Анализ среднего содержания сетчатого гемоглобина (Hb) (RetHe) у почечных пациентов

Референтный диапазон Тестирование для нового теста RET-He будет проводиться на избыточной крови, доступной в случайно выбранных анонимных образцах, полученных в результате ежедневной рабочей нагрузки лаборатории после того, как все клинически требуемые анализы будут завершены.

100 образцов (50 мужчин / 50 женщин) с нормальными параметрами (согласно определению Dacie et al., 10-е издание) и 100 образцов (50 мужчин / 50 женщин) с установленным дефицитом железа (согласно определению Dacie et al., 10-е издание) ) будет обрабатываться для нового тестового параметра (RetHe) под кодовым номером, чтобы гарантировать, что никакие идентифицирующие данные не будут записаны. Образцы будут заархивированы и храниться в лаборатории в течение 24 часов до обычной утилизации в соответствии с Политикой обращения с отходами NHS Fife. Данные будут проанализированы с использованием парного t-критерия для определения существенных различий и предполагаемого референсного диапазона.

Оценка чувствительности/специфичности нового теста Ret He при определении дефицита железа и функционального дефицита железа, а также его реакции на терапию будет проводиться с использованием образцов пациентов, находящихся на гемодиализе и перед диализом (~180 пациентов на гемодиализе и ~250 пациентов до диализа), полученных во время их нормальная почечная единица/клиника назначения.

Всем давшим согласие пациентам на гемодиализе/преддиализе NHS Fife будет присвоен «Идентификационный номер субъекта» в рамках этого исследования (который будет указан в верхней части их формы согласия). Этот номер будет использоваться студентом-исследователем для создания конфиденциального ключа кодирования, который будет храниться отдельно от информации о данных и защищен на компьютере, защищенном паролем NHS. Это обеспечит заботу о личной информации и будет использоваться студентом-исследователем на протяжении всего исследования для записи всех сгенерированных данных.

Пациенты будут сгруппированы по категориям, таким как диализ / предварительный диализ, в закодированном файле SPSS (статистическое программное обеспечение).

Все пациенты, давшие согласие, будут посещать обычные запланированные визиты в нефрологическую клинику в обычном режиме (для этого пилотного исследования дополнительные визиты не требуются), а их реакцию на терапию будут наблюдать с использованием нового параметра теста RetHe по сравнению с существующими используемыми лабораторными тестами (FBC, ферритин и трансферрин). Уровни насыщения)

Пациенты на гемодиализе - июнь 2010 г., июль 2010 г.*, август 2010 г.

(* NB: в июле 2010 г. у пациентов, находящихся на гемодиализе, запланирована проверка уровней насыщения ферритином и трансферрином, поэтому дополнительный образец не потребуется)

1. Рутинная венесекция образца ЭДТА (фиолетовая вершина) для теста полного анализа крови (FBC)
2. Рутинная венесекция образца со сгустками (с желтой вершиной) для биохимического анализа
3. Дополнительная венесекция дополнительного образца с желтой верхушкой для нестандартного теста на ферритин (* обычно проводится каждые 3 месяца - обычная дата: июль 2010 г.)

4. Образцы этикеток персонала почечного отделения и полная форма запроса:

   Раздел гематологии отмечен галочкой для: FBC (как обычно), Retics (чтобы разрешить добавление нового теста Ret He к анализу FBC) и Ferritin (дополнительный запрос в июне и августе).

   Раздел биохимии отмечен галочкой: все стандартные биохимические тесты (такие как мочевина и электролиты), а также дополнительный запрос на уровни насыщения трансферрина (в июне и августе)

5. Образец и запросы отправлены в лабораторию Fife Area для анализа

   Проект будет осуществляться в отделении гематологии лаборатории NHS Fife Area и будет включать использование помещений, оборудования и персонала NHS.

6. Заявка проверяется в центральной приемной лаборатории (образец и форма заявки, помеченные уникальным положительным штрих-кодом)
7. Бланки запросов отправляются в центральный ввод запросов, а образцы доставляются в соответствующие лаборатории.
8. Образцы FBC проверяются перед анализом для проверки сведений о запросе, введенных в компьютерную систему лаборатории.
9. Образец FBC загружается в гематологический анализатор Sysmex XE2100 для тестирования
10. Двунаправленная компьютерная связь между компьютерной системой лаборатории и анализатором обеспечивает тестирование образца на FBC и дополнительный запрос RETIC (анализ ретикулоцитов).
11. Sysmex XE2100 автоматически анализирует образец на индексы эритроцитов и дополнительно использует флуоресцентный полиметиновый краситель для определения содержания РНК/ДНК в сетчатых клетках (ранние предшественники эритроцитов). Анализатор использует встроенную проточную цитометрию и измеряет прямое рассеяние для отдельных клеток по размеру (обозначается как RBC-Y и RET-Y).
12. Программное обеспечение Sysmex XE2100 RETIC Master (недавно обновленное, загруженное в анализаторы NHS Fife) использует алгоритм (RET-He = 5,5569e 0,001RET-Y) для преобразования RET-Y в регистрируемое среднее содержание гемоглобина в ретикулоцитах (RET He), которое выражается в пикограммы.
13. Проанализированный образец удаляется из анализатора, а результаты либо автоматически проверяются и архивируются (если результаты находятся в пределах нормы), либо сохраняются для проверки квалифицированным ученым-биомедиком NHS Fife.
14. Стандартно запрашиваемые результаты FBC доступны для клиницистов в те же сроки, что и обычно (без задержки из-за дополнительного анализа RetHe).
15. Образец архивируется под уникальным идентификационным номером штрих-кода и хранится в лаборатории в течение 24 часов до обычной утилизации в соответствии с Политикой обращения с отходами NHS Fife.
16. Новое значение RetHe будет храниться на анализаторе Sysmex XE2100 (не активированном в качестве теста, подлежащего отчету перед биомедицинскими учеными NHS Fife или клиническим персоналом).
17. Студент-исследователь (в тот же день, что и анализ) ретроспективно сгенерирует рабочий список почечных отделений из главной компьютерной системы лаборатории, в котором будут указаны: количество полученных образцов, номера штрих-кодов, имена пациентов.
18. Студент-исследователь (в день проведения анализа) ретроспективно использует созданный рабочий список для поиска в анализаторах Sysmex XE2100 результатов теста Ret-He и в системе главного компьютера для результатов уровней насыщения ферритином и трансферрином.
19. Номер штрих-кода пациента и результаты его анализов первоначально будут записаны в лабораторном справочнике студентов-исследователей (сгенерированный рабочий список будет удален в конфиденциальные отходы NHS Fife).
20. Студент-исследователь запишет результаты теста в закодированный файл SPSS (статистическое программное обеспечение) для соответствующего анализа.
21. Исследователь будет ретроспективно сопоставлять данные испытаний с данными о режиме терапии, предоставленными нефрологическим отделением (ежемесячные встречи).

Пациенты до диализа: июнь 2010 г., июль 2010 г., август 2010 г.

(Примечание: пациенты до диализа проходят тестирование 3 раза в месяц, поэтому в течение периода исследования необходимо получить базовый образец от каждого согласившегося пациента. Только те пациенты, которые считаются обеспеченными железом и которым назначен 5-недельный курс терапии железом, будут дополнительно проверены при последующих посещениях, чтобы измерить реакцию на терапию)

1. Рутинная венесекция образца с ЭДТА (фиолетовая вершина) для теста полного анализа крови (FBC), сгустков (желтая вершина) для ферритина и свернувшегося (желтая вершина) образца для уровней насыщения трансферрина

2. Образцы этикеток персонала почечного отделения и полная форма запроса:

   Раздел гематологии отмечен для: FBC (как обычно), Retics (чтобы разрешить добавление нового теста Ret He к анализу FBC) и Ferritin (рутинный запрос).

   Раздел «Биохимия» отмечен галочкой: все стандартные биохимические тесты (такие как мочевина и электролиты), а также стандартные запросы на уровни насыщения трансферрина.

3. Образец и запросы отправлены в лабораторию Fife Area для анализа

Проект будет осуществляться в отделении гематологии лаборатории NHS Fife Area и будет включать использование помещений, оборудования и персонала NHS (процесс тот же, что и в пунктах 6–21 выше).