Greffe de sang de cordon ombilical fœtal (UCB) pour les maladies de surcharge lysosomale (IUHST-001)

Le but de cette étude est de déterminer l'innocuité de la thérapie par cellules souches fœtales du premier trimestre à l'aide de cellules souches et progénitrices non apparentées partiellement compatibles HLA dérivées de sang de cordon ombilical humain pour le traitement de certaines maladies de surcharge lysosomale connues pour causer des maladies graves et irréversibles. handicap neurologique dans la petite enfance et qui sont mortelles dans l'enfance.

Cette étude est conçue comme un essai prospectif monocentrique ouvert de phase I. Il est conçu pour évaluer la sécurité et la faisabilité de l'administration de cellules ALD-601 UCB aux fœtus du premier trimestre connus pour être atteints d'une maladie mortelle de surcharge lysosomale. La taille de l'échantillon est de 12 patients inscrits dans des cohortes de taille 3. Les mesures de sécurité seront surveillées par un DSMC indépendant dans chacune des 4 cohortes avant de passer à la cohorte suivante.

Les parents biologiques envisagés pour une thérapie subiront un test HLA, une analyse de mutation pour l'état de la maladie et des conseils psychologiques. Les mères auront des échographies pour l'âge gestationnel et des tests de villosités choriales pour l'analyse des mutations pour Krabbe, MLD, Tay Sachs, Sandhoff ou PMD (selon le cas). Une longueur couronne-croupe sera déterminée la veille du transfert prévu. Le poids fœtal sera calculé à partir de la formule : Y (kg) = (2,9026 x 10-1) (X 2,6528). Le poids fœtal estimé à cet âge gestationnel serait d'environ 0,5 once ou 14 grammes. Un sang de cordon ombilical non apparenté convenablement apparié sera identifié et la portion de 20 % sera manipulée pour l'isolement des cellules ALD-601. Les cellules ALD-601 (ALDHbr) sont isolées par tri en flux à grande vitesse sur le FACSAria (BD Biosciences). À la fin du tri, les cellules ALD-601 UCB sont comptées, la viabilité est déterminée et la composition cellulaire de l'échantillon est mesurée par cytométrie en flux analytique à l'aide d'anticorps de fluorescence contre le marqueur de lignée pour les lymphocytes T, les granulocytes, les monocytes et les érythrocytes. Le contenu des cellules ALDHbr est également confirmé par cytométrie en flux analytique. Une dose de 1 x 105 - 2 x 106 cellules/kg de poids fœtal estimé est mise en suspension dans 300 microlitres de Cellgenix Stem Cell Medium (CellGenix, Inc.). Les critères de libération permettront un maximum de 5 x 104 lymphocytes T/kg. Si l'échantillon trié contient plus de 5 x 104 cellules T/kg, il est trié à nouveau à l'aide du FACSAria et réévalué pour le nombre de cellules, la viabilité et le contenu cellulaire. Les tests de stérilité comprendront les cultures Bac-T/ALERT, la mesure des endotoxines (LAL) et la coloration de Gram. Après avoir satisfait aux critères de libération du produit, l'ALD-601 est transporté à 2-8 degrés C dans une glacière validée jusqu'à Duke et envoyé au laboratoire de cellules souches. Le personnel de Duke transportera la glacière contenant le produit ALD-601 vers la salle d'échographie, où l'équipe médicale permettra à l'ALD-601 de se réchauffer brièvement à température ambiante avant l'injection. Sous guidage échographique continu, une aiguille de procédure de calibre 22 X 5 pouces sera utilisée pour percer la cavité péritonéale fœtale. 100 microlitres de solution saline stérile seront instillés pour confirmer le placement intrapéritonéal. La perfusion de cellules souches sera ensuite injectée à travers l'aiguille suivie de l'injection de 200 microlitres (espace mort de l'aiguille : 60 microlitres) pour déplacer toutes les cellules de l'espace mort de l'aiguille. Une échographie sera effectuée 24 heures plus tard pour confirmer la viabilité fœtale. Une échographie ultérieure sera entreprise à 18 semaines de gestation pour confirmer la viabilité, évaluer l'anatomie fœtale détaillée et la croissance fœtale en série adéquate.