Transplante Fetal de Sangue do Cordão Umbilical (UCB) para Doenças de Armazenamento Lisossomal (IUHST-001)

O objetivo deste estudo é determinar a segurança da terapia com células-tronco fetais no primeiro trimestre usando células-tronco e progenitoras de doadores não aparentados parcialmente compatíveis com HLA derivadas do sangue do cordão umbilical humano para o tratamento de doenças de armazenamento lisossômico selecionadas que são conhecidas por causar graves e irreversíveis deficiência neurológica na primeira infância e que são letais na infância.

Este estudo foi concebido como um estudo prospectivo de centro único aberto de fase I. Ele é projetado para avaliar a segurança e a viabilidade da administração de células ALD-601 SCU a fetos de primeiro trimestre conhecidos por serem afetados por uma doença letal de armazenamento lisossômico. O tamanho da amostra é de 12 pacientes inscritos em coortes de tamanho 3. As medidas de segurança serão monitoradas por um DSMC independente em cada uma das 4 coortes antes de prosseguir para a próxima coorte.

Os pais biológicos considerados para terapia terão testes de HLA, análise de mutação para o estado da doença e aconselhamento psicológico. As mães farão ultrassonografias para idade gestacional e teste de vilosidades coriônicas para análise de mutação para Krabbe, MLD, Tay Sachs, Sandhoff ou PMD (o que for apropriado). Um comprimento coroa-nádega será determinado um dia antes da transferência programada. O peso fetal será calculado a partir da fórmula: Y (kg) = (2,9026 x 10-1) (X 2,6528). O peso fetal estimado nessa idade gestacional seria de cerca de 0,5 onças ou 14 gramas. Um sangue de cordão umbilical não relacionado será identificado e a porção de 20% será manipulada para o isolamento de células ALD-601. Células ALD-601 (ALDHbr) são isoladas por triagem de fluxo de alta velocidade no FACSAria (BD Biosciences). Após a conclusão da triagem, as células ALD-601 SCU são contadas, a viabilidade é determinada e a composição celular da amostra é medida por citometria de fluxo analítica usando anticorpos de fluorescência para marcador de linhagem para células T, granulócitos, monócitos e eritrócitos. O conteúdo de células ALDHbr também é confirmado por citometria de fluxo analítica. Uma dose de 1 x 105 - 2 x 106 células/kg de peso fetal estimado é suspensa em 300 microlitros de Cellgenix Stem Cell Medium (CellGenix, Inc.). Os critérios de liberação permitirão um máximo de 5 x 104 células T/kg. Se a amostra selecionada contiver mais de 5 x 104 células T/kg, ela será reclassificada usando o FACSAria e reavaliada quanto ao número de células, viabilidade e conteúdo celular. O teste de esterilidade incluirá culturas Bac-T/ALERT, medição de endotoxinas (LAL) e coloração de Gram. Depois de atender aos critérios para liberação do produto, o ALD-601 é transportado a 2-8 graus C em um refrigerador validado para a Duke e liberado para o Stem Cell Laboratory. A equipe da Duke transportará o refrigerador contendo o produto ALD-601 para a sala de ultrassom, onde a equipe médica permitirá que o ALD-601 aqueça brevemente até a temperatura ambiente antes da injeção. Sob orientação contínua de ultrassom, uma agulha de procedimento de calibre 22 x 5 polegadas será usada para perfurar a cavidade peritoneal fetal. 100 microlitros de solução salina estéril serão instilados para confirmar a colocação intraperitoneal. A infusão de células-tronco será então injetada através da agulha seguida pela injeção de 200 microlitros (espaço morto da agulha: 60 microlitros) para deslocar todas as células do espaço morto da agulha. Um ultrassom será realizado 24 horas depois para confirmar a viabilidade fetal. Um ultrassom subsequente será realizado na 18ª semana de gestação para confirmar a viabilidade, avaliar a anatomia fetal detalhada e o crescimento fetal seriado adequado.