Przeszczep płodowej krwi pępowinowej (UCB) w przypadku lizosomalnych chorób spichrzeniowych (IUHST-001)

Celem tego badania jest określenie bezpieczeństwa terapii komórkami macierzystymi płodu pierwszego trymestru przy użyciu komórek macierzystych i progenitorowych pochodzących od niespokrewnionego dawcy, częściowo dopasowanych pod względem HLA, pochodzących z ludzkiej krwi pępowinowej, w leczeniu wybranych lizosomalnych chorób spichrzeniowych, o których wiadomo, że powodują ciężkie i nieodwracalne upośledzenie neurologiczne we wczesnym niemowlęctwie i które są śmiertelne w dzieciństwie.

To badanie zostało zaprojektowane jako prospektywne, otwarte, jednoośrodkowe badanie fazy I. Ma na celu ocenę bezpieczeństwa i możliwości podania komórek ALD-601 UCB płodom pierwszego trymestru, o których wiadomo, że są dotknięte śmiertelną lizosomalną chorobą spichrzeniową. Wielkość próby wynosi 12 pacjentów włączonych do kohort wielkości 3. Środki bezpieczeństwa będą monitorowane przez niezależny DSMC w każdej z 4 kohort przed przejściem do następnej kohorty.

Biologiczni rodzice rozważani na terapię będą mieli testy HLA, analizę mutacji pod kątem stanu choroby i poradę psychologiczną. Matki będą miały USG wieku ciążowego i badanie kosmków kosmówki w celu analizy mutacji dla Krabbe, MLD, Tay Sachs, Sandhoff lub PMD (w zależności od przypadku). Długość korony do zadu zostanie ustalona dzień przed planowanym transferem. Masa płodu zostanie obliczona ze wzoru: Y (kg) = (2,9026 x 10-1) (X 2,6528). Szacowana waga płodu w tym wieku ciążowym wynosiłaby około 0,5 uncji lub 14 gramów. Odpowiednio dopasowana niespokrewniona krew pępowinowa zostanie zidentyfikowana, a 20% porcja zostanie przetworzona w celu izolacji komórek ALD-601. Komórki ALD-601 (ALDHbr) są izolowane przez szybkie sortowanie przepływowe na FACSAria (BD Biosciences). Po zakończeniu sortowania zlicza się komórki ALD-601 UCB, określa żywotność i mierzy się skład komórkowy próbki za pomocą analitycznej cytometrii przepływowej z użyciem przeciwciał fluorescencyjnych przeciwko markerowi linii komórek T, granulocytów, monocytów i erytrocytów. Zawartość komórek ALDHbr potwierdzana jest również analityczną cytometrią przepływową. Dawkę 1 x 105 - 2 x 106 komórek/kg szacowanej masy płodu zawiesza się w 300 mikrolitrach Cellgenix Stem Cell Medium (CellGenix, Inc.). Kryteria uwalniania dopuszczają maksymalnie 5 x 104 limfocytów T/kg. Jeśli posortowana próbka zawiera więcej niż 5 x 104 limfocytów T/kg, jest ponownie sortowana przy użyciu FACSAria i ponownie oceniana pod kątem liczby komórek, żywotności i zawartości komórek. Test sterylności będzie obejmował hodowle Bac-T/ALERT, pomiar endotoksyn (LAL) i barwienie metodą Grama. Po spełnieniu kryteriów dopuszczenia produktu, ALD-601 jest transportowany w temperaturze 2-8 stopni C w zatwierdzonej chłodziarce do firmy Duke i uwalniany do Laboratorium Komórek Macierzystych. Personel firmy Duke przetransportuje schładzacz zawierający produkt ALD-601 do gabinetu USG, gdzie zespół medyczny pozwoli ALD-601 na krótko ogrzać się do temperatury pokojowej przed wykonaniem wstrzyknięcia. Pod stałą kontrolą USG, do nakłucia jamy otrzewnej płodu zostanie użyta igła zabiegowa o rozmiarze 22 x 5 cali. Zostanie wkroplonych 100 mikrolitrów sterylnej soli fizjologicznej w celu potwierdzenia umieszczenia dootrzewnowego. Wlew komórek macierzystych zostanie następnie wstrzyknięty przez igłę, po czym nastąpi wstrzyknięcie 200 mikrolitrów (martwa przestrzeń igły: 60 mikrolitrów) w celu wyparcia wszystkich komórek z martwej przestrzeni igły. USG zostanie wykonane 24 godziny później, aby potwierdzić żywotność płodu. Kolejne badanie ultrasonograficzne zostanie przeprowadzone w 18 tygodniu ciąży w celu potwierdzenia żywotności, szczegółowej oceny anatomii płodu i odpowiedniego seryjnego wzrostu płodu.