr también se confirma mediante citometría de flujo analítica. Se suspende una dosis de 1 x 105 - 2 x 106 células/kg de peso fetal estimado en 300 microlitros de Cellgenix Stem Cell Medium (CellGenix, Inc.). Los criterios de liberación permitirán un máximo de 5 x 104 células T/kg. Si la muestra clasificada contiene más de 5 x 104 células T/kg, se vuelve a clasificar utilizando FACSAria y se vuelve a evaluar el número de células, la viabilidad y el contenido celular. Las pruebas de esterilidad incluirán cultivos Bac-T/ALERT, medición de endotoxinas (LAL) y tinción de Gram. Después de cumplir con los criterios para la liberación del producto, ALD-601 se transporta a 2-8 grados C en un enfriador validado a Duke y se libera al Laboratorio de Células Madre. El personal de Duke transportará el enfriador que contiene el producto ALD-601 a la sala de ultrasonido, donde el equipo médico permitirá que el ALD-601 se caliente brevemente a temperatura ambiente antes de la inyección. Bajo guía ecográfica continua, se utilizará una aguja de procedimiento de calibre 22 X 5 pulgadas para perforar la cavidad peritoneal fetal. Se instilarán 100 microlitros de solución salina estéril para confirmar la colocación intraperitoneal. Luego, la infusión de células madre se inyectará a través de la aguja, seguida de la inyección de 200 microlitros (espacio muerto de la aguja: 60 microlitros) para desplazar todas las células del espacio muerto de la aguja. Se realizará una ecografía 24 horas después para confirmar la viabilidad fetal. Se realizará una ecografía posterior a las 18 semanas de gestación para confirmar la viabilidad, evaluar la anatomía fetal detallada y el crecimiento fetal en serie adecuado.