Pozorování na Treg u pacientů s uveitidou (OTUP)

Uveitida popisuje zánět, který existuje v uveálním traktu, ale průběh onemocnění má tak rozmanité projevy. Uveitida (nitrooční zánětlivá onemocnění) zahrnuje onemocnění ohrožující zrak, jako je Behcetova choroba, ptačí retinochoroidopatie, Vogt-Koyanagi-Harada, sympatická oftalmie a oční sarkoidóza, a může být infekční nebo autoimunitní etiologie.

CD4+ CD25+ Tr buňky hrají klíčovou roli v udržování periferní autotolerance inhibicí aktivace a proliferace nereaktivních T buněk. Kromě přímého supresorového účinku na CD4+CD25+ Tr buňky. CD4+CD25+ Tr buňky mohou regulovat imunitní odpověď prostřednictvím dendritických buněk. Podobně jako cytotoxické T-lymfocyty a přirozené zabíječské buňky vykazují aktivované lidské CD4+CD25+ Tr buňky cytotoxicitu závislou na perforinu proti autologní cílové buňce, včetně aktivovaných CD4+ a CD8+ T buněk.

Experimentální autoimunitní uveoretinitida (EAU) je modelem uveitidy. Regulační T buňky u uveitidy jsou v současnosti považovány za etiologické agens uveitidy, protože hladiny IFN-γ, IL-2 (interleukin-2), TNF (tumor nekrotizujícího faktoru alfa) jsou v sítnici během uveitidy zvýšené po stimulaci IL- 2 exprese byla upregulována v PBMC (mononukleární buňka periferní krve) zdravých subjektů a pacientů se skleritidou nebo uveitidou. Pomocí ELISA jsme potvrdili, že IL-2 indukoval sekreci proteinu v lidských PBMC a v myších CD4+T buňkách. Experiment zjistil, pomocí testu intracelulární cytokinové analýzy, že buňky exprimující IFN-y,IL-2,TNF byly převážně CD4+T buňky s paměťovým fenotypem. V souladu s našimi údaji o RNA bylo procento CD4+T buněk vyšší u pacientů se skleritidou než u zdravých subjektů.

Analyzovali jsme periferní krev třiceti pacientů s uveitidou zařazených do klinických studií oftalmologického oddělení nemocnice Xijing. Demografie pacientů, včetně věku, pohlaví, diagnózy a léků v době odběru vzorků.

Popis biovzorku:

Experimentální: Droga: prednison tvrdí, že 1-1,5 mg/kg.d. Experimentální: B Droga: methotrexát přesvědčí 7,5-15 mg/w, směs prednison přesvědčí 0,5-1 mg/kg.d Metody CD4+CD25+ Tr buňky, CTLA-4 a intracelulární cytokinová analýza test, že buňky exprimující IFN-y,IL-2,TNF byly měřeny u 30 pacientů s uveitidou před a po 1 měsíci, 3 měsících prednisonu a methotrexátu.

Cytokinové testy. Pro detekci intracelulárních cytokinů byly CD4+T buňky kultivovány, jak je uvedeno výše, a restimulovány po dobu 5 hodin s 1 mg/ml forbol 12-myristát 13-acetátu (PMA) a ionomycinu (1 mg/ml) v přítomnosti Golgistopu, přidali jsme protilátky (IFN -y,IL-2,TNF). Provedli jsme barvení cytokinů pomocí BD Biosciences a vzorky analyzovali průtokovou cytometrií.