Beobachtung des Treg bei Uveitis-Patienten (OTUP)

Unter Uveitis versteht man eine Entzündung der Uvealbahn, deren Krankheitsverlauf jedoch sehr vielfältig ist. Uveitis (intraokulare entzündliche Erkrankungen) umfasst sehkraftbedrohende Erkrankungen wie Morbus Behcet, Birdshot-Retinochoroidopathie, Vogt-Koyanagi-Harada, sympathische Ophthalmie und Augensarkoidose und kann eine infektiöse oder autoimmune Ätiologie haben.

CD4+ CD25+ Tr-Zellen spielen eine Schlüsselrolle bei der Aufrechterhaltung der peripheren Selbsttoleranz, indem sie die Aktivierung und Proliferation unreaktiver T-Zellen hemmen. Zusätzlich zu einer direkten Suppressorwirkung auf CD4+CD25+ Tr-Zellen. CD4+CD25+-Tr-Zellen können die Immunantwort durch dendritische Zellen regulieren. Wie zytotoxische T-Lymphozyten und natürliche Killerzellen zeigen aktivierte menschliche CD4+CD25+-Tr-Zellen eine Perforin-abhängige Zytotoxizität gegenüber autologen Zielzellen, einschließlich aktivierter CD4+- und CD8+-T-Zellen.

Die experimentelle autoimmune Uveoretinitis (EAU) ist ein Modell für Uveitis. Derzeit wird angenommen, dass regulatorische T-Zellen in der Uveitis der ätiologische Auslöser der Uveitis sind, da die Spiegel von IFN-γ, IL-2 (Interleukin-2) und TNF (Tumornekrosefaktor Alpha) in der Netzhaut während der Uveitis erhöht sind. Nach Stimulation mit IL- Die 2-Expression war in PBMC (periphere mononukleäre Blutzellen) gesunder Probanden und Patienten mit Skleritis oder Uveitis hochreguliert. Durch ELISA bestätigten wir, dass IL-2 die Sekretion des Proteins in menschlichen PBMC und in CD4+T-Zellen der Maus induziert. Das Experiment ergab durch einen intrazellulären Zytokinanalysetest, dass es sich bei den IFN-γ,IL-2,TNF-exprimierenden Zellen überwiegend um CD4+T-Zellen mit einem Gedächtnisphänotyp handelte. In Übereinstimmung mit unseren RNA-Daten war der Prozentsatz an CD4+T-Zellen bei Skleritis-Patienten höher als bei gesunden Probanden.

Wir analysierten das periphere Blut von dreißig Uveitis-Patienten, die an klinischen Studien der Abteilung für Augenheilkunde des Xijing-Krankenhauses teilnahmen. Die demografischen Daten der Patienten, einschließlich Alter, Geschlecht, Diagnose und Medikamente zum Zeitpunkt der Probenentnahme.

Beschreibung der Bioprobe:

Experimentell: Ein Medikament: Prednison soll 1-1,5 mg/kg.d betragen Experimentell: B-Medikament: Methotrexat soll 7,5–15 mg/Tag betragen, Prednison soll 0,5–1 mg/kg/Tag betragen Methoden CD4+CD25+ Tr-Zellen, CTLA-4 und ein intrazellulärer Zytokinanalysetest, bei dem die IFN-γ,IL-2,TNF-exprimierenden Zellen bei 30 Uveitis-Patienten vor und nach 1 Monat, 3 Monaten Prednison und Methotrexat gemessen wurden.

Zytokintests. Für den intrazellulären Zytokinnachweis wurden CD4+T-Zellen wie oben angegeben kultiviert und 5 Stunden lang mit 1 mg/ml Phorbol-12-myristat-13-acetat (PMA) und Ionomycin (1 mg/ml) in Gegenwart von Golgistop restimuliert. Wir fügten Antikörper (IFN) hinzu -γ,IL-2,TNF). Wir führten eine Zytokinfärbung mit BD Biosciences durch und analysierten die Proben mittels Durchflusszytometrie.