Osservazione sulla Treg nei pazienti con uveite (OTUP)

L'uveite descrive l'infiammazione che esiste nel tratto uveale, ma il decorso della malattia ha una tale varietà di manifestazioni. L'uveite (malattie infiammatorie intraoculari) include malattie che minacciano la vista come la malattia di Behçet, la retinocoroidopatia da uccellini, Vogt-Koyanagi-Harada, l'oftalmia simpatica e la sarcoidosi oculare e possono essere di eziologia infettiva o autoimmune.

Le cellule Tr CD4+ CD25+ svolgono un ruolo chiave nel mantenimento dell'autotolleranza periferica inibendo l'attivazione e la proliferazione delle cellule T non reattive. Oltre ad un effetto soppressore diretto sulle cellule Tr CD4+CD25+. Le cellule Tr CD4+CD25+ possono regolare la risposta immunitaria attraverso le cellule dendritiche. Come i linfociti T citotossici e le cellule natural killer, le cellule Tr CD4+CD25+ umane attivate mostrano citotossicità dipendente dalla perforina nei confronti delle cellule bersaglio autologhe, comprese le cellule T CD4+ e CD8+ attivate.

L'uveoretinite autoimmune sperimentale (EAU) è un modello di uveite. Attualmente si ritiene che le cellule T regolatorie nell'uveite siano l'agente eziologico dell'uveite perché i livelli di IFN-γ, IL-2 (interleuchina-2), TNF (fattore di necrosi tumorale alfa) sono elevati nella retina durante l'uveite in seguito alla stimolazione con IL- 2 è stata sovraregolata nelle PBMC (cellule mononucleate del sangue periferico) di soggetti sani e pazienti con sclerite o uveite. Mediante ELISA, abbiamo confermato che IL-2 induce la secrezione della proteina nelle PBMC umane e nelle cellule T CD4+ di topo. L'esperimento ha rilevato, mediante un test di analisi delle citochine intracellulari, che le cellule che esprimono IFN-γ, IL-2, TNF erano prevalentemente cellule T CD4 + con un fenotipo di memoria. Coerentemente con i nostri dati sull'RNA, la percentuale di cellule T CD4+ era più alta nei pazienti con sclerite rispetto ai soggetti sani.

Abbiamo analizzato il sangue periferico di trenta pazienti con uveite arruolati nel Dipartimento di Oftalmologia, studi clinici dell'ospedale di Xijing. I dati demografici dei pazienti, inclusi età, sesso, diagnosi e farmaci al momento della raccolta del campione.

Descrizione del biocampione:

Sperimentale: Un farmaco: il prednisone dichiara di convincere 1-1,5 mg/Kg.d Sperimentale: Droga B: metotrexato professato per convinto 7,5-15 mg/w, intruglio prednisone professato per convinto 0,5-1 mg/Kg.d Metodi Cellule Tr CD4+CD25+, CTLA-4 e analisi intracellulare di citochine per misurare le cellule che esprimono IFN-γ, IL-2, TNF in 30 pazienti con uveite prima e dopo 1 mese, 3 mesi di prednisone e metotrexato.

Saggi di citochine. Per il rilevamento delle citochine intracellulari, le cellule T CD4+ sono state coltivate come indicato sopra e restimolate per 5 ore con 1 mg/ml di forbolo 12-miristato 13-acetato (PMA) e ionomicina (1 mg/ml) in presenza di Golgistop, abbiamo aggiunto anticorpi (IFN -γ,IL-2,TNF). Abbiamo eseguito la colorazione delle citochine utilizzando BD Biosciences e analizzato i campioni mediante citometria a flusso.