Transplantation von fötalem Nabelschnurblut (UCB) bei lysosomalen Speicherkrankheiten (IUHST-001)

Der Zweck dieser Studie ist die Bestimmung der Sicherheit einer Therapie mit fötalen Stammzellen im ersten Trimenon unter Verwendung von nicht verwandten, teilweise HLA-übereinstimmenden Stamm- und Vorläuferzellen aus menschlichem Nabelschnurblut zur Behandlung ausgewählter lysosomaler Speicherkrankheiten, von denen bekannt ist, dass sie schwere und irreversible Ursachen haben neurologische Behinderung in der frühen Kindheit und die in der Kindheit tödlich sind.

Diese Studie ist als prospektive, offene Single-Center-Studie der Phase I konzipiert. Es wurde entwickelt, um die Sicherheit und Durchführbarkeit der Verabreichung von ALD-601 UCB-Zellen an Föten im ersten Trimester zu bewerten, von denen bekannt ist, dass sie von einer tödlichen lysosomalen Speicherkrankheit betroffen sind. Die Stichprobengröße beträgt 12 Patienten, die in Kohorten der Größe 3 eingeschrieben sind. Sicherheitsmaßnahmen werden von einem unabhängigen DSMC in jeder der 4 Kohorten überwacht, bevor mit der nächsten Kohorte fortgefahren wird.

Biologische Eltern, die für eine Therapie in Betracht gezogen werden, werden HLA-Tests, Mutationsanalysen für den Krankheitsstatus und psychologische Beratung erhalten. Mütter werden Ultraschall für das Gestationsalter und Chorionzottentests zur Mutationsanalyse für Krabbe, MLD, Tay Sachs, Sandhoff oder PMD (je nachdem, was angemessen ist) haben. Eine Scheitel-Steiß-Länge wird am Tag vor dem geplanten Transfer ermittelt. Das fötale Gewicht wird aus folgender Formel berechnet: Y (kg) = (2,9026 x 10-1) (X 2,6528). Das geschätzte fötale Gewicht in diesem Gestationsalter würde etwa 0,5 Unzen oder 14 Gramm betragen. Ein passend passendes, nicht verwandtes Nabelschnurblut wird identifiziert und der 20%-Anteil wird für die Isolierung von ALD-601-Zellen manipuliert. ALD-601 (ALDHbr)-Zellen werden durch Hochgeschwindigkeitsflusssortierung auf dem FACSAria (BD Biosciences) isoliert. Nach Abschluss der Sortierung werden ALD-601 UCB-Zellen gezählt, die Lebensfähigkeit bestimmt und die Zellzusammensetzung der Probe durch analytische Durchflusszytometrie unter Verwendung von Fluoreszenzantikörpern gegen Linienmarker für T-Zellen, Granulozyten, Monozyten und Erythrozyten gemessen. Der Gehalt an ALDHbr-Zellen wird auch durch analytische Durchflusszytometrie bestätigt. Eine Dosis von 1 x 105 - 2 x 106 Zellen/kg des geschätzten fötalen Gewichts wird in 300 Mikrolitern Cellgenix-Stammzellmedium (CellGenix, Inc.) suspendiert. Die Freigabekriterien lassen maximal 5 x 104 T-Zellen/kg zu. Wenn die sortierte Probe mehr als 5 x 104 T-Zellen/kg enthält, wird sie unter Verwendung von FACSAria neu sortiert und erneut auf Zellzahl, Lebensfähigkeit und Zellgehalt bewertet. Sterilitätstests umfassen Bac-T/ALERT-Kulturen, Endotoxinmessung (LAL) und Gram-Färbung. Nachdem die Kriterien für die Produktfreigabe erfüllt wurden, wird ALD-601 bei 2-8 Grad C in einem validierten Kühler zu Duke transportiert und an das Stammzelllabor abgegeben. Das Duke-Personal wird die Kühlbox mit dem ALD-601-Produkt zum Ultraschallraum transportieren, wo das medizinische Team das ALD-601 vor der Injektion kurz auf Raumtemperatur erwärmen lässt. Unter kontinuierlicher Ultraschallführung wird eine 22-Gauge-X-5-Zoll-Verfahrensnadel verwendet, um die fetale Peritonealhöhle zu punktieren. 100 Mikroliter sterile Kochsalzlösung werden instilliert, um die intraperitoneale Platzierung zu bestätigen. Die Stammzellinfusion wird dann durch die Nadel injiziert, gefolgt von der Injektion von 200 Mikrolitern (Totraum der Nadel: 60 Mikroliter), um alle Zellen aus dem Totraum der Nadel zu verdrängen. 24 Stunden später wird ein Ultraschall durchgeführt, um die Lebensfähigkeit des Fötus zu bestätigen. Ein anschließender Ultraschall wird in der 18. Schwangerschaftswoche durchgeführt, um die Lebensfähigkeit zu bestätigen, die detaillierte fetale Anatomie und ein angemessenes serielles fötales Wachstum zu beurteilen.