Observação da Treg em Pacientes com Uveíte (OTUP)

A uveíte descreve a inflamação que existe no trato uveal, mas o curso da doença tem uma variedade de manifestações. A uveíte (doenças inflamatórias intraoculares) inclui doenças que ameaçam a visão, como doença de Behçet, retinocoroidopatia tipo birdshot, Vogt-Koyanagi-Harada, oftalmia simpática e sarcoidose ocular, podendo ser de etiologia infecciosa ou autoimune.

As células Tr CD4+ CD25+ desempenham um papel fundamental na manutenção da autotolerância periférica, inibindo a ativação e proliferação de células T não reativas. Além de um efeito supressor direto nas células Tr CD4+CD25+. As células Tr CD4+CD25+ podem regular a resposta imune por meio de células dendríticas. Assim como os linfócitos T citotóxicos e as células assassinas naturais, as células Tr CD4+CD25+ humanas ativadas exibem citotoxicidade dependente de perforina contra células-alvo autólogas, incluindo células T CD4+ e CD8+ ativadas.

A uveoretinite autoimune experimental (EAU) é um modelo de uveíte. Atualmente, acredita-se que as células T reguladoras na uveíte sejam o agente etiológico da uveíte porque os níveis de IFN-γ, IL-2 (interleucina-2), TNF (fator de necrose tumoral alfa) são elevados na retina durante a uveíte Após estimulação com IL- 2 foi regulada positivamente em PBMC (célula mononuclear do sangue periférico) de indivíduos saudáveis ​​e pacientes com esclerite ou uveíte. Por ELISA, confirmamos que a IL-2 induziu a secreção da proteína em PBMC humanas e em células CD4+T de camundongos. O experimento descobriu, por um ensaio de análise de citocinas intracelulares, que as células que expressam IFN-γ,IL-2,TNF eram predominantemente células CD4+T com um fenótipo de memória. Consistente com nossos dados de RNA, a porcentagem de células T CD4+ foi maior em pacientes com esclerite do que em indivíduos saudáveis.

Analisamos o sangue periférico de trinta pacientes com uveíte inscritos nos ensaios clínicos do Departamento de Oftalmologia do Hospital Xijing. Os dados demográficos dos pacientes, incluindo idade, sexo, diagnóstico e medicamentos no momento da coleta da amostra.

Descrição do bioespécime:

Experimental: Uma droga: prednisona professa convencer 1-1,5mg/Kg.d Experimental: Droga B: metotrexato professa convencer 7,5-15mg/w, mistura de prednisona professa convencer 0,5-1mg/Kg.d Métodos Células Tr CD4+CD25+, CTLA-4 e um ensaio de análise de citocina intracelular que as células que expressam IFN-γ,IL-2,TNF foram medidas em 30 pacientes com uveíte antes e após 1 mês, 3 meses de prednisona e metotrexato.

Ensaios de citocinas. Para detecção de citocinas intracelulares, as células CD4+T foram cultivadas conforme indicado acima e reestimuladas por 5h com 1mg/ml de forbol 12-miristato 13-acetato (PMA) e ionomicina (1mg/ml) na presença de Golgistop, adicionamos anticorpos (IFN -γ,IL-2,TNF). Realizamos coloração de citocinas usando BD Biosciences e analisamos amostras por citometria de fluxo.