Analyse de la teneur moyenne en hémoglobine réticulée (Hb) (RetHe) des patients rénaux

Gamme de référence Les tests pour le nouveau test RET-He seront effectués sur un excès de sang disponible sur des échantillons anonymisés sélectionnés au hasard obtenus à partir de la charge de travail quotidienne du laboratoire une fois que toutes les analyses cliniquement demandées auront été effectuées.

100 échantillons (50 hommes/50 femmes) dont les paramètres sont normaux (tel que défini par Dacie et al, 10e édition) et 100 échantillons (50 hommes/50 femmes) qui présentent une carence en fer (selon la définition de Dacie et al, 10e édition) ) sera traité pour le nouveau paramètre de test (RetHe) sous un numéro codé pour s'assurer qu'aucune donnée d'identification n'est enregistrée. Les échantillons seront archivés et conservés dans le laboratoire pendant 24 heures avant l'élimination de routine conformément à la politique de gestion des déchets du NHS Fife. Les données seront analysées à l'aide d'un test t apparié pour déterminer les différences significatives et la plage de référence déduite déduite.

L'évaluation de la sensibilité / spécificité du nouveau test Ret He pour déterminer la carence en fer et la carence en fer fonctionnelle et sa réponse à la thérapie seront testées à l'aide d'échantillons de patients en hémodialyse et en pré-dialyse (~ 180 patients en hémodialyse et ~ 250 patients en pré-dialyse) qui sont obtenus pendant leurs rendez-vous normaux à l'unité de néphrologie ou à la clinique.

Tous les patients consentants du NHS Fife en hémodialyse/prédialyse se verront attribuer un « numéro d'identification du sujet » dans le cadre de cette étude (qui sera noté en haut de leur formulaire de consentement). Ce numéro sera utilisé par l'étudiant enquêteur pour générer une clé de codage confidentielle qui sera conservée séparément des informations sur les données et sécurisée sur un ordinateur protégé par mot de passe du NHS. Cela garantira la protection des informations personnelles et sera utilisé tout au long de l'étude par l'étudiant chercheur pour enregistrer toutes les données générées.

Les patients seront regroupés en catégories telles que Dialyse / Pré dialyse sur un fichier SPSS (logiciel statistique) codé.

Tous les patients consentants assisteront à leurs rendez-vous de routine à la clinique rénale comme d'habitude (aucun rendez-vous supplémentaire n'est nécessaire pour cette étude pilote) et leur réponse au traitement sera observée à l'aide du nouveau paramètre de test RetHe par rapport aux tests de laboratoire existants utilisés (FBC, ferritine et transferrine niveaux de saturation)

Patients en hémodialyse - juin 2010, juillet 2010*, août 2010

(* NB : En juillet 2010, les patients sous hémodialyse doivent faire vérifier leurs taux de saturation en ferritine et en transferrine et, par conséquent, aucun échantillon supplémentaire ne sera requis)

1. Veesection de routine de l'échantillon EDTA (en haut violet) pour le test de numération globulaire complète (FBC)
2. Veinesection de routine de l'échantillon coagulé (en haut jaune) pour l'analyse biochimique
3. Section veineuse supplémentaire d'un échantillon à dessus jaune supplémentaire pour le test de ferritine non routinier (*généralement programmé tous les 3 mois - date d'échéance de routine : juillet 2010)

4. Le personnel de l'unité rénale doit étiqueter les échantillons et remplir le formulaire de demande :

   Section Hématologie cochée pour : FBC (comme routine normale), Retics (pour permettre l'ajout d'un nouveau test Ret He à l'analyse FBC) et Ferritin (demande supplémentaire en juin et août)

   Section biochimie cochée pour : tous les tests biochimiques demandés régulièrement (tels que l'urée et les électrolytes) plus une demande supplémentaire pour les niveaux de saturation de la transferrine (en juin et août)

5. Échantillon et demandes envoyés au laboratoire de la région de Fife pour analyse

   Le projet sera réalisé au sein du département d'hématologie du laboratoire de la région de NHS Fife et impliquera l'utilisation des locaux, des installations et du personnel du NHS.

6. Demande vérifiée à la réception centrale du laboratoire (échantillon et formulaire de demande étiquetés avec une identification par code-barres positif unique)
7. Formulaires de demande envoyés au centre de saisie des demandes et échantillons livrés aux laboratoires appropriés
8. Échantillons FBC vérifiés avant l'analyse pour vérifier les détails de la demande entrés dans le système informatique hôte du laboratoire
9. Échantillon FBC chargé sur l'analyseur d'hématologie Sysmex XE2100 pour les tests
10. La liaison informatique bidirectionnelle entre le système informatique hôte du laboratoire et l'analyseur garantit que l'échantillon est testé pour le FBC et le RETIC (analyse des réticulocytes) demandé en plus
11. Le Sysmex XE2100 analyse automatiquement l'échantillon pour les indices de globules rouges et utilise en outre un colorant polyméthine fluorescent pour colorer la teneur en ARN/ADN des cellules réticulées (précurseurs précoces des globules rouges). L'analyseur utilise la cytométrie en flux intégrée et mesure la diffusion vers l'avant pour séparer les cellules par taille (ceci est signalé comme RBC-Y et RET-Y)
12. Le logiciel Sysmex XE2100 RETIC Master (récemment mis à jour et chargé sur les analyseurs NHS Fife) utilise un algorithme (RET-He = 5,5569e 0,001RET-Y) pour convertir RET-Y en une teneur moyenne en hémoglobine réticulocytaire rapportable (RET He) exprimée en picogrammes.
13. Une fois analysé, l'échantillon est retiré de l'analyseur et les résultats sont soit validés automatiquement et archivés (si les résultats se situent dans la plage normale), soit conservés pour validation par un scientifique biomédical qualifié du NHS Fife.
14. Les résultats FBC systématiquement demandés sont disponibles pour les cliniciens dans le même délai que la normale (pas de retard dû à une analyse RetHe supplémentaire)
15. L'échantillon est archivé sous leurs numéros de code-barres d'identification uniques et conservé dans le laboratoire pendant 24 heures avant l'élimination de routine conformément à la politique de gestion des déchets du NHS Fife.
16. La nouvelle valeur RetHe sera conservée sur l'analyseur Sysmex XE2100 (non activé en tant que test à signaler aux scientifiques biomédicaux du NHS Fife ou au personnel clinique.)
17. L'étudiant chercheur générera rétrospectivement (le jour même de l'analyse) une liste de travail de l'unité rénale à partir du système informatique hôte du laboratoire qui indiquera : le nombre d'échantillons reçus, les numéros de code à barres, les noms des patients.
18. L'étudiant chercheur utilisera rétrospectivement (le même jour que l'analyse) la liste de travail générée pour rechercher les résultats des tests Ret-He dans les analyseurs Sysmex XE2100 et le système informatique hôte pour les résultats des niveaux de saturation de la ferritine et de la transferrine.
19. Le numéro de code-barres du patient et les résultats de ses tests seront initialement enregistrés dans le manuel de laboratoire des étudiants enquêteurs (la liste de travail générée sera jetée dans les déchets confidentiels du NHS Fife)
20. L'étudiant chercheur enregistrera les valeurs du test dans un fichier codé SPSS (logiciel statistique) pour une analyse appropriée.
21. L'investigateur comparera rétrospectivement les données du test avec les données du régime thérapeutique fournies par l'unité rénale (réunions mensuelles)

Patients en prédialyse : juin 2010, juillet 2010, août 2010

(NB : les patients en prédialyse sont testés tous les 3 mois. Par conséquent, au cours de la période d'étude, ils doivent obtenir un échantillon de référence de chaque patient consentant. Seuls les patients qui sont considérés comme remplis de fer et qui suivent une cure de fer de 5 semaines seront testés plus avant lors de leurs rendez-vous de suivi afin de mesurer la réponse au traitement)

1. Section veineuse de routine d'un échantillon EDTA (à tête violette) pour le test de numération globulaire complète (FBC), coagulé (à tête jaune) pour la ferritine et d'un échantillon coagulé (à tête jaune) pour les niveaux de saturation de la transferrine

2. Le personnel de l'unité rénale doit étiqueter les échantillons et remplir le formulaire de demande :

   Section Hématologie cochée pour : FBC (comme routine normale), Retics (pour permettre l'ajout d'un nouveau test Ret He à l'analyse FBC) et Ferritine (demande de routine)

   Section de biochimie cochée pour : tous les tests de biochimie demandés de manière routinière (tels que l'urée et les électrolytes) plus la demande de routine pour les niveaux de saturation de la transferrine

3. Échantillon et demandes envoyés au laboratoire de la région de Fife pour analyse

Le projet sera réalisé au sein du département d'hématologie du laboratoire de la région de NHS Fife et impliquera l'utilisation des locaux, des installations et du personnel du NHS (même processus que les points 6 à 21 ci-dessus)