Obserwacja Treg u pacjentów z zapaleniem błony naczyniowej oka (OTUP)

Zapalenie błony naczyniowej opisuje stan zapalny, który występuje w błonie naczyniowej oka, ale przebieg choroby ma tak różnorodne objawy. Zapalenie błony naczyniowej oka (wewnątrzgałkowe choroby zapalne) obejmuje choroby zagrażające wzrokowi, takie jak choroba Behceta, retinochoroidopatia ptasia, choroba Vogta-Koyanagiego-Harady, współczulna choroba oczu i sarkoidoza oka, i może mieć etiologię zakaźną lub autoimmunologiczną.

Komórki CD4+ CD25+ Tr odgrywają kluczową rolę w utrzymaniu obwodowej autotolerancji poprzez hamowanie aktywacji i proliferacji niereaktywnych limfocytów T. Oprócz bezpośredniego efektu supresyjnego na komórki Tr CD4+CD25+. Komórki Tr CD4+CD25+ mogą regulować odpowiedź immunologiczną poprzez komórki dendrytyczne. Podobnie jak cytotoksyczne limfocyty T i komórki NK, aktywowane ludzkie limfocyty Tr CD4+CD25+ wykazują cytotoksyczność zależną od perforyny wobec autologicznych komórek docelowych, w tym aktywowanych limfocytów T CD4+ i CD8+.

Eksperymentalne autoimmunologiczne zapalenie błony naczyniowej oka (EAU) jest modelem zapalenia błony naczyniowej oka. Obecnie uważa się, że regulatorowe limfocyty T w zapaleniu błony naczyniowej oka są czynnikiem etiologicznym zapalenia błony naczyniowej oka, ponieważ poziomy IFN-γ, IL-2 (interleukiny-2), TNF (czynnik martwicy nowotworu alfa) są podwyższone w siatkówce podczas zapalenia błony naczyniowej oka Po stymulacji IL- 2 ekspresja była zwiększona w PBMC (komórkach jednojądrzastych krwi obwodowej) zdrowych osobników i pacjentów z zapaleniem twardówki lub zapaleniem błony naczyniowej oka. Metodą ELISA potwierdziliśmy, że IL-2 indukuje wydzielanie białka w ludzkich PBMC i mysich komórkach T CD4+. Eksperyment wykazał, za pomocą analizy wewnątrzkomórkowej cytokin, że komórkami eksprymującymi IFN-γ, IL-2, TNF były głównie komórki T CD4+ z fenotypem pamięci. Zgodnie z naszymi danymi RNA odsetek komórek T CD4 + był wyższy u pacjentów z zapaleniem twardówki niż u zdrowych osób.

Przeanalizowaliśmy krew obwodową trzydziestu pacjentów z zapaleniem błony naczyniowej oka włączonych do badań klinicznych Oddziału Okulistyki Szpitala Xijing. Dane demograficzne pacjentów, w tym wiek, płeć, rozpoznanie i leki w momencie pobierania próbek.

Opis próbki biologicznej:

Eksperymentalny: Lek: prednizon twierdzi, że jest przekonany 1-1,5 mg/kg dziennie Eksperymentalna: B Lek: metotreksat twierdzi, że jest przekonany 7,5-15 mg/w, mikstura prednizonu twierdzi, że przekonuje 0,5-1 mg/kg dziennie Metody Komórki Tr CD4+CD25+, CTLA-4 i analiza cytokin wewnątrzkomórkowych oznaczają, że komórki wykazujące ekspresję IFN-γ,IL-2,TNF mierzono u 30 pacjentów z zapaleniem błony naczyniowej oka przed i po 1 miesiącu, 3 miesiącach prednizonu i metotreksatu.

Testy cytokin. W celu wykrycia wewnątrzkomórkowych cytokin komórki T CD4+ hodowano jak wskazano powyżej i ponownie stymulowano przez 5 godzin 1 mg/ml 12-mirystynianu 13-octanu forbolu (PMA) i jonomycyny (1 mg/ml) w obecności Golgistop, dodaliśmy przeciwciała (IFN -y,IL-2,TNF). Przeprowadziliśmy barwienie cytokin za pomocą BD Biosciences i przeanalizowaliśmy próbki za pomocą cytometrii przepływowej.