Analýza průměrného obsahu síťovaného hemoglobinu (Hb) (RetHe) u pacientů s ledvinami

Referenční rozsah Testování pro nový test RET-He bude provedeno na přebytečné krvi dostupné na náhodně vybraných anonamizovaných vzorcích získaných z denní zátěže laboratoře, jakmile budou dokončeny všechny klinicky požadované analýzy.

100 vzorků (50 mužů / 50 žen), u kterých bylo zjištěno, že mají normální parametry (jak je definováno Dacie et al, 10. vydání) a 100 vzorků (50 mužů / 50 žen), u kterých byl zjištěn nedostatek železa (jak je definováno Dacie et al, 10. vydání )budou zpracovány pro nový testovací parametr (RetHe) pod kódovaným číslem, aby se zajistilo, že nebudou zaznamenána žádná identifikační data. Vzorky budou archivovány a uloženy v laboratoři po dobu 24 hodin před běžnou likvidací v souladu s NHS Fife Waste Management Policy. Data budou analyzována pomocí párového t testu, aby se určily významné rozdíly a odvozené referenční rozmezí.

Vyhodnocení senzitivity/specifičnosti nového testu Ret He při určování deficitu železa a funkčního deficitu železa a jeho odpovědi na terapii bude testováno pomocí vzorků pacientů na hemodialýze a před dialýzou (~180 hemodialyzovaných pacientů a ~250 pacientů před dialýzou), které byly získány během jejich normální renální jednotka / klinika.

Všem pacientům, kteří souhlasí s hemodialýzou NHS Fife/před dialýzou, bude v rámci této studie přiděleno „Identifikační číslo subjektu“ (které bude uvedeno v horní části jejich formuláře souhlasu). Toto číslo použije vyšetřovatel studentů k vygenerování důvěrného kódovacího klíče, který bude uchováván odděleně od datových informací a zabezpečen na počítači chráněném heslem NHS. Tím bude zajištěna péče o osobní údaje a budou použity po celou dobu studie studentským výzkumným pracovníkem k zaznamenávání všech generovaných dat.

Pacienti budou seskupeni do kategorií, jako je Dialýza / Predialýza na kódovaném souboru SPSS (statistický software).

Všichni souhlasící pacienti budou chodit na své rutinní plánované schůzky na renální klinice jako obvykle (pro tuto pilotní studii nejsou nutné žádné další schůzky) a jejich reakce na léčbu bude sledována pomocí nového testovacího parametru RetHe ve srovnání se stávajícími používanými laboratorními testy (FBC, Ferritin a Transferrin Úrovně saturace)

Hemodialyzovaní pacienti - červen 2010, červenec 2010*, srpen 2010

(* Poznámka: V červenci 2010 je u hemodialyzovaných pacientů naplánována kontrola hladiny feritinu a saturace transferinu, a proto nebude vyžadován žádný další vzorek)

1. Rutinní venesekce vzorku EDTA (fialový vrchní) pro test plného krevního obrazu (FBC).
2. Rutinní venesekce koagulovaného (žlutého vrchního) vzorku pro biochemickou analýzu
3. Dodatečná venesekce extra žlutého vzorku pro nerutinní feritinový test (*obvykle plánováno každé 3 měsíce – rutinní datum: červenec 2010)

4. Vzorky štítků zaměstnanců renální jednotky a vyplněný formulář žádosti:

   Sekce hematologie zaškrtnutá pro: FBC (jako normální rutina), Retics (pro umožnění přidání nového testu Ret He k analýze FBC) a Feritin (dodatečná žádost v červnu a srpnu)

   Sekce biochemie zaškrtnutá pro : Všechny běžně požadované biochemické testy (jako je močovina a elektrolyty) plus další požadavek na úrovně saturace transferinu (v červnu a srpnu)

5. Vzorek a požadavky odeslané do Fife Area Lab k analýze

   Projekt bude probíhat v rámci oddělení hematologie laboratoře NHS Fife Area a bude zahrnovat využití prostor, zařízení a personálu NHS.

6. Požadavek zkontrolován na centrální recepci laboratoře (vzor a žádankový formulář označený unikátním pozitivním čárovým kódem)
7. Formuláře žádanky zaslané do centrálního vstupu žádanky a vzorky dodané do příslušných laboratoří
8. Vzorky FBC zkontrolovány před analýzou, aby se zkontrolovaly podrobnosti požadavku zadané do laboratorního hostitelského počítačového systému
9. Vzorek FBC vložený do hematologického analyzátoru Sysmex XE2100 pro testování
10. Obousměrné počítačové propojení mezi laboratorním hostitelským počítačovým systémem a analyzátorem zajišťuje testování vzorku na FBC a dodatečně požadované RETIC (analýza retikulocytů)
11. Sysmex XE2100 automaticky analyzuje vzorek na indexy červených krvinek a navíc používá fluorescenční polymethinové barvivo k barvení na obsah RNA/DNA síťovaných buněk (časné prekurzory červených krvinek). Analyzátor používá vestavěnou průtokovou cytometrii a měří dopředný rozptyl, aby oddělil buňky podle velikosti (toto se uvádí jako RBC-Y a RET-Y)
12. Software Sysmex XE2100 RETIC Master (nedávno aktualizovaný zabalený načtený do NHS Fife Analysers) používá algoritmus (RET-He = 5,5569e 0,001RET-Y) k převodu RET-Y na průměrný obsah hemoglobinu v retikulocytech (RET He), který lze zaznamenat. piktogramy.
13. Po analýze se vzorek vyjme z analyzátoru a výsledky se buď autovalidují a archivují (jsou-li výsledky v normálním rozmezí), nebo se uchovávají pro validaci kvalifikovaným biomedicínským vědcem NHS Fife.
14. Rutinně požadované výsledky FBC jsou lékařům k dispozici ve stejném časovém horizontu jako normálně (bez zpoždění kvůli dodatečné analýze RetHe)
15. Vzorek je archivován pod jejich jedinečnými identifikačními čísly čárových kódů a uchováván v laboratoři po dobu 24 hodin před běžnou likvidací v souladu se zásadami NHS Fife nakládání s odpady.
16. Nová hodnota RetHe bude uchovávána na analyzátoru Sysmex XE2100 (neaktivován jako test, který lze hlásit biomedicínským vědcům NHS Fife nebo klinickému personálu.)
17. Zkoušející student (ve stejný den jako analýza) zpětně vygeneruje pracovní seznam pro renální jednotku z hostitelského počítačového systému laboratoře, který bude uvádět: počet přijatých vzorků, čísla čárových kódů, jména pacientů.
18. Student Investigator (ve stejný den jako analýza) zpětně použije vygenerovaný pracovní seznam k vyhledání výsledků testů Ret-He v analyzátorech Sysmex XE2100 a v hostitelském počítačovém systému k vyhledání výsledků hladin feritinu a transferinu.
19. Číslo čárového kódu pacienta a výsledky jeho testů budou zpočátku zaznamenány do laboratorní příručky pro studentské vyšetřovatele (vygenerovaný pracovní seznam bude zahozen do důvěrného odpadu NHS Fife)
20. Zkoušející student zaznamená hodnoty testu do kódovaného souboru SPSS (statistický software) pro příslušnou analýzu.
21. Zkoušející zpětně porovná data testu s daty terapeutického režimu poskytnutými renální jednotkou (měsíční schůzky)

Pacienti před dialýzou: červen 2010, červenec 2010, srpen 2010

(Pozn.: Pacienti před dialýzou jsou testováni 3 měsíčně, takže během období studie by měli získat základní vzorek od každého souhlasného pacienta. Pouze ti pacienti, kteří jsou považováni za plnohodnotné železo a jsou nasazeni na 5týdenní kúru léčby železem, budou dále testováni na svých následných schůzkách, aby se změřila odpověď na terapii)

1. Rutinní venesekce vzorku EDTA (s fialovým vrcholem) pro test plného krevního obrazu (FBC), sražený (žlutý vrch) pro feritin a sražený (žlutý vrch) vzorek pro hladiny saturace transferinu

2. Vzorky štítků zaměstnanců renální jednotky a vyplněný formulář žádosti:

   Sekce hematologie zaškrtnutá pro: FBC (jako normální rutina), Retics (pro umožnění přidání nového testu Ret He do analýzy FBC) a Feritin (rutinní požadavek)

   Sekce biochemie zaškrtnuta pro : Všechny běžně požadované biochemické testy (jako je močovina a elektrolyty) plus rutinní požadavek na úrovně saturace transferinu

3. Vzorek a požadavky odeslané do Fife Area Lab k analýze

Projekt bude probíhat v rámci oddělení hematologie laboratoře NHS Fife Area a bude zahrnovat využití prostor, zařízení a personálu NHS (stejný postup jako v bodech 6 - 21 výše)