Sikiön napanuoraveren (UCB) siirto lysosomaalisia varastoinnin sairauksia varten (IUHST-001)

Tämän tutkimuksen tarkoituksena on määrittää ensimmäisen raskauskolmanneksen sikiön kantasoluhoidon turvallisuus käyttämällä riippumattomien luovuttajien osittain HLA-yhteensopivia kanta- ja progenitorisoluja, jotka ovat peräisin ihmisen napanuoraverestä valittujen lysosomaalisten varastointisairauksien hoitoon, joiden tiedetään aiheuttavan vakavia ja peruuttamattomia. neurologiset vammat varhaislapsuudessa ja jotka ovat tappavia lapsuudessa.

Tämä tutkimus on suunniteltu tulevaksi vaiheen I avoimeksi yksikeskustutkimukseksi. Se on suunniteltu arvioimaan ALD-601 UCB -solujen turvallisuutta ja toteutettavuutta ensimmäisen raskauskolmanneksen sikiöille, joilla tiedetään olevan tappava lysosomaalista varastointisairaus. Otoskoko on 12 potilasta, jotka on otettu mukaan koon 3 kohortteihin. Riippumaton DSMC valvoo turvatoimenpiteitä kussakin neljästä kohortista ennen siirtymistä seuraavaan kohorttiin.

Terapiaa harkittaville biologisille vanhemmille tehdään HLA-testaus, sairauden tilan mutaatioanalyysi ja psykologinen neuvonta. Äideille tehdään ultraäänitutkimukset gestaatioiän ja suonivilkkutestit Krabben, MLD:n, Tay Sachsin, Sandhoffin tai PMD:n mutaatioanalyysiä varten (mikä tahansa sopiva). Kruunun ja lantion pituus määräytyy aikataulun mukaista siirtoa edeltävänä päivänä. Sikiön paino lasketaan kaavasta: Y (kg) = (2,9026 x 10-1) (X 2,6528). Sikiön arvioitu paino tuossa raskausiässä olisi noin 0,5 unssia tai 14 grammaa. Sopivasti yhteensopimaton napanuoraveri tunnistetaan ja 20 %:n osaa käsitellään ALD-601-solujen eristämiseksi. ALD-601 (ALDHbr) -solut eristetään nopealla virtauslajittelulla FACSArialla (BD Biosciences). Lajittelun päätyttyä ALD-601 UCB -solut lasketaan, elinkelpoisuus määritetään ja näytteen solukoostumus mitataan analyyttisellä virtaussytometrialla käyttämällä fluoresenssivasta-aineita T-solujen, granulosyyttien, monosyyttien ja erytrosyyttien linjamerkkiaineelle. ALDHbr-solujen pitoisuus vahvistetaan myös analyyttisellä virtaussytometrialla. Annos 1 x 105 - 2 x 106 solua/kg arvioitua sikiön painoa suspendoidaan 300 mikrolitraan Cellgenix Stem Cell Mediumia (CellGenix, Inc.). Vapautumiskriteerit sallivat enintään 5 x 104 T-solua/kg. Jos lajiteltu näyte sisältää enemmän kuin 5 x 104 T-solua/kg, se lajitellaan uudelleen käyttämällä FACSAriaa ja arvioidaan uudelleen solujen lukumäärän, elinkelpoisuuden ja solusisällön suhteen. Steriiliystesteihin kuuluvat Bac-T/ALERT-viljelmät, endotoksiinimittaus (LAL) ja gramvärjäys. Tuotteen vapauttamiskriteerien täyttymisen jälkeen ALD-601 kuljetetaan 2-8 C:ssa validoidussa jäähdyttimessä Dukeen ja luovutetaan kantasolulaboratorioon. Duken henkilökunta kuljettaa ALD-601-tuotteen sisältävän jäähdyttimen ultraääniosastolle, jossa lääkintäryhmä antaa ALD-601:n lämmetä hetken huoneenlämpöön ennen injektiota. Jatkuvassa ultraääniohjauksessa sikiön peritoneaaliontelon puhkaisemiseen käytetään 22 gaugen X 5 tuuman toimenpideneulaa. 100 mikrolitraa steriiliä suolaliuosta tiputetaan vatsaontelonsisäisen asettamisen varmistamiseksi. Kantasoluinfuusio ruiskutetaan sitten neulan läpi, minkä jälkeen ruiskutetaan 200 mikrolitraa (neulan kuollut tila: 60 mikrolitraa) kaikkien solujen syrjäyttämiseksi neulan kuolleesta tilasta. Ultraääni tehdään 24 tunnin kuluttua sikiön elinkelpoisuuden varmistamiseksi. Seuraava ultraääni tehdään 18 raskausviikolla elinkelpoisuuden vahvistamiseksi, sikiön yksityiskohtaisen anatomian ja riittävän sikiön sarjakasvun arvioimiseksi.