Analiza średniej zawartości hemoglobiny siatkowej (Hb) (RetHe) pacjentów z chorobami nerek

Zakres referencyjny Badanie nowego testu RET-He zostanie przeprowadzone na nadmiarze krwi dostępnej w losowo wybranych anonimowych próbkach uzyskanych w wyniku codziennego obciążenia laboratorium po zakończeniu wszystkich wymaganych klinicznie analiz.

100 próbek (50 mężczyzn / 50 kobiet) z prawidłowymi parametrami (zgodnie z definicją Dacie i in., wydanie 10) i 100 próbek (50 mężczyzn / 50 kobiet) z niedoborem żelaza (zgodnie z definicją Dacie i in., wydanie 10) ) będą przetwarzane pod kątem nowego parametru testowego (RetHe) pod zakodowanym numerem, aby zapewnić, że nie zostaną zapisane żadne dane identyfikacyjne. Próbki zostaną zarchiwizowane i będą przechowywane w laboratorium przez 24 godziny przed rutynową utylizacją zgodnie z polityką zarządzania odpadami NHS Fife. Dane zostaną przeanalizowane za pomocą sparowanego testu t w celu określenia znaczących różnic i wywnioskowania zakresu referencyjnego.

Ocena czułości/swoistości nowego testu Ret He w określaniu niedoboru żelaza i funkcjonalnego niedoboru żelaza oraz jego odpowiedzi na terapię zostanie przeprowadzona przy użyciu próbek pacjentów hemodializowanych i przed dializą (~180 pacjentów poddawanych hemodializie i ~250 pacjentów przed dializą), które są uzyskiwane podczas ich normalne wizyty w oddziale nerkowym / klinice.

W ramach tego badania wszystkim pacjentom poddanym hemodializie/przed dializą NHS Fife, którzy wyrażą zgodę, zostanie przydzielony „Numer identyfikacyjny podmiotu” (który zostanie odnotowany na górze formularza zgody). Numer ten zostanie wykorzystany przez badacza do wygenerowania poufnego klucza kodującego, który będzie przechowywany oddzielnie od informacji o danych i zabezpieczony na komputerze chronionym hasłem NHS. Zapewni to opiekę nad danymi osobowymi i będzie wykorzystywane przez badacza podczas całego badania do rejestrowania wszystkich wygenerowanych danych.

Pacjenci zostaną pogrupowani w kategorie, takie jak dializa / wstępna dializa w zakodowanym pliku SPSS (oprogramowanie statystyczne).

Wszyscy pacjenci, którzy wyrażą na to zgodę, będą normalnie uczestniczyć w rutynowych, zaplanowanych wizytach w Klinice Nefrologii (do tego badania pilotażowego nie są wymagane żadne dodatkowe wizyty), a ich odpowiedź na terapię będzie obserwowana przy użyciu nowego parametru testu RetHe w porównaniu z dotychczas stosowanymi testami laboratoryjnymi (FBC, ferrytyna i transferyna) poziomy nasycenia)

Pacjenci hemodializowani - czerwiec 2010, lipiec 2010*, sierpień 2010

(* Uwaga: w lipcu 2010 u pacjentów poddawanych hemodializie zaplanowano kontrolę poziomu nasycenia ferrytyną i transferyną, dlatego nie będzie wymagana dodatkowa próbka)

1. Rutynowa venesekcja próbki EDTA (fioletowa górna część) do testu pełnej morfologii krwi (FBC).
2. Rutynowa venesekcja skrzepniętej (żółta góra) próbki do analizy biochemicznej
3. Dodatkowa venesekcja dodatkowej żółtej próbki do nierutynowego badania ferrytyny (*zwykle zaplanowane co 3 miesiące – termin rutynowy: lipiec 2010)

4. Próbki etykiet Personelu Oddziału Nerek i pełny formularz wniosku:

   Sekcja hematologii zaznaczona dla: FBC (jako normalna rutyna), Retics (aby umożliwić dodanie nowego testu Ret He do analizy FBC) i Ferrytyny (dodatkowa prośba w czerwcu i sierpniu)

   Sekcja Biochemia zaznaczona dla: wszystkich rutynowo wymaganych testów biochemicznych (takich jak mocznik i elektrolity) plus dodatkowa prośba o poziomy nasycenia transferyny (w czerwcu i sierpniu)

5. Próbka i wnioski wysłane do laboratorium Fife Area Lab w celu analizy

   Projekt będzie realizowany w ramach Oddziału Hematologii Laboratoryjnej NHS Fife Area i będzie obejmował wykorzystanie pomieszczeń, wyposażenia i personelu NHS.

6. Zgłoszenie sprawdzane w Centralnej Recepcji Laboratorium (wzór i formularz zamówienia opatrzone unikalnym pozytywnym kodem kreskowym)
7. Formularze wniosków wysyłane do centralnego wprowadzania wniosków i dostarczane próbki do odpowiednich laboratoriów
8. Próbki FBC sprawdzone przed analizą w celu sprawdzenia szczegółów żądania wprowadzonych do systemu komputerowego hosta laboratorium
9. Próbkę FBC załadowano do analizatora hematologicznego Sysmex XE2100 w celu przetestowania
10. Dwukierunkowe łącze komputerowe między laboratoryjnym systemem komputerowym a analizatorem zapewnia badanie próbki pod kątem FBC i dodatkowo wymaganego RETIC (analiza retikulocytów)
11. Sysmex XE2100 automatycznie analizuje próbkę pod kątem wskaźników krwinek czerwonych i dodatkowo wykorzystuje fluorescencyjny barwnik polimetinowy do barwienia na zawartość RNA/DNA komórek siateczkowatych (prekursorów wczesnych krwinek czerwonych). Analizator wykorzystuje wbudowaną cytometrię przepływową i mierzy rozproszenie w przód, aby oddzielić komórki według rozmiaru (jest to zgłaszane jako RBC-Y i RET-Y)
12. Oprogramowanie Sysmex XE2100 RETIC Master (niedawno zaktualizowane, załadowane do analizatorów Fife NHS) wykorzystuje algorytm (RET-He = 5,5569e 0,001RET-Y) do przekształcenia RET-Y w raportowaną średnią zawartość hemoglobiny w retikulocytach (RET He), która jest wyrażona w pikogramy.
13. Po przeanalizowaniu próbka jest wyjmowana z analizatora, a wyniki są automatycznie sprawdzane i archiwizowane (jeśli wyniki mieszczą się w normalnym zakresie) lub przechowywane do walidacji przez wykwalifikowanego naukowca biomedycznego NHS Fife.
14. Rutynowo wymagane wyniki FBC są dostępne dla klinicystów w tym samym przedziale czasowym co normalnie (bez opóźnień dzięki dodatkowej analizie RetHe)
15. Próbki są archiwizowane pod unikalnymi identyfikującymi numerami kodów kreskowych i przechowywane w laboratorium przez 24 godziny przed rutynową utylizacją zgodnie z polityką zarządzania odpadami NHS Fife.
16. Nowa wartość RetHe będzie przechowywana w analizatorze Sysmex XE2100 (nie aktywowanym jako test podlegający zgłoszeniu do naukowców biomedycznych NHS Fife lub personelu klinicznego).
17. Student Badacz (w tym samym dniu co analiza) retrospektywnie wygeneruje listę roboczą Oddziału Nerek z Systemu Komputerowego Głównego Laboratorium, która będzie wskazywać: liczbę otrzymanych próbek, numery kodów kreskowych, nazwiska pacjentów.
18. Student-badacz (w tym samym dniu co analiza) retrospektywnie użyje wygenerowanej listy roboczej do przeszukania analizatorów Sysmex XE2100 pod kątem wyników testu Ret-He oraz systemu komputerowego hosta pod kątem wyników poziomów nasycenia ferrytyną i transferyną.
19. Numer kodu kreskowego pacjenta i wyniki jego badań zostaną początkowo zapisane w podręczniku laboratoryjnym ucznia-badacza (wygenerowana lista robocza zostanie wyrzucona do poufnych odpadów NHS Fife)
20. Student-badacz zarejestruje wartości testowe w zakodowanym pliku SPSS (oprogramowanie statystyczne) w celu odpowiedniej analizy.
21. Badacz retrospektywnie dopasuje dane testowe do danych reżimu terapeutycznego dostarczonych przez Oddział Nefrologiczny (spotkania comiesięczne)

Pacjenci przed dializami: czerwiec 2010, lipiec 2010, sierpień 2010

(Uwaga: Pacjenci przed dializą są badani co 3 miesiące, więc w okresie badania należy pobrać próbkę wyjściową od każdego wyrażającego zgodę pacjenta. Tylko ci pacjenci, których uważa się za naładowanych żelazem i którzy zostaną poddani 5-tygodniowej kuracji żelazem, zostaną poddani dalszym badaniom podczas wizyt kontrolnych w celu zmierzenia odpowiedzi na terapię)

1. Rutynowa venesekcja próbki EDTA (fioletowa górna część) do testu pełnej morfologii krwi (FBC), skrzepła (żółta górna część) do oznaczania ferrytyny i skrzepnięta (żółta górna część) do określania poziomu nasycenia transferyny

2. Próbki etykiet Personelu Oddziału Nerek i pełny formularz wniosku:

   Sekcja hematologii zaznaczona dla: FBC (jako normalna rutyna), Retics (aby umożliwić dodanie nowego testu Ret He do analizy FBC) i ferrytyny (rutynowa prośba)

   Sekcja Biochemia zaznaczona dla: wszystkich rutynowo wymaganych testów biochemicznych (takich jak mocznik i elektrolity) plus rutynowa prośba o poziomy nasycenia transferyną

3. Próbka i wnioski wysłane do laboratorium Fife Area Lab w celu analizy

Projekt będzie realizowany w ramach Oddziału Hematologii Laboratoryjnej NHS Fife Area i będzie obejmował wykorzystanie pomieszczeń, obiektów i personelu NHS (ten sam proces, co w punktach 6-21 powyżej)